α-羥丁酸脫氫酶測定試劑注冊審查指導原則（2024年第19號）

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α-羥丁酸脫氫酶測定試劑注冊審查指導原則

本指導原則旨在指導注冊申請人對α-羥丁酸脫氫酶測定試劑注冊申報資料的準備及撰寫(xiě)，同時(shí)也為技術(shù)審評部門(mén)審評注冊申報資料提供參考。

本指導原則是對α-羥丁酸脫氫酶測定試劑的一般要求，申請人應依據產(chǎn)品的具體特性確定其中內容是否適用，若不適用，需具體闡述理由及相應的科學(xué)依據，并依據產(chǎn)品的具體特性對注冊申報資料的內容進(jìn)行充實(shí)和細化。

本指導原則是供注冊申請人和技術(shù)審評人員使用的指導性文件，但不包括審評審批所涉及的行政事項，亦不作為法規強制執行，應在遵循相關(guān)法規的前提下使用本指導原則。如果有能夠滿(mǎn)足相關(guān)法規要求的其他方法，也可以采用，但是需要提供詳細的研究資料和驗證資料。

本指導原則是在現行法規、標準體系及當前認知水平下制定的，隨著(zhù)法規、標準體系的不斷完善和科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，本指導原則相關(guān)內容也將適時(shí)進(jìn)行調整。

一、適用范圍

α-羥丁酸脫氫酶測定試劑是指用于定量檢測人體樣本（血清、血漿）中α-羥丁酸脫氫酶活性的試劑。

本指導原則適用于以α-酮丁酸為底物，以酶促反應動(dòng)力學(xué)為檢驗原理，采用全自動(dòng)、半自動(dòng)生化分析儀或分光光度計，進(jìn)行α-羥丁酸脫氫酶（α-Hydroxybutyrate Dehydrogenase,α-HBDH）定量檢測的臨床化學(xué)體外診斷試劑。不包括用于單獨申報的校準品和質(zhì)控品。其他方法學(xué)的α-羥丁酸脫氫酶測定試劑注冊可參考本指導原則，但應根據產(chǎn)品的具體特性確定其中內容是否適用，如不適用，應另行選擇適用自身方法學(xué)特性的研究步驟及方法。

二、注冊審查要點(diǎn)

注冊申報資料的撰寫(xiě)應符合《體外診斷試劑注冊申報資料要求及說(shuō)明》的相關(guān)要求。

（一）監管信息

1.產(chǎn)品名稱(chēng)

產(chǎn)品名稱(chēng)應符合《體外診斷試劑注冊與備案管理辦法》及相關(guān)法規的要求，如α-羥丁酸脫氫酶測定試劑盒（α-酮丁酸底物法）。

產(chǎn)品名稱(chēng)一般由三部分組成。第一部分：被測物名稱(chēng)為α-羥丁酸脫氫酶；第二部分：用途，如檢測試劑；第三部分：方法或者原理，如α-酮丁酸底物法等。

2.分類(lèi)依據

根據《體外診斷試劑分類(lèi)子目錄》，α-羥丁酸脫氫酶測定試劑產(chǎn)品類(lèi)別為：II-4用于酶類(lèi)檢測的試劑，管理類(lèi)別為第二類(lèi)，分類(lèi)編碼為6840。

3.其他信息還包括產(chǎn)品列表、關(guān)聯(lián)文件、申報前與監管機構的聯(lián)系情況和溝通記錄以及符合性聲明等文件。

（二）綜述資料

應按《體外診斷試劑注冊申報資料要求及說(shuō)明》的要求提交概述、產(chǎn)品描述、預期用途、申報產(chǎn)品上市歷史等資料。其中，需注意以下內容：

1.概述

應描述α-羥丁酸脫氫酶測定試劑名稱(chēng)及其確定依據；該產(chǎn)品屬于II-4用于酶類(lèi)檢測的試劑，管理類(lèi)別為第二類(lèi)，分類(lèi)編碼為6840；描述申報產(chǎn)品預期用途；描述有關(guān)申報產(chǎn)品的背景信息概述或特別細節（如適用），如申報產(chǎn)品的歷史概述、歷次提交的信息，與其他經(jīng)批準上市產(chǎn)品的關(guān)系等。

2.產(chǎn)品描述

2.1產(chǎn)品綜述

應明確產(chǎn)品所采用的技術(shù)原理，產(chǎn)品組成，原材料的來(lái)源及制備方法，主要生產(chǎn)工藝，檢驗方法，質(zhì)控品的制備方法及賦值情況，校準品的制備方法及溯源情況等。技術(shù)原理包括反應原理，方法學(xué)，測量方法，信號處理方法，數據獲取和解讀方式，分析前處理步驟等。

