以醫療器械作用為主的藥械組合產(chǎn)品中藥物定性定量及體外釋放研究注冊審查指導原則（2022年第3號）

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以醫療器械作用為主的藥械組合產(chǎn)品中
藥物定性、定量及體外釋放研究
注冊審查指導原則

　　目前，以醫療器械作用為主的藥械組合產(chǎn)品（本指導原則簡(jiǎn)稱(chēng)為藥械組合醫療器械）中，藥物與醫療器械組合形式主要是將藥物與醫療器械進(jìn)行物理結合（如混合、涂覆等）或化學(xué)鍵合等。常見(jiàn)的藥械組合醫療器械有帶藥物涂層的支架、帶抗菌涂層的導管、含藥避孕套、含藥節育環(huán)等。

　　本指導原則旨在幫助和指導申請人開(kāi)展藥械組合醫療器械產(chǎn)品注冊申報資料中的藥物定性、定量及體外釋放研究，以滿(mǎn)足技術(shù)審評的基本要求，同時(shí)有助于審評機構對該類(lèi)產(chǎn)品進(jìn)行科學(xué)規范的審評，提高審評工作的質(zhì)量和效率。

　　本指導原則雖然為該類(lèi)產(chǎn)品提供了初步指導和建議，但不會(huì )限制醫療器械相關(guān)管理部門(mén)及該類(lèi)產(chǎn)品的技術(shù)審評、行政審批，以及申請人對注冊申報資料的準備。由于該類(lèi)產(chǎn)品品種多樣，申請人可依據具體產(chǎn)品的特性對資料進(jìn)行充實(shí)和細化。

　　本指導原則是在現行法規以及當前認知水平下制訂的，隨著(zhù)法規的不斷完善，以及藥械組合醫療器械產(chǎn)品技術(shù)的發(fā)展和提高，本指導原則相關(guān)內容也將進(jìn)行適時(shí)地調整。

　　一、適用范圍

　　本指導原則涉及的藥械組合產(chǎn)品系指由藥品與醫療器械共同組成，并作為一個(gè)單一實(shí)體生產(chǎn)的醫療產(chǎn)品，其中以醫療器械作用為主的藥械組合產(chǎn)品按照醫療器械有關(guān)要求申報注冊，簡(jiǎn)稱(chēng)藥械組合醫療器械。

　　本指導原則適用于藥械組合醫療器械的藥物定性、定量及體外釋放研究，可為此類(lèi)產(chǎn)品的研發(fā)、注冊申報、技術(shù)審評等環(huán)節提供參考。

　　本指導原則不適用于以藥品作用為主的藥械組合產(chǎn)品。

　　二、研究?jì)热?/h3>

　　保證藥械組合醫療器械的安全、有效、質(zhì)量可控是研發(fā)和評價(jià)應遵循的基本原則。藥械組合醫療器械中，所含藥物起輔助作用，需整體評估組合產(chǎn)品的新增風(fēng)險和風(fēng)險受益比，充分考慮藥物部分和器械部分的相互作用帶來(lái)的影響，考慮藥物部分較其單獨使用時(shí)給藥途徑、劑量、預期作用等可能發(fā)生變化及帶來(lái)的影響，因此建議基于藥物和醫療器械的組合形式及臨床預期用途，對該類(lèi)產(chǎn)品進(jìn)行藥物相關(guān)性能的研究，如藥物的定性、定量及體外釋放等。

　　一般情況下，藥械組合醫療器械產(chǎn)品需進(jìn)行藥物定性、定量研究。對于通過(guò)將藥物釋放到預期部位（如采用緩釋、控釋或其他釋放方式）而發(fā)揮效用的產(chǎn)品，如帶藥物涂層的支架、帶藥球囊擴張導管、含銀敷料等，需進(jìn)行藥物體外釋放研究。對于不通過(guò)將藥物釋放到預期部位而發(fā)揮效用的產(chǎn)品，如通過(guò)共價(jià)鍵結合添加肝素的人工血管等，則無(wú)需進(jìn)行藥物體外釋放研究，但可通過(guò)體外釋放研究評估產(chǎn)品的穩定性、涂層牢固度等。

