人類(lèi)免疫缺陷病毒檢測試劑臨床試驗注冊審查指導原則（2023年修訂版）（2024年第4號）

附件：人類(lèi)免疫缺陷病毒檢測試劑臨床試驗注冊審查指導原則（2023年修訂版）（2024年第4號）.doc

人類(lèi)免疫缺陷病毒檢測試劑臨床試驗注冊審查指導原則（2023年修訂版）

本指導原則旨在指導注冊申請人對人類(lèi)免疫缺陷病毒檢測試劑臨床試驗的設計及開(kāi)展，同時(shí)也為技術(shù)審評部門(mén)對注冊申報資料的技術(shù)審評提供參考。

本指導原則是針對人類(lèi)免疫缺陷病毒檢測試劑臨床評價(jià)的一般要求，申請人應依據產(chǎn)品的具體特性確定其中內容是否適用，若不適用，需具體闡述理由及相應的科學(xué)依據，并依據產(chǎn)品的具體特性對注冊申報資料的內容進(jìn)行充實(shí)和細化。

本指導原則是對申請人和審查人員的指導性文件，但不包括注冊審批所涉及的行政事項，亦不作為法規強制執行，如果有能夠滿(mǎn)足相關(guān)法規要求的其他方法，也可以采用，但需要詳細闡明理由，并對其科學(xué)合理性進(jìn)行驗證，提供詳細的研究資料和驗證資料，相關(guān)人員應在遵循相關(guān)法規的前提下使用本指導原則。

本指導原則是在現行法規和標準體系以及當前認知水平下制定的，隨著(zhù)法規和標準的不斷完善，以及科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，本指導原則相關(guān)內容也將適時(shí)進(jìn)行調整。

一、適用范圍

人類(lèi)免疫缺陷病毒（Human Immunodeficiency Virus，HIV）檢測試劑是指利用免疫學(xué)及分子生物學(xué)等方法原理對人血清、血漿或其他體液中的特定的HIV生物學(xué)標記物，包括HIV 1型（HIV-1）p24抗原、HIV抗體、HIV核酸等進(jìn)行定量或定性分析的試劑。

本指導原則適用于利用免疫層析法、化學(xué)發(fā)光法、時(shí)間分辨免疫熒光法、免疫印跡法等免疫學(xué)方法對HIV抗原和/或抗體進(jìn)行定性檢測的體外診斷試劑，以及應用分子生物學(xué)方法（如實(shí)時(shí)熒光聚合酶鏈反應等）對HIV核糖核酸進(jìn)行定量或定性檢測和分析的體外診斷試劑，適用于首次注冊產(chǎn)品及申請變更注冊的產(chǎn)品。

本指導原則不適用于國家法定血源篩查用HIV檢測試劑。

二、臨床試驗設計

臨床試驗的開(kāi)展、方案的制定以及報告的撰寫(xiě)等均應符合相關(guān)法規及《體外診斷試劑臨床試驗技術(shù)指導原則》的要求，如相關(guān)法規、文件有更新，臨床試驗應符合更新后的要求。

（一）臨床試驗設計

1.臨床試驗機構及人員

申請人應選擇不少于3家經(jīng)醫療器械臨床試驗機構備案的臨床機構開(kāi)展臨床試驗。建議在選擇臨床單位時(shí)，綜合流行病學(xué)背景、HIV的特性等因素選擇臨床試驗機構，臨床試驗機構的實(shí)驗操作人員應熟悉檢測系統的各環(huán)節（儀器、試劑、質(zhì)控及操作程序等），熟悉臨床試驗方案。