描述產(chǎn)品主要研究結果的總結和評價(jià)，包括分析性能評估、參考區間、穩定性以及臨床評價(jià)等。

描述不同包裝規格之間的差異。

描述產(chǎn)品中使用的生物材料或衍生物(如適用)，包括生物學(xué)來(lái)源（如人、動(dòng)物、病原體、重組或發(fā)酵產(chǎn)物）和組織來(lái)源（如血液）的描述。人源性材料須對有關(guān)傳染?。℉IV、HBV、HCV等）病原體檢測予以說(shuō)明；其他動(dòng)物源及微生物來(lái)源的材料，應當說(shuō)明其在產(chǎn)品運輸、使用過(guò)程中對使用者和環(huán)境是安全的，并提供相關(guān)的證明文件。

2.2包裝描述

提供有關(guān)產(chǎn)品包裝信息，包括包裝形狀和材料等。

2.3研發(fā)歷程

闡述申請注冊產(chǎn)品的研發(fā)背景和目的。如有參考的同類(lèi)產(chǎn)品或前代產(chǎn)品，應當提供同類(lèi)產(chǎn)品和/或前代產(chǎn)品的信息，并說(shuō)明選擇其作為研發(fā)參考的原因。

2.4與同類(lèi)和/或前代產(chǎn)品的比較

應著(zhù)重從預期用途、主要組成成分、技術(shù)原理、溯源情況、主要性能指標、參考區間、臨床應用情況等方面寫(xiě)明擬申報產(chǎn)品與境內、外已上市同類(lèi)產(chǎn)品和/或前代產(chǎn)品之間的主要區別。

3.預期用途

3.1預期用途

說(shuō)明產(chǎn)品用于體外定量檢測人體樣本中α-羥丁酸脫氫酶的活性，應明確具體的樣本類(lèi)型如血清、血漿等，適用的樣本類(lèi)型應結合實(shí)際的分析性能研究及臨床研究情況進(jìn)行確認。

3.2 臨床適應證

臨床適應證的發(fā)生率、易感人群、分析物的詳細介紹及與臨床適應證的關(guān)系，相關(guān)的臨床或實(shí)驗室診斷方法。

如：α-HBDH是乳酸脫氫酶同工酶（LDH）的一種，主要代表LDH1和LDH2的活性，在心臟分布較多。血清α-HBDH升高常見(jiàn)于心臟疾病心肌梗死、心肌炎等；溶血性貧血時(shí)血清α-HBDH增高；血清α-HBDH/LDH比值可用于心臟疾病和肝臟疾病的鑒別診斷。

α-羥丁酸脫氫酶測定目前廣泛應用的方法為α-酮丁酸底物法。

3.3適用人群

適用人群：目標患者/人群的信息，對于適用人群包含兒童或新生兒的情況，應進(jìn)行明確。

3.4預期使用者

使用者為經(jīng)過(guò)專(zhuān)業(yè)培訓的醫務(wù)人員或實(shí)驗室專(zhuān)業(yè)技術(shù)人員。

3.5預期使用環(huán)境

預期使用地點(diǎn)為醫學(xué)檢驗實(shí)驗室或醫院、醫療/臨床實(shí)驗室，其檢測過(guò)程中的環(huán)境條件應符合適用儀器正常工作環(huán)境條件，并且試劑儲存需滿(mǎn)足說(shuō)明書(shū)規定的儲存條件及有效期。

（三）非臨床資料

1.產(chǎn)品風(fēng)險管理資料

申請人應考慮產(chǎn)品全生命周期中的各個(gè)環(huán)節，從預期用途、可能的使用錯誤、與安全性有關(guān)的特征、已知及可預見(jiàn)的危害等方面進(jìn)行風(fēng)險分析、風(fēng)險評價(jià)和風(fēng)險控制，綜合評價(jià)產(chǎn)品風(fēng)險可接受程度，形成風(fēng)險管理資料。

申請人應同時(shí)識別出α-羥丁酸脫氫酶測定試劑的特定風(fēng)險，如：抗凝劑（草酸鹽、枸櫞酸鈉、氟化鈉等）、防腐劑（如硼酸等）可能對檢測結果產(chǎn)生干擾；紅細胞中α-HBDH含量高，若樣本為溶血血清或分離不及時(shí)，會(huì )對檢測結果產(chǎn)生干擾等。

2.體外診斷試劑安全和性能基本原則清單

產(chǎn)品應符合《體外診斷試劑安全和性能基本原則清單》各項適用要求所采用的方法，以及證明其符合性的文件。對于其中不適用的各項要求，應當說(shuō)明理由。

對于包含在產(chǎn)品注冊申報資料中的文件，應當說(shuō)明其在申報資料中的具體位置；對于未包含在產(chǎn)品注冊申報資料中的文件，應當注明該證據文件名稱(chēng)及其在質(zhì)量管理體系文件中的編號以備查。