　　添加有生物活性物質(zhì)的產(chǎn)品，如含生物活性物質(zhì)的骨科器械和含肝素涂層的器械，需根據其作用機理開(kāi)展相關(guān)研究，對主要成分進(jìn)行鑒定，可通過(guò)含量、活性、效價(jià)等形式的研究進(jìn)行定性、定量。

　　申請人可根據產(chǎn)品的組合形式、預期用途、藥物作用方式等參照此原則，選擇合適的研究?jì)热荨?/p>

　　本指導原則是對藥械組合醫療器械藥物定性、定量及體外釋放研究的一般要求，對于具體產(chǎn)品，若有專(zhuān)門(mén)的指導原則或標準，建議參考相應的指導原則或標準的具體要求。申請人應依據組合產(chǎn)品的具體特性和研究目的對注冊申報資料的內容進(jìn)行充實(shí)和細化，并對在研究過(guò)程中評價(jià)技術(shù)的設計、實(shí)施及結果應用的科學(xué)性和合理性進(jìn)行充分的闡述。

　　三、藥物定性、定量、體外釋放及方法學(xué)驗證

　?。ㄒ唬┧幬锒ㄐ?、定量

　　藥物定性的目的在于確定被分析物是目標物，而非其它物質(zhì)。用于鑒別的分析方法應具有較強的專(zhuān)屬性。藥物定量的目的在于準確測定藥械組合醫療器械產(chǎn)品中所載藥物的量。常用的分析方法包括理化方法及生物學(xué)方法等。

　　藥物定性、定量分析方法應優(yōu)先選用標準方法，如國際標準、國家標準等，在使用上述方法之前，可參照中國藥典四部中9099《分析方法確認指導原則》、9100《分析方法轉移指導原則》和9101《分析方法驗證指導原則》等指導原則中規定的方法進(jìn)行方法確認或轉移，以確保方法的適用性。如果無(wú)適用方法，可參照由知名技術(shù)組織或有關(guān)科技文獻或期刊中公布的方法，開(kāi)發(fā)適宜的新方法并進(jìn)行全面的方法學(xué)驗證。在某些情況下，如原材料的合成工藝改變、分析方法中某些參數發(fā)生改變如色譜柱型號、流動(dòng)相、柱流速等，應考慮是否需要對分析方法再次進(jìn)行全面的或部分的驗證，以確保分析方法可行。

　　對于可以直接在器械上或采用產(chǎn)品原液進(jìn)行藥物定性和定量進(jìn)行試驗的產(chǎn)品，可直接進(jìn)行產(chǎn)品的藥物定性、定量研究;需將藥物從醫療器械中浸提（洗脫或分離）出來(lái)或適當稀釋后進(jìn)行試驗的產(chǎn)品，提供浸提液/稀釋液制備及分析方法確定的依據。

　　建議申請人根據藥物性質(zhì)、組合形式、器械材質(zhì)等產(chǎn)品特性，選擇合適的處理方法并論述其適用性。對于需浸提后進(jìn)行分析的產(chǎn)品，浸提液制備及分析方法可參照以下內容開(kāi)展研究。

　　1.浸提液的制備

　　選擇終產(chǎn)品進(jìn)行試驗，浸提樣品宜盡可能選取所有含藥部位，如截取含藥組件的部分進(jìn)行浸提，需論述其合理性?？疾煲蛩赝ǔ０ǎ?/p>

　?。?）浸提溶劑：需考慮藥物的溶解性、穩定性等，尤其是具有生物活性的物質(zhì)在浸提液制備過(guò)程中應避免其活性的改變。

　?。?）浸提比例：宜使溶液中藥物濃度保持在適宜的范圍內。

　?。?）浸提程度：適用的制備方法應確保所含藥物洗脫完全，以達到極限浸提為原則。

　?。?）浸提方式：可采取靜置、振蕩、超聲、回流等方式。必要時(shí)，可根據不同分析儀器及方法的要求，對浸提液處理（如離心、過(guò)濾等）后進(jìn)行測定。