2.臨床試驗適用人群和樣本類(lèi)型

    2.1適用人群

對于不同的檢測試劑，其預期用途不同，因此入組人群亦不同。申請人應根據不同的要求入組適用人群開(kāi)展臨床試驗。

對于HIV抗體檢測、抗原抗體聯(lián)合檢測、HIV核酸定性檢測試劑，預期用途為HIV感染的輔助診斷。入組人群應為疑似HIV感染的人群，包括具有HIV相關(guān)的癥狀/體征、以及有相關(guān)流行病學(xué)史的人群。應納入HIV感染的不同進(jìn)展階段，包括急性期、無(wú)癥狀感染期及艾滋病期病例。為考察申報產(chǎn)品的特異度，臨床試驗中還應納入可能會(huì )對試劑檢測造成干擾的樣本，如自身免疫病患者、類(lèi)風(fēng)濕因子（RF）陽(yáng)性的病例、孕婦以及其他可能會(huì )造成交叉反應的病原體（乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒等）感染的病例等。對于HIV抗體檢測第三代發(fā)光類(lèi)試劑,應選擇至少5套經(jīng)過(guò)全面驗證的陽(yáng)轉血清盤(pán)進(jìn)行檢測，對于抗原抗體聯(lián)合檢測第四代發(fā)光類(lèi)試劑，應選擇至少10套經(jīng)過(guò)全面驗證的陽(yáng)轉血清盤(pán)進(jìn)行檢測，以評價(jià)申報產(chǎn)品對于HIV感染早期的檢出能力。對于抗原抗體聯(lián)合檢測試劑，為充分評價(jià)抗原的檢測性能，應納入至少10例單獨抗原陽(yáng)性的樣本，如臨床試驗中難以獲得，可使用商業(yè)化的血清盤(pán)進(jìn)行檢測。

對于 HIV RNA定量檢測試劑，預期用途為通過(guò)對患者血清或血漿中人類(lèi)免疫缺陷病毒核酸基線(xiàn)水平和變化情況的監測，用于評估抗病毒治療的應答和治療效果。入組人群應以已確診HIV感染的病例為主，應包括正在接受抗病毒治療的患者以及未接受抗病毒治療的患者，確保樣本HIV病毒載量覆蓋申報產(chǎn)品的線(xiàn)性范圍。同時(shí)應入組一部分陰性病例來(lái)考察其檢測的特異度。如此類(lèi)試劑預期用途除用于治療監測外，還可用于HIV感染的輔助診斷，則還應按照上述關(guān)于輔助診斷預期用途的臨床試驗設計開(kāi)展相應的臨床評價(jià)。

對于HIV抗體檢測試劑（免疫印跡法），預期用途為用于經(jīng)HIV抗體篩查試驗復檢為有反應性的樣本的確認。入組人群應以HIV抗體篩查試驗復檢為有反應性的病例。為了能夠考察確證試劑的特異度，臨床試驗中應納入一定數量的經(jīng)確證試劑檢測為陰性的人群。

我國境內流行的HIV主要為HIV-1型M組，其常見(jiàn)的基因型主要為B/B’、BC重組型（包括CRF 07_BC重組型和CRF 08_BC重組型）以及AE重組型（CRF 01_AE重組型）。在選擇HIV感染者病例時(shí)，首先應根據HIV流行的情況，選擇能代表我國不同地區流行基因型的HIV-1感染者病例，以對試劑檢測我國流行的HIV-1病毒的能力進(jìn)行客觀(guān)科學(xué)的評價(jià)?？贵w檢測試劑以及抗原抗體檢測試劑，常見(jiàn)基因型每種不少于10例。對于核酸檢測試劑，每種常見(jiàn)基因型應至少30例，同時(shí)按基因型對樣本進(jìn)行亞組分析。對于我國境內罕見(jiàn)的基因型（1型O組、2型），也應進(jìn)行適當驗證，樣本應經(jīng)過(guò)科學(xué)的驗證和確認，考慮到此類(lèi)樣本的不易獲得性，樣本可來(lái)源于HIV感染者，也可來(lái)源于經(jīng)過(guò)科學(xué)驗證的血清盤(pán)。