3.產(chǎn)品技術(shù)要求及檢驗報告

3.1產(chǎn)品技術(shù)要求

申請人應當在原材料質(zhì)量和生產(chǎn)工藝穩定的前提下，根據產(chǎn)品研制、前期臨床評價(jià)等結果，依據國家標準，行業(yè)標準(如YY/T 1242《α-羥丁酸脫氫酶檢測試劑（盒）》)及有關(guān)文獻，按照《醫療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫(xiě)指導原則》的有關(guān)要求進(jìn)行產(chǎn)品技術(shù)要求編寫(xiě)。主要包括以下性能指標：外觀(guān)、裝量、準確度/正確度、線(xiàn)性、精密度、試劑空白、分析靈敏度等。如有組合注冊的校準品，校準品主要包括以下性能指標：外觀(guān)、裝量、水分含量（干粉適用）、均勻性等。如有組合注冊的質(zhì)控品，質(zhì)控品主要包括以下性能指標：外觀(guān)、裝量、可接受區間/值、均勻性等。具體產(chǎn)品的性能指標需結合方法學(xué)本身特性，確定其性能指標或者提供此指標不適用的說(shuō)明。

產(chǎn)品的檢驗方法需根據技術(shù)性能指標設定，檢驗方法需優(yōu)先采用公認的或已頒布的標準檢驗方法；自建檢驗方法應進(jìn)行方法學(xué)研究，以確保檢驗方法的科學(xué)性、準確性、可重現性和可操作性。

3.2產(chǎn)品檢驗報告

在保證產(chǎn)品原材料和生產(chǎn)工藝穩定可靠的基礎上，采用在符合醫療器械質(zhì)量管理體系相關(guān)要求的條件下生產(chǎn)的產(chǎn)品進(jìn)行檢驗。有適用的國家標準品的，應當使用國家標準品對產(chǎn)品進(jìn)行檢驗?？商峤灰韵氯我恍问降臋z驗報告：

3.2.1申請人出具的自檢報告。

3.2.2委托有資質(zhì)的醫療器械檢驗機構出具的檢驗報告。

如產(chǎn)品提交自檢報告，還需按照《醫療器械注冊自檢管理規定》的要求提交相應資料。

4.分析性能研究

申請人應提交在有效質(zhì)量管理體系下生產(chǎn)的體外診斷試劑產(chǎn)品的所有分析性能評估資料，對于每項分析性能的研究都應包括研究目的、試驗設計、研究方法、可接受標準、試驗數據、統計方法等詳細資料。分析性能研究的試驗方法，可以參考《定量檢測體外診斷試劑分析性能評估注冊審查指導原則》。

分析性能評估時(shí)應將試劑、儀器和所選用的校準品、質(zhì)控品作為一個(gè)整體進(jìn)行評價(jià)，評估整個(gè)系統的性能是否符合要求。有關(guān)分析性能評估的背景信息也應在申報資料中有所體現，包括試驗時(shí)間、地點(diǎn)、檢驗人員、適用儀器、試劑規格和批號、所選用的校準品和質(zhì)控品、試驗用樣本類(lèi)型及定值方法等。用于分析性能評估的樣本，應盡量與預期適用的真實(shí)臨床樣本一致，并按照說(shuō)明書(shū)描述的方式進(jìn)行樣本采集、處理、運輸和保存。

如申報產(chǎn)品適用不同的機型，需要提交在不同機型上進(jìn)行評估的資料。如試劑包含不同包裝規格，需對各包裝規格間的差異進(jìn)行分析或驗證。如不同規格間存在性能差異，需采用每個(gè)包裝規格產(chǎn)品進(jìn)行分析性能評估；如不同規格間不存在性能差異，需要詳細說(shuō)明各規格間的差別及可能產(chǎn)生的影響，采用具有代表性的包裝規格進(jìn)行分析性能評估。

4.1樣本穩定性

為防止溶血，血液樣本采集后應及時(shí)分離血清或血漿，血漿樣本應使用抗凝劑抗凝。

應充分考慮實(shí)際使用過(guò)程中樣本采集、處理、運輸及保存等各個(gè)階段的條件，對不同類(lèi)型樣本的穩定性分別進(jìn)行評價(jià)并提交研究資料。對于冷凍保存的樣本還應對凍融次數進(jìn)行評價(jià)。內容包括建議的保存條件、添加劑（如抗凝劑）和運輸條件（如涉及）等。樣本穩定性?xún)热莸难芯拷Y果應在說(shuō)明書(shū)【樣本要求】中進(jìn)行詳細描述。

4.2適用的樣本類(lèi)型

血清、血漿是α-羥丁酸脫氫酶檢測的適宜樣本，如果試劑適用于多種樣本類(lèi)型，應采用合理方法評價(jià)每種樣本類(lèi)型的適用性。

其中，針對血清、血漿樣本，可選擇具有統計學(xué)意義數量的樣本進(jìn)行樣本一致性的同源比對研究。對于不具有可比性的樣本類(lèi)型，應對每種樣本類(lèi)型分別進(jìn)行分析性能評估。采用抗凝劑時(shí)，應說(shuō)明抗凝劑對樣本檢測結果的影響。樣本量選擇應體現一定的統計學(xué)意義，說(shuō)明樣本的來(lái)源及制備方法。

4.3校準品的量值溯源和質(zhì)控品的賦值（如適用）

目前α-羥丁酸脫氫酶暫無(wú)有證參考物質(zhì)及參考方法，α-羥丁酸脫氫酶校準品一般溯源至制造商選定測量程序。制造商選定測量程序應選取已上市的成熟檢測系統，溯源明確，未發(fā)生過(guò)不良反應事件，且與待評價(jià)試劑的檢測結果具有相同的活性單位。