　　除此之外，基于分析手段的多樣性，也可先對藥物進(jìn)行衍生、酸解、酶解等處理后，進(jìn)行測定。

　　2.分析方法

　　根據產(chǎn)品中所含藥物的種類(lèi)及分子結構、理化性質(zhì)、生物活性等，選擇適宜的定性、定量方法。藥物定性一般與定量同時(shí)進(jìn)行，常見(jiàn)的分析方法包括高效液相色譜法（HPLC）、紫外-可見(jiàn)分光光度法（UV-Vis）等。如含有紫杉醇、雷帕霉素、鹽酸利多卡因等藥物的醫療器械，可采用上述兩種方法進(jìn)行分析。

　　采用高效液相色譜法時(shí)，可以通過(guò)保留時(shí)間（tR）和/或光譜相似度定性。用于定量時(shí)，可通過(guò)測定峰面積，使用內標法或外標法等進(jìn)行計算。

　　采用紫外-可見(jiàn)分光光度法時(shí)，可以通過(guò)特定波長(cháng)范圍內光譜圖、最大吸收波長(cháng)（λmax）或兩個(gè)特定波長(cháng)處的吸光度比值而定性。用于定量時(shí)，可在特定波長(cháng)處測定吸光度，使用對照品比較法或吸收系數法等進(jìn)行計算。

　　除此之外，其他的分析方法也可用于藥物的定性、定量分析，如藥物官能團的特異性反應、原子吸收分光光度法（AAS）、電感耦合等離子體發(fā)射光譜（ICP）、氣相色譜法（GC）、質(zhì)譜法（MS）等，如含銀的醫療器械，可采用原子吸收分光光度法、電感耦合等離子體發(fā)射光譜法或電感耦合等離子體發(fā)射光譜-質(zhì)譜法進(jìn)行分析。

　?。ǘ┧幬矬w外釋放

　　藥物體外釋放是在適宜的條件下，對藥械組合醫療器械進(jìn)行的藥物體外釋放速率及釋放量的試驗。其目的是考察藥械組合醫療器械中藥物在體外的釋放情況及其規律，對生產(chǎn)工藝和產(chǎn)品質(zhì)量進(jìn)行控制，同時(shí)也可為動(dòng)物試驗和臨床評價(jià)提供參考。

　　合理的藥物體外釋放行為是藥械組合醫療器械質(zhì)量控制的重要指標，對于保證產(chǎn)品臨床使用的安全性和有效性具有重要意義。體外釋放試驗宜論證與體內釋放試驗的關(guān)聯(lián)性，考慮產(chǎn)品臨床使用情況，也可根據試驗需求，進(jìn)行加速釋放試驗。

　　一般情況下，藥物體外釋放試驗通過(guò)測定藥械組合醫療器械在各時(shí)間點(diǎn)藥物的釋放率，來(lái)表征藥物的體外釋放行為。釋放率可通過(guò)釋放到介質(zhì)中藥物的含量和/或釋放試驗后產(chǎn)品上剩余藥物含量計算而得。

　　在藥物體外釋放試驗中，應至少考慮以下因素：

　　1.試驗樣品

　　選擇終產(chǎn)品進(jìn)行試驗，宜盡可能選取所有含藥部位，如截取含藥組件的部分進(jìn)行浸提應論述其合理性?？蛇m當增加測試樣品數量以降低樣品差異性引起的數據偏差。

　　2.釋放溫度

　　根據產(chǎn)品的預期使用部位，參考各國藥典中相應內容，選擇合適的溫度。如無(wú)特殊要求，通常選擇 37℃ ±1℃模擬人體正常體溫，32℃±1℃模擬表皮溫度。

　　3.釋放介質(zhì)