臨床試驗中還應注意納入一定數量的低滴度/弱陽(yáng)性樣本。

2.2樣本類(lèi)型

樣本類(lèi)型一般為血清、血漿。如經(jīng)臨床前研究證明分析性能沒(méi)有差異，例如血清和血漿樣本，則臨床試驗中可進(jìn)行匯總統計。對于口腔粘膜滲出液、尿液等體液樣本，應單獨進(jìn)行臨床評價(jià)。

臨床樣本的處理、保存和核酸提取等應分別滿(mǎn)足申報產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)及對比試劑說(shuō)明書(shū)的相關(guān)要求。

3.對比方法的選擇

對于已有已上市同類(lèi)產(chǎn)品的試劑，可選擇境內已批準上市、臨床普遍認為質(zhì)量較好的同類(lèi)產(chǎn)品作為對比試劑，采用試驗體外診斷試劑與之進(jìn)行對比試驗研究，考察申報產(chǎn)品與對比試劑的一致性。對比試劑的選擇應從預期用途、樣本要求、檢測性能等方面，確認其與申報產(chǎn)品具有較好的可比性。

對于無(wú)已上市同類(lèi)產(chǎn)品的新HIV檢測試劑，應采用試驗體外診斷試劑與臨床參考標準進(jìn)行比較研究。臨床參考標準即參照臨床公認的臨床診療指南、艾滋病診斷標準等進(jìn)行病例診斷的方法。對于核酸定量檢測試劑同時(shí)還應對其量值與疾病進(jìn)展狀況、轉歸、治療情況等的相關(guān)性進(jìn)行分析。

對于口腔粘膜滲出液、尿液等體液樣本，無(wú)論申報產(chǎn)品采用何種檢驗方法，均應采用來(lái)自同一患者的血液樣本進(jìn)行同源對比試驗。檢測血液樣本用對比試劑的檢測性能應盡量高于申報產(chǎn)品。

4.最低樣本量

臨床試驗樣本量應采用適當的統計學(xué)方法進(jìn)行估算，并詳細描述所使用統計方法及各參數的確定依據。

對于抗體檢測、抗原抗體聯(lián)合檢測以及核酸定性檢測試劑，此部分臨床試驗目的為評估兩種檢測方法之間的一致性，因此建議采用單組目標值法公式進(jìn)行最低樣本量的估算。通過(guò)陽(yáng)性符合率和陰性符合率來(lái)分別計算所需陽(yáng)性樣本和陰性樣本的例數。陽(yáng)性、陰性符合率的臨床可接受標準（P0）一般建議不低于98%。

公式中，n為樣本量；Z1-α/2、Z1-β為顯著(zhù)性水平和把握度的標準正態(tài)分布的分數位，P0為評價(jià)指標的臨床可接受標準，PT為申報產(chǎn)品評價(jià)指標預期值。

對于核酸定量檢測試劑，也應選擇合適的樣本量估算的方法進(jìn)行最低樣本量的估算。應注意所納入的臨床樣本應覆蓋申報產(chǎn)品的線(xiàn)性范圍。

5. 統計分析

5.1定性檢測試劑

應選擇合適的統計方法對臨床試驗結果進(jìn)行統計分析，對于定性檢測的一致性評價(jià)，常選擇交叉四格表的形式總結兩種方法的結果，評價(jià)指標一般包括陽(yáng)性符合率/靈敏度、陰性符合率/特異度，Kappa值等，并計算相應的95%置信區間。

對于兩種方法檢測不一致的樣本，應采用臨床參考標準或其他方法再次進(jìn)行確認或提供臨床診斷資料以進(jìn)一步明確受試者（采集樣本時(shí)）所處的感染狀態(tài)，同時(shí)結合患者的臨床癥狀/體征對差異原因及可能結果進(jìn)行分析，從而對申報產(chǎn)品的性能進(jìn)行客觀(guān)科學(xué)的評價(jià)。