如申報產(chǎn)品包括校準品，應當提交溯源資料。如申報產(chǎn)品包括質(zhì)控品，應當提交在所有適用機型上進(jìn)行賦值和驗證的資料。

4.4正確度

對測量正確度的評價(jià)，可采用參考物質(zhì)測定或方法學(xué)比對，申請人可根據實(shí)際情況選擇合理方法進(jìn)行研究。目前α-羥丁酸脫氫酶暫無(wú)有證參考物質(zhì)及參考方法，建議申請人采用方法學(xué)比對進(jìn)行正確度研究。如有有證參考物質(zhì)及參考方法發(fā)布，優(yōu)先采用參考物質(zhì)測定進(jìn)行研究。

4.4.1方法學(xué)比對

采用參考測量程序或國內普遍認為質(zhì)量較好的已上市同類(lèi)試劑作為參比方法，與擬申報試劑同時(shí)測定一批臨床樣本，臨床樣本的濃度水平應覆蓋申報試劑的測量區間并均勻分布。比較兩種方法之間的偏倚，如果偏倚在申請人給定的允許誤差范圍內，說(shuō)明兩種測定系統對樣本的測定結果基本相符。擬申報試劑與比對試劑相比，對同一份臨床樣本的醫學(xué)解釋不會(huì )產(chǎn)生差異結果。

在實(shí)施方法學(xué)比對前，應分別對擬申報試劑和比對試劑進(jìn)行初步評估，只有在確認兩者都分別符合各自相關(guān)的質(zhì)量標準后方可進(jìn)行比對試驗。方法學(xué)比對時(shí)應注意適用機型、質(zhì)量控制、樣本類(lèi)型、濃度分布范圍并對結果進(jìn)行合理的統計學(xué)分析。

如條件允許，建議與具有相同溯源性的分析系統作比對。

4.4.2參考物質(zhì)測定

參考物質(zhì)包括具有互換性的有證參考物質(zhì)、公認的參考品、標準品，參考測量程序賦值的臨床樣本等。不可采用產(chǎn)品校準品、申報試劑檢測系統定值的質(zhì)控品進(jìn)行正確度評價(jià)。

采用至少兩個(gè)濃度的參考物質(zhì)，代表臨床意義相關(guān)的高、低濃度水平，進(jìn)行多次重復測定，根據測定結果平均值與參考量值計算偏倚。如參考物質(zhì)只有一個(gè)水平，且無(wú)合理稀釋方法，亦可在說(shuō)明原因的基礎上，僅采用一個(gè)水平的參考物質(zhì)進(jìn)行正確度評價(jià)，結果應在申請人給定范圍內。

4.5精密度

應根據各測量條件對檢測結果影響程度的分析，設計合理的精密度試驗方案進(jìn)行評價(jià)，包括重復性、中間精密度和再現性。

精密度研究用樣本一般為臨床實(shí)際檢測樣本或其混合物。樣本濃度一般包括測量區間高、中、低在內的3～5個(gè)水平，應有醫學(xué)決定水平或參考區間上/下限濃度附近的樣本。精密度研究可能涉及多天、多地點(diǎn)檢測，應確保樣本的穩定性和一致性，可將樣本等分保存。

4.6空白限（LoB）、檢出限（LoD）和定量限（LoQ）

4.6.1空白限、檢出限與定量限的建立

空白限（LoB），檢出限(LoD)，定量限(LoQ)的建立需分別選擇多個(gè)獨立的樣本（空白樣本、低濃度水平樣本、已知濃度的低水平樣本），在多天內進(jìn)行研究。

空白限一般由多個(gè)獨立的空白樣本（無(wú)分析物）的測定結果，經(jīng)計算獲得；檢出限一般由多個(gè)低濃度（含有分析物）樣本的測定結果結合空白限（或單獨計算）獲得。定量限應滿(mǎn)足預設正確度指標，即考慮偏倚和精密度的要求。

4.6.2空白限、檢出限與定量限的驗證

空白限、檢出限及定量限的驗證，每個(gè)項目需選擇至少2個(gè)樣本（空白樣本、檢出限濃度樣本、定量限濃度樣本），在多天內進(jìn)行試驗。每個(gè)試劑批次至少需要獲得20個(gè)檢測結果，計算與4.6.1 研究獲得的空白限、檢出限及定量限呈現一致性的檢測結果比例，如果比例符合統計學(xué)要求/預設的臨界值，則空白限、檢出限及定量限得到驗證。