　　根據藥械組合醫療器械預期使用部位的生理環(huán)境以及藥物理化性質(zhì)等因素確定釋放介質(zhì)，如生理鹽水、磷酸鹽緩沖液，或添加表面活性劑、有機溶劑、防腐劑、含相關(guān)生物酶的釋放介質(zhì)、血清等。

　　4.時(shí)間點(diǎn)設置

　　時(shí)間點(diǎn)的設置需充分考慮產(chǎn)品中藥物在臨床的釋放情況。對于需要在體內快速釋放的藥物（如帶藥球囊擴張導管等）可設置一個(gè)時(shí)間點(diǎn)考察體外釋放情況。對于需要緩釋的器械（如帶藥物涂層的支架等），建議至少涵蓋藥物釋放的初始階段、中間階段和最后階段。初始階段為藥物釋放的活躍期，用于考察是否存在突釋效應;中間階段用于確定釋藥特性;最后階段表現藥物釋放的穩定期（又稱(chēng)平臺期），用于考察藥物釋放是否完全，如冠狀動(dòng)脈藥物洗脫支架一般要求至少釋放80%標稱(chēng)藥物含量時(shí)達到平臺期。如果體外釋放預期為非全部釋放，釋放時(shí)間宜考慮能覆蓋藥物洗脫量達到穩定的時(shí)間點(diǎn)。

　　藥物體外釋放試驗中，藥物的測定方法一般與定量方法一致，也可采用其他經(jīng)驗證的方法。如果藥物為避光藥物，應關(guān)注藥物的避光要求。

　?。ㄈ┓椒▽W(xué)驗證

　　方法學(xué)驗證的目的是證明建立的方法適合于相應檢測的要求，根據研究目的，可能需要的驗證指標有專(zhuān)屬性、準確度、精密度、檢測限、定量限、線(xiàn)性、范圍、耐用性等。對于含有生物活性物質(zhì)的生物學(xué)測定方法驗證需參照相關(guān)指導原則開(kāi)展方法學(xué)驗證。

　　需要說(shuō)明的是，在方法開(kāi)發(fā)和驗證過(guò)程中，需要考慮基質(zhì)效應的影響?；|(zhì)效應指的是在對分析物的濃度或質(zhì)量測定過(guò)程中，來(lái)自樣品中一種或幾種其他化合物的綜合影響。需驗證在采用開(kāi)發(fā)的方法對藥物進(jìn)行測定時(shí)，不會(huì )因其他成分的存在而對擬研究藥物造成干擾。

　　1.專(zhuān)屬性

　　專(zhuān)屬性系指在其他成分（如雜質(zhì)、降解產(chǎn)物、基質(zhì)等）可能存在下，采用的分析方法能正確鑒定、檢測出被測物的能力。宜采用適宜的方法對專(zhuān)屬性進(jìn)行驗證，并排除其他成分的影響，如色譜方法中，應附典型圖譜，標明被測物的位置，且分離度符合相應要求。

　　藥物定性、定量、體外釋放研究的測定方法，均應考察其專(zhuān)屬性。如專(zhuān)屬性不強，應采用一種或多種不同原理的方法予以補充。

　　2.準確度

　　準確度系指用所建立方法測定的結果與真實(shí)值或參比值接近的程度，通常用回收率來(lái)評價(jià)。準確度應在規定的線(xiàn)性范圍內試驗。

　　用于回收率試驗的樣品宜采用不含待測成分的空白樣品，可以采用加標回收率試驗。根據分析目的和樣品的濃度范圍，在以下兩種方法中任選其一：（1）在規定范圍內，取同一濃度（相當于100%濃度水平）的供試品，用至少6份樣品的測定結果進(jìn)行評價(jià);（2）設計3種不同的濃度，覆蓋線(xiàn)性范圍的高、中、低濃度并考慮樣品的濃度范圍，每種濃度分別制備至少3份供試品溶液進(jìn)行測定，計算回收率。