5.2核酸定量檢測試劑

5.2.1應根據臨床試驗數據繪制散點(diǎn)圖，進(jìn)行相關(guān)性分析。

5.2.2采用Bland-Altman法，計算一致性限度，評價(jià)兩種檢測結果的一致性。一致性限度應在臨床所能接受的界值范圍內。

5.2.3 采用回歸分析對兩種檢測方法的一致性進(jìn)行評價(jià)。應根據數據分布特點(diǎn)等因素選擇適用的回歸分析方法，如Passing-Bablok回歸、Deming回歸和最小二乘回歸等?；貧w分析應重點(diǎn)觀(guān)察回歸方程的回歸系數和截距等指標，計算回歸系數和截距的95%置信區間。

5.2.4 選擇交叉四格表的形式總結兩種試劑的定性檢測結果，計算陽(yáng)性符合率、陰性符合率和總符合率、Kappa值等，并計算相應的95%置信區間。

（二）通用要求

1.臨床試驗方案

臨床試驗實(shí)施前，研究人員應從流行病學(xué)、統計學(xué)、臨床醫學(xué)、檢驗醫學(xué)等多方面考慮，設計科學(xué)合理的臨床試驗方案。各臨床試驗機構應執行統一的臨床試驗方案，且保證在整個(gè)臨床試驗過(guò)程中遵循預定的方案實(shí)施，不可隨意改動(dòng)。整個(gè)試驗過(guò)程應在臨床試驗機構的實(shí)驗室內并由本實(shí)驗室的技術(shù)人員操作完成，申請人的技術(shù)人員除進(jìn)行必要的技術(shù)指導外，不得隨意干涉試驗進(jìn)程，尤其是數據收集過(guò)程。

試驗方案中應確定嚴格的病例納入/排除標準，任何已經(jīng)入選的病例再被排除出臨床試驗都應記錄在案并明確說(shuō)明原因。在試驗操作過(guò)程中和判定試驗結果時(shí)應采用盲法以保證試驗結果的客觀(guān)性。

2.質(zhì)量控制

臨床試驗開(kāi)始前，建議進(jìn)行臨床試驗的預試驗，以熟悉并掌握相關(guān)試驗方法的操作、儀器、技術(shù)性能等，最大限度控制試驗誤差。整個(gè)試驗過(guò)程都應處于有效的質(zhì)量控制下，最大限度保證試驗數據的準確性及精密度。

3.臨床試驗報告

臨床試驗報告應該對試驗的整體設計及各個(gè)關(guān)鍵點(diǎn)給予清晰、完整的闡述，應該對整個(gè)臨床試驗實(shí)施過(guò)程、結果分析、結論等進(jìn)行條理分明的描述，并應包括必要的基礎數據和統計分析方法，最后得出臨床試驗結論。

三、參考文獻

[1]國家市場(chǎng)監督管理總局.體外診斷試劑注冊與備案管理辦法:國家市場(chǎng)監督管理總局令第48號[Z].

[2]國家藥品監督管理局.關(guān)于公布體外診斷試劑注冊申報資料要求和批準證明文件格式的公告:國家藥品監督管理局公告2021年第122號[Z].

[3]國家藥品監督管理局.體外診斷試劑臨床試驗技術(shù)指導原則:國家藥品監督管理局2021年第72號[Z].

[4]國家藥品監督管理局.體外診斷試劑臨床試驗報告范本:國家藥品監督管理局2022年第21號[Z].

[5]原國家食品藥品監督管理總局.體外診斷試劑說(shuō)明書(shū)編寫(xiě)指導原則:原國家食品藥品監督管理總局公告2014年第17號[Z].

[6]WS-293-2019,艾滋病和艾滋病病毒感染診斷標準 [S].

[7]中華醫學(xué)會(huì )感染病學(xué)分會(huì )艾滋病丙型肝炎學(xué)組 中國疾病預防控制中心.中國艾滋病診療指南（2021版）[J],中國艾滋病性病, 2021,27(11):1182-1201.

[8]中國疾病預防控制中心.全國艾滋病檢測技術(shù)規范（2020年修訂版）[Z].