4.7分析特異性

4.7.1干擾試驗

干擾物質(zhì)研究應當考慮常見(jiàn)的內源性干擾、外源性干擾和已有報道的干擾物質(zhì)等對產(chǎn)品檢測結果的影響。常見(jiàn)的內源性干擾物質(zhì)包括膽紅素、血紅蛋白、甘油三酯等，常見(jiàn)的外源性干擾物質(zhì)包括樣本添加劑（如防腐劑）、常用藥物及其代謝物（如維生素C）、患者群體使用的藥物及其代謝物、膳食物質(zhì)、樣本收集或處理過(guò)程中接觸到的物質(zhì)，樣本污染物；亦應考慮文獻中已報道的對類(lèi)似試劑或測量程序存在干擾的物質(zhì)。申請人應根據產(chǎn)品特點(diǎn)選擇潛在的干擾物質(zhì)進(jìn)行驗證。

研究的干擾物濃度應覆蓋臨床樣本中的最高濃度（最差情形），并對干擾的程度進(jìn)行量化。將研究結果在說(shuō)明書(shū)中進(jìn)行描述，明確干擾物質(zhì)影響的最大濃度。待評價(jià)的樣本濃度建議采用至少2個(gè)分析物水平的樣本，其濃度應在醫學(xué)決定水平或參考區間上/下限附近。

4.7.2交叉反應

交叉反應研究需對可能的交叉反應物質(zhì)進(jìn)行檢測，對檢測結果設定合理的接受范圍，如果超出接受范圍，可認為該物質(zhì)產(chǎn)生交叉反應，應評估該物質(zhì)濃度與交叉程度之間的關(guān)系。如檢測結果在接受范圍內，可認為該濃度的物質(zhì)不產(chǎn)生交叉反應，應明確不產(chǎn)生交叉反應的物質(zhì)濃度上限。

建議選擇高濃度的交叉反應物質(zhì)進(jìn)行驗證，應提供用于交叉反應驗證物質(zhì)的來(lái)源、制備、濃度等基本信息。

4.8測量區間及可報告區間

4.8.1線(xiàn)性區間

線(xiàn)性區間的研究所用的樣本基質(zhì)應盡可能與臨床實(shí)際檢測的樣本相似，需采用高值和零濃度/低值樣本配制一系列不同濃度的樣本。當建立試劑的線(xiàn)性區間時(shí)，需配制較預期線(xiàn)性區間更寬的至少9個(gè)不同濃度的樣本（不包括零濃度樣本），每個(gè)樣本進(jìn)行多次重復檢測，根據可接受線(xiàn)性偏差和各濃度的重復性，確定檢測次數。采用重復檢測均值和預期值進(jìn)行直線(xiàn)回歸分析，建議采用加權最小二乘回歸等分析方法，提供散點(diǎn)圖、線(xiàn)性回歸方程、線(xiàn)性相關(guān)系數（r）及線(xiàn)性偏差，判斷結果是否滿(mǎn)足可接受標準。

當驗證試劑的線(xiàn)性區間時(shí)，需配制覆蓋整個(gè)線(xiàn)性區間的至少5個(gè)不同濃度的樣本，每個(gè)樣本至少重復檢測2次。

測量區間，也稱(chēng)分析測量區間，在該區間內，臨床樣本在未經(jīng)稀釋、濃縮，或非常規測量程序步驟中的其他前處理情況下，檢測結果的線(xiàn)性偏差、不精密度和偏倚均在可接受范圍內。測量區間下限為定量限，線(xiàn)性區間包含測量區間。

4.8.2可報告區間

如對超出測量區間濃度的樣本可進(jìn)行稀釋后檢測，應研究合適的稀釋液和稀釋倍數，從而確定試劑的可報告區間?？蓤蟾鎱^間下限為檢出限，上限為測量區間上限╳稀釋倍數。

4.9試劑空白

4.9.1試劑空白吸光度

用生理鹽水測試試劑（盒），在37℃、340nm 波長(cháng)、1cm光徑條件下，記錄測試啟動(dòng)時(shí)的吸光度（A1）和約5 分鐘（t）后的吸光度（A2），A2測試結果即為試劑空白吸光度測定值。

4.9.2試劑空白吸光度變化率

記錄測試啟動(dòng)時(shí)的吸光度（A1）和n分鐘(t)后的吸光度（A2），計算出每分鐘吸光度變化值 (|A2-A1|/t )，即為試劑空白吸光度變化率（ΔA/min）。

4.10分析靈敏度

用已知活性的樣品測試試劑（盒），記錄試劑（盒）在37℃、340nm波長(cháng)、1cm光徑條件下的吸光度變化率。按照申請人規定的分析靈敏度計算公式計算分析靈敏度。

5.穩定性研究

一般應包含研究方案、報告和數據三部分內容。

5.1實(shí)時(shí)穩定性

提交至少三批申報產(chǎn)品在實(shí)際儲存條件下保存至成品有效期后的實(shí)時(shí)穩定性研究資料。明確儲存的環(huán)境條件（如溫度、濕度和光照）及有效期。

5.2使用穩定性

提交申報產(chǎn)品實(shí)際使用期間穩定性的研究資料，應包括所有組成成分的開(kāi)瓶穩定性。適用時(shí)提交復溶穩定性、機載穩定性及凍融次數研究資料等。機載穩定性應選擇所有機型進(jìn)行真實(shí)機載研究，如不同機型間試劑倉設計、進(jìn)樣模式、溫濕度范圍等無(wú)差異，也可選擇代表性機型研究。如產(chǎn)品中包含校準品，還應提交校準頻率或校準穩定性研究資料。明確產(chǎn)品使用的溫度、濕度條件等。