　　不同分析水平的可接受回收率也不同。樣品中待測成分含量和回收率限度關(guān)系可參考表1。在基質(zhì)復雜、組分含量較低及多成分等分析中，回收率限度可適當放寬。

表1 藥械組合醫療器械中藥物含量和回收率限度

　　3.精密度

　　精密度系指在規定的測定條件下，同一份均勻供試液，經(jīng)多次取樣測定所得結果之間的接近程度。精密度一般用偏差、標準偏差或相對標準偏差表示。

　　藥物定量測定應考察方法的精密度。根據分析目的和樣品的濃度范圍，在以下兩種方法中任選其一：

　?。?）在規定范圍內，取同一濃度（相當于100%濃度水平）的供試品，用至少6份樣品的測定結果進(jìn)行評價(jià)。

　?。?）設計3種不同的濃度，覆蓋線(xiàn)性范圍的高、中、低濃度并考慮樣品的濃度范圍，每種濃度分別制備至少3份供試品溶液進(jìn)行測定。精密度的數據結果應報告標準偏差、相對標準偏差或置信區間。樣品中待測成分含量和精密度可接受范圍可參考表2。在基質(zhì)復雜、組分含量低于0.01%及多成分等分析中，精密度限度可適當放寬。

表2 藥械組合醫療器械中藥物含量與精密度可接受范圍關(guān)系

　　4.檢測限

　　檢測限系指樣品中被測物能被檢測出的最低量。檢測限僅作為定性鑒別的依據，沒(méi)有定量意義。常用的方法如下：

　?。?）直觀(guān)法

　　用已知濃度的被測物，試驗出能被可靠地檢測出的最低濃度或量。

　?。?）信噪比法

　　適用于能顯示基線(xiàn)噪音的分析方法，即把已知低濃度試樣測出的信號與空白樣品測出的信號進(jìn)行比較，確定出能被可靠地檢測出的被測物質(zhì)最低濃度或量。一般以信噪比為3:1或2:1時(shí)相應濃度確定為檢測限。

　?。?）基于響應值標準偏差和標準曲線(xiàn)斜率法

　　按照LOD=3.3δ/S公式計算，式中LOD為檢測限、δ為響應值的偏差、S為標準曲線(xiàn)的斜率。δ可以通過(guò)下列方法測得：①測定空白值的標準偏差;②采用標準曲線(xiàn)的剩余標準偏差或是截距的標準偏差。以上計算方法獲得的檢測限數據須用含量相近的樣品進(jìn)行驗證。附測定圖譜，說(shuō)明試驗過(guò)程和檢測限結果。

　　5.定量限

　　定量限系指試樣中被測物能被定量測定的最低量，其測定結果應符合準確度和精密度的要求。藥物含量測定方法，應確定方法的定量限。常用的方法如下：

　?。?）直觀(guān)法

　　用已知濃度的被測物，試驗出能被可靠地定量測定的最低濃度和量。

　?。?）信噪比法

　　適用于能顯示基線(xiàn)噪音的分析方法，即將已知低濃度試樣測出的信號與空白樣品測出的信號進(jìn)行比較，確定出能被可靠地定量的被測物質(zhì)的最低濃度或量，一般以信噪比為10:1時(shí)相應濃度確定為定量限。

　?。?）基于響應值標準偏差和標準曲線(xiàn)斜率法

　　按照LOQ=10δ/S公式計算，式中LOQ為定量限、δ為響應值的偏差、S為標準曲線(xiàn)的斜率。δ可以通過(guò)下列方法測得：①測定空白值的標準偏差;②采用標準曲線(xiàn)的剩余標準偏差或是截距的標準偏差。以上計算方法獲得的定量數據須用含量相近的樣品進(jìn)行驗證。附測定圖譜，說(shuō)明試驗過(guò)程和定量結果，包括準確度和精密度驗證數據。

　　6.線(xiàn)性

　　線(xiàn)性系指在設計的范圍內，線(xiàn)性試驗結果與試驗中被測物濃度直接呈比例關(guān)系的程度，是含量測定的基礎。線(xiàn)性試驗應至少包含5個(gè)不同濃度水平。以測得的響應信號與被測物濃度/含量作圖，觀(guān)察是否呈線(xiàn)性，再用最小二乘法進(jìn)行線(xiàn)性回歸。必要時(shí)，響應信號可經(jīng)數學(xué)轉換后進(jìn)行線(xiàn)性回歸計算，或采用描述濃度/含量-響應關(guān)系的非線(xiàn)性模型。線(xiàn)性數據應至少列出回歸方程、相關(guān)系數、線(xiàn)性圖（或其他數學(xué)模型）。

　　7.范圍

　　范圍系指分析方法能達到精密度、準確度和線(xiàn)性要求時(shí)的高低限濃度或量的區間。范圍根據分析方法的具體應用及其線(xiàn)性、準確度、精密度結果和要求確定。

　　選擇的方法應保證待測藥物濃度在其線(xiàn)性范圍內，必要時(shí)可對浸提液進(jìn)行稀釋或濃縮。

　　8.耐用性

　　耐用性系指在測定條件有小的變動(dòng)時(shí)，測定結果不受影響的承受程度。如果測試條件要求苛刻，則應在方法中寫(xiě)明，并注明可以接受變動(dòng)的范圍。

　　9.系統適用性

　　適用時(shí)，還應進(jìn)行系統適用性考察。如高效液相色譜法的適用性試驗通常包括理論塔板數、分離度、靈敏度、拖尾因子、重復性等。

　　四、報告內容

　　研究報告一般包括試驗論述、試驗方案、試驗報告。其中，試驗論述應說(shuō)明產(chǎn)品基本信息（材料組成、人體接觸途徑及接觸時(shí)間等）及藥物基本信息、試驗樣品選擇依據;浸提條件描述及其選擇依據（如適用）;測定方法來(lái)源、適用性論述或測定方法驗證報告。試驗方案應包括浸提液制備（如適用）及測試方法、數據分析方案。試驗報告應報告詳細的測試方法（包括設備及試劑來(lái)源、樣品制備步驟，必要時(shí)附圖）、測試結果、數據處理、結論及典型性圖譜等。

　　五、參考文獻

　　[1]國家藥監局關(guān)于藥械組合產(chǎn)品注冊有關(guān)事宜的通（國家藥品監督管理局通告2021年第52號）[Z].2021.

　　[2]《冠狀動(dòng)脈藥物洗脫支架臨床前研究指導原則》（國家藥品監督管理局通告2018年第21號）[Z].2018.

　　[3]《宮內節育器注冊技術(shù)審查指導原則》（國家藥品監督管理局通告2019年第25號）[Z].2019.

　　[4]GB/T 39381.1-2020《心血管植入物血管藥械組合產(chǎn)品 第1部分：通用要求》[S].

　　[5]ISO/TR 12417-2:2017，Cardiovascular implants and extracorporeal systems - Vascular device-drug combination products - Part 2: Local regulatory information[S]

　　[6]ASTM F2394 - 07（2017） Standard Guide for Measuring Securement of Balloon Expandable Vascular Stent Mounted on Delivery System [S]

　　[7]《中國藥典》2020版 四部（國家藥典委員會(huì )）

　　[8]《醫療器械已知可瀝濾物測定方法驗證及確認注冊技術(shù)審查指導原則》（國家藥品監督管理局通告2019年第78號）[Z].2019.

　　[9]Guidelines for Single Laboratory Validation of Chemical Methods for Dietary Supplements and Botanicals（AOAC）

　　[10]Validation of Analytical Procedures：Textand Methodology Q2（ICH Harmonised Tripartite Guideline）

　　[11]GB/T 27417-2017《合格評定化學(xué)分析方法確認和驗證指南》[S].

　　六、起草單位

　　國家藥品監督管理局醫療器械技術(shù)審評中心