5.3運輸穩定性

提交申報產(chǎn)品可在特定或者預期的條件下運輸的研究資料，應說(shuō)明產(chǎn)品正確運輸的環(huán)境條件（如溫度、濕度、光照和機械保護等）。同時(shí)說(shuō)明產(chǎn)品的包裝方式以及暴露的最差運輸條件。運輸穩定性研究可結合于實(shí)時(shí)穩定性研究中。試劑的穩定性研究應注意選取代表性包裝規格進(jìn)行研究。

試劑穩定性?xún)热莸难芯拷Y果應在說(shuō)明書(shū)【儲存條件及有效期】中進(jìn)行詳細描述。

6.參考區間

申報產(chǎn)品可以建立自己的參考區間或驗證參考區間，但都要確保參考區間的可溯源性，記錄確定參考區間的所有步驟，包括參考個(gè)體的選擇、分析前因素、樣本檢測以及統計分析方法等。

如參考已發(fā)布實(shí)施的臨床檢測參考區間標準等驗證參考區間，應依據《體外診斷試劑參考區間確定注冊審查指導原則》中“（二）參考區間的驗證”章節相關(guān)條件進(jìn)行驗證，如驗證通過(guò)，可直接采用經(jīng)驗證的參考區間；如驗證不通過(guò)，應建立參考區間。

參考區間的建立應參考《體外診斷試劑參考區間確定注冊審查指導原則》中“（一）參考區間的建立”章節相關(guān)要求，提交建立參考區間所采用樣本來(lái)源及詳細的試驗資料。研究樣本來(lái)源應覆蓋年齡、性別等因素，盡可能考慮樣本來(lái)源的多樣性、代表性。應明確參考人群的篩選標準，研究例數通常應不低于120例。（注：研究例數不低于120例是為了保證能正確估計參考限的90%置信區間。申請人應根據預設的置信水平進(jìn)行樣本研究例數的選擇并符合統計學(xué)要求。）α-羥丁酸脫氫酶不同年齡階段（嬰兒、兒童及成人）參考區間有差異，申請人可根據實(shí)際情況進(jìn)行分組研究，例數應符合統計學(xué)要求。

7.其他資料

7.1三批產(chǎn)品的生產(chǎn)及自檢記錄。

7.2證明產(chǎn)品安全性、有效性的其他非臨床研究資料。

（四）臨床評價(jià)資料

根據體外診斷試劑臨床評價(jià)的相關(guān)要求，該項目已列入《免于臨床試驗體外診斷試劑目錄》，申請人可按照《免于臨床試驗的體外診斷試劑臨床評價(jià)技術(shù)指導原則》要求進(jìn)行臨床評價(jià)。

申請人也可通過(guò)臨床試驗的方式進(jìn)行臨床評價(jià)；如申請人無(wú)法按要求進(jìn)行臨床評價(jià)或預期用途超出豁免目錄中的描述，應進(jìn)行臨床試驗；臨床試驗的倫理、方案的制定以及報告的撰寫(xiě)等臨床試驗資料均應符合《體外診斷試劑臨床試驗技術(shù)指導原則》對臨床試驗資料的規定，相關(guān)資料簽章應符合《醫療器械臨床試驗質(zhì)量管理規范》的要求。

（五）產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)和標簽樣稿

產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)和標簽的格式應符合《醫療器械說(shuō)明書(shū)和標簽管理規定》和《體外診斷試劑說(shuō)明書(shū)編寫(xiě)指導原則》的要求。產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的所有內容均應與申請人提交的注冊申報資料中的相關(guān)研究結果保持一致，如某些內容引用自參考文獻，則應以規范格式對此內容進(jìn)行標注，并單獨列明參考文獻的相關(guān)信息。

境外試劑應當提交產(chǎn)品原文說(shuō)明書(shū)，中文說(shuō)明書(shū)除格式要求外，其內容應盡量保持與原文說(shuō)明書(shū)的一致性，翻譯力求準確且符合中文表達習慣。

以下內容僅對α-羥丁酸脫氫酶測定試劑說(shuō)明書(shū)的重點(diǎn)內容進(jìn)行詳細說(shuō)明，說(shuō)明書(shū)其他內容應根據《體外診斷試劑說(shuō)明書(shū)編寫(xiě)指導原則》要求進(jìn)行編寫(xiě)。

1.【產(chǎn)品名稱(chēng)】

通用名稱(chēng)，試劑名稱(chēng)由三部分組成：被測物名稱(chēng)、用途、方法或原理。例如：α-羥丁酸脫氫酶測定試劑盒（α-酮丁酸底物法）。

2.【包裝規格】

注明可測試的樣本數或裝量，如××測試/盒、××人份/盒、××mL，除國際通用計量單位外，其余內容均應采用中文進(jìn)行表述。如有貨號，可增加貨號信息。

2.1包裝規格應明確裝量（如××mL；××人份）；

2.2帶有校準品或質(zhì)控品應明確標識；

2.3與產(chǎn)品技術(shù)要求中所列的包裝規格一致；

2.4如不同包裝規格有與之特定對應的機型，應同時(shí)明確適用機型。

3.【預期用途】

首段內容說(shuō)明試劑用于體外定量檢測人樣本（血清或血漿）中α-羥丁酸脫氫酶的活性。第二段應詳細說(shuō)明預期用途。包括適用人群，相關(guān)的臨床適應證和檢測目的等，如臨床上主要用于心肌梗死的輔助診斷。

其余段落對被測分析物進(jìn)行背景介紹、說(shuō)明相關(guān)的臨床或實(shí)驗室診斷方法；說(shuō)明與預期用途相關(guān)的臨床背景情況；說(shuō)明被測分析物與臨床適應證的關(guān)系。

如：α-HBDH是乳酸脫氫酶同工酶（LDH）的一種，主要代表LDH1和LDH2的活性，在心臟分布較多。血清α-HBDH升高常見(jiàn)于心臟疾病心肌梗死、心肌炎等；溶血性貧血時(shí)血清α-HBDH增高；血清α-HBDH/LDH比值可用于心臟疾病和肝臟疾病的鑒別診斷。α-羥丁酸脫氫酶測定目前廣泛應用的方法為α-酮丁酸底物法。

4.【檢驗原理】

根據產(chǎn)品采用的方法學(xué)說(shuō)明檢驗的原理，檢測原理的描述應結合產(chǎn)品主要組成成分、被測物和產(chǎn)物的關(guān)系進(jìn)行描述，必要時(shí)可結合圖示方法描述。

如：樣本中α-羥丁酸脫氫酶催化α-酮丁酸還原為α-羥丁酸，同時(shí)還原型NADH被氧化為氧化型NAD+；在特定波長(cháng)下，NADH的消耗速率與血清α-HBDH濃度成正比，從而計算出α-HBDH的含量。

反應式如下：

5.【主要組成成分】

應明確以下內容：

5.1說(shuō)明試劑盒包含組分的名稱(chēng)、數量、裝量。說(shuō)明各組分中的核心反應成分（如α-酮丁酸，還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH））、基質(zhì)（如磷酸鹽緩沖液）、防腐劑等。必要時(shí)，明確組分在基質(zhì)中的濃度、比例等信息。對于多組分產(chǎn)品，說(shuō)明不同批號試劑盒中各組分是否可以互換。

5.2產(chǎn)品如包含校準品、質(zhì)控品，說(shuō)明濃度水平、核心反應成分及其生物學(xué)來(lái)源，明確基質(zhì)、防腐劑等。此外，校準品應明確定值及其溯源性，質(zhì)控品應注明靶值和靶值范圍，若校準品或質(zhì)控品的值為批特異，可注明批特異，并附單獨的靶值。

5.3試劑盒中不包含但對該項檢測必需的組分，應列明試劑的名稱(chēng)、注冊人（備案人）。如該試劑已取得注冊證號/備案號，需注明“注冊證編號（備案編號）及貨號”；如該試劑正處于注冊/備案階段，需注明“貨號及注冊證編號:（留空）/備案編號:（留空）”。

6.【儲存條件及有效期】

首段明確貨架保存條件和有效期，如2~8℃保存，有效期12個(gè)月。同時(shí)明確特殊保存條件，如禁止冷凍、光線(xiàn)和濕度要求等。

其他段落描述以下內容：

明確各組分的使用穩定性，包括開(kāi)封保存條件和保存時(shí)長(cháng)、凍融次數、機載穩定性等。

明確生產(chǎn)日期、使用期限/失效日期/有效期至見(jiàn)標簽。

若各組分的保存條件不一致，應分別描述。

若各組分的有效期不同，則試劑盒的有效期為最短保存時(shí)間。

保存溫度不應有模糊表述，如“常溫”“室溫”，應直接以℃為單位。

7.【適用儀器】

明確所適用的儀器類(lèi)型，應細化到具體廠(chǎng)家、型號。如需要可提供與儀器有關(guān)的信息以便指導用戶(hù)操作。如適用儀器為非通用的儀器則需寫(xiě)明其具體型號，避免“系列”。

8.【樣本要求】

重點(diǎn)明確以下內容：

8.1樣本的類(lèi)型：明確適用的樣本類(lèi)型，如有抗凝血應明確抗凝劑。

8.2樣本的穩定性：明確樣本采集后和處理后的保存條件和期限等。冷藏/冷凍樣本檢測前是否需恢復至室溫、凍融次數的要求。以上內容應與樣本穩定性的研究結果一致。

9.【檢驗方法】

應詳細說(shuō)明試驗操作的各個(gè)步驟，包括：  

9.1樣本的處理：詳細描述樣本的處理方式和步驟，需要稀釋的樣本應明確稀釋液種類(lèi)及稀釋比例。

9.2試劑配制：各試劑組分的稀釋、混合及其他必要的程序等。

9.3反應步驟、反應體系和參數設置：詳細描述反應步驟和各反應步驟所需試驗條件，如pH值、時(shí)間、溫度、波長(cháng)等。明確樣本和檢測過(guò)程中各組分的用量體積。

9.4校準程序：校準品的使用方法、注意事項、校準曲線(xiàn)的繪制。校準有效期及需要重新校準的情況。推薦的校準周期。

9.5質(zhì)量控制程序：質(zhì)控品的使用方法、對質(zhì)控結果的必要解釋以及推薦的質(zhì)控周期等。

9.6試驗結果的計算或讀取，包括對每個(gè)系數及對每個(gè)計算步驟的解釋?zhuān)ㄈ邕m用）。如果可能，應舉例說(shuō)明。

10.【參考區間】

明確參考區間，并簡(jiǎn)要說(shuō)明參考區間的確定方法。應包含參考區間確定的基本信息，包括：樣本量、參考人群特征（如性別、年齡、種族等）和采用的統計學(xué)方法。

建議注明以下字樣“由于地理、人種、性別等差異，建議各實(shí)驗室建立自己的參考區間”。

11.【檢驗結果的解釋】

11.1應根據其臨床意義對可能出現的結果進(jìn)行合理的解釋。

11.2說(shuō)明在何種情況下應對樣本進(jìn)行重復測試，以及在重復測試時(shí)需要采取的樣本處理方式。

11.3若超過(guò)線(xiàn)性區間上限的高濃度樣本可稀釋后檢測，則應說(shuō)明樣本的最大可稀釋倍數、稀釋溶液等信息。

12.【檢驗方法的局限性】

綜合產(chǎn)品的預期用途、臨床背景、檢測方法等信息，對可能出現的局限性進(jìn)行相關(guān)說(shuō)明，申請人選擇適用的條款在產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)中予以闡述。

12.1明確常見(jiàn)干擾物質(zhì)對檢測結果的影響，企業(yè)可根據自身情況對特殊干擾物進(jìn)行說(shuō)明，并注明可接受的最高限值，不應使用模糊的描述方式。

12.2分析異常值出現的可能因素，明確說(shuō)明何種情況下需要進(jìn)行確認試驗，詳述在確認試驗時(shí)對待測樣本可能采取的優(yōu)化條件等。

13.【產(chǎn)品性能指標】

此項內容為分析性能研究資料和臨床評價(jià)資料的總結，應:

13.1概括描述每項分析性能研究如準確度/正確度、精密度、靈敏度、測量區間及可報告區間、分析特異性等適用項目的研究方法和結果。

13.2概括描述臨床評價(jià)包括免于臨床試驗的臨床評價(jià)和臨床試驗的方法和結果。

14.【注意事項】

建議包括以下內容：

14.1產(chǎn)品僅用于體外診斷。檢測結果僅供臨床參考，對患者的臨床診治應結合其癥狀/體征、病史、其他實(shí)驗室檢查及治療反應等情況綜合考慮。

14.2如無(wú)確切的證據證明其安全性，對所有樣本和反應廢棄物都應視為傳染源對待，提示操作者采取必要的防護措施。若試劑組分中，如質(zhì)控品、校準品等含有人源物質(zhì)的組分，這些組分亦應該被視為傳染源對待；對于動(dòng)物源性組分，應給出具有潛在感染性的警告。

14.3采用不同方法學(xué)的試劑檢測所得結果不應直接相互比較，以免造成錯誤的醫學(xué)解釋?zhuān)唤ㄗh實(shí)驗室在發(fā)給臨床醫生的檢測報告注明所用試劑特征。

14.4其他需要說(shuō)明的注意事項。

（六）質(zhì)量管理體系文件

申請人應當在申請注冊時(shí)提交與產(chǎn)品研制、生產(chǎn)有關(guān)的質(zhì)量管理體系相關(guān)資料，主要包括綜述、生產(chǎn)制造信息、質(zhì)量管理體系程序、管理職責程序、資源管理程序、產(chǎn)品實(shí)現程序、質(zhì)量管理體系的測量、分析和改進(jìn)程序、其他質(zhì)量體系程序信息、質(zhì)量管理體系核查文件等內容。

三、參考文獻

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[11]國家藥品監督管理局.體外診斷試劑臨床試驗技術(shù)指導原則:國家藥監局通告2021年第72號[Z].

[12]國家藥監局 國家衛生健康委.醫療器械臨床試驗質(zhì)量管理規范:國家藥監局 國家衛生健康委公告2022年第28號[Z].

[13]國家食品藥品監督管理局.醫療器械說(shuō)明書(shū)和標簽管理規定:國家食品藥品監督管理總局令第6號[Z].

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[15]YY/T 1789.1-2021,體外診斷檢驗系統性能評價(jià)方法:第1部分：精密度[S].

[16]GB/T 26124-2011,臨床化學(xué)體外診斷試劑盒[S].

[17]YY/T 1242-2014,α-羥丁酸脫氫酶檢測試劑（盒）[S].