體外診斷試劑檢出限及線性研究中批次及機(jī)型應(yīng)如何考慮？

體外診斷試劑（IVD）的性能評估是其注冊上市的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，直接關(guān)系到臨床檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。其中，檢出限（LoD）和線性范圍（Linearity）是兩個核心的分析性能指標(biāo)。檢出限關(guān)乎試劑能否“看見”目標(biāo)分析物，線性范圍則決定了在多大濃度范圍內(nèi)檢測結(jié)果能準(zhǔn)確反映實(shí)際濃度。進(jìn)行這兩項(xiàng)研究時，試劑的生產(chǎn)批次和適用的檢測機(jī)型是需要重點(diǎn)規(guī)劃的因素。這涉及到研究設(shè)計(jì)的科學(xué)性、結(jié)果的代表性以及最終能否覆蓋所有聲稱的適用場景。下面我們就詳細(xì)說說批次和機(jī)型在這兩項(xiàng)研究中的具體考慮要點(diǎn)。

一、 明確研究階段與樣本要求

體外診斷試劑的檢出限與線性研究并非一蹴而就，通常分為四個明確的階段：檢出限的建立、檢出限的驗(yàn)證、線性范圍的建立、線性范圍的驗(yàn)證。

1.這四個階段各有目的。建立階段旨在通過系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)，初步確定試劑可能的檢出限值或線性范圍邊界。驗(yàn)證階段則是為了確認(rèn)在建立階段確定的性能指標(biāo)，在預(yù)期的使用條件下（如不同批次試劑、不同操作者、不同天數(shù)）是否穩(wěn)定可靠。

2.樣本的選擇至關(guān)重要。首先，用于建立階段和驗(yàn)證階段的樣本不能重復(fù)使用。也就是說，驗(yàn)證階段需要用獨(dú)立于建立階段的新樣本進(jìn)行測試。

3.其次，研究所用的樣本需要覆蓋試劑聲稱適用的所有型別（例如，對于病原體檢測試劑，需覆蓋其聲稱能檢出的所有基因型或血清型），或者至少覆蓋主要的、臨床常見的型別。 這確保了研究結(jié)果能代表試劑在真實(shí)世界中對不同變異的目標(biāo)分析物的檢測能力。

二、 全面提交適用機(jī)型信息與對比

當(dāng)您的體外診斷試劑設(shè)計(jì)為可在多種儀器設(shè)備（即“適用機(jī)型”）上運(yùn)行時，注冊申報時需要提供這些機(jī)型的詳細(xì)信息。

1.這包括但不限于：機(jī)型的注冊證信息（如已有）、其詳細(xì)的結(jié)構(gòu)組成、關(guān)鍵的性能參數(shù)（如溫控精度、光路系統(tǒng)性能、加樣精度等）、運(yùn)行該試劑所需的特定反應(yīng)程序設(shè)置參數(shù)（如孵育時間、溫度、讀數(shù)波長等），以及最終反應(yīng)體系的詳細(xì)構(gòu)成（樣本量、試劑量、總體積等）。

2.特別需要做的是反應(yīng)體系對比。要清晰地展示不同適用機(jī)型在運(yùn)行該試劑時，其反應(yīng)體系（特別是樣本和試劑的最終加樣量比例）是否一致。

3.在這些適用機(jī)型中，往往會存在一個或多個“代表性機(jī)型”。這個代表性機(jī)型的選擇并非隨意，它必須在工作原理（如化學(xué)發(fā)光、酶聯(lián)免疫、PCR等）、核心檢測方法、反應(yīng)條件控制（溫控、時控等）、信號采集與處理算法等核心方面，與其他適用機(jī)型保持高度一致或基本相同。 代表性機(jī)型的性能研究結(jié)果，應(yīng)能合理推斷到其他與之“基本相同”的機(jī)型上。

三、 批次與機(jī)型組合的研究策略

基于上述對適用機(jī)型和代表性機(jī)型的理解，研究批次和機(jī)型的組合主要有兩種可行的策略：

1.策略一：利用代表性機(jī)型進(jìn)行核心建立研究，其他機(jī)型重點(diǎn)驗(yàn)證。

（1）如果您的產(chǎn)品存在明確的代表性機(jī)型（且經(jīng)論證其核心性能與其他機(jī)型基本相同），那么可以選擇在代表性機(jī)型上，使用3批不同生產(chǎn)批次的試劑產(chǎn)品，完成檢出限的建立和線性范圍的建立研究。

（2）同時，在這3批試劑的代表性機(jī)型上，還需要使用其中1批試劑進(jìn)行檢出限的驗(yàn)證和線性范圍的驗(yàn)證研究（注意驗(yàn)證樣本需獨(dú)立于建立樣本）。

（3）對于其他適用機(jī)型（非代表性機(jī)型），則需要進(jìn)行3批試劑產(chǎn)品的檢出限驗(yàn)證和線性范圍驗(yàn)證研究。這主要是為了確認(rèn)在代表性機(jī)型上建立的關(guān)鍵性能指標(biāo)，在其他“基本相同”的機(jī)型上同樣有效。

2.策略二：所有適用機(jī)型均進(jìn)行完整的建立與驗(yàn)證研究。

（1）如果您選擇不在代表性機(jī)型上進(jìn)行核心建立研究，或者出于更全面驗(yàn)證的目的，可以選擇在所有適用機(jī)型上，都進(jìn)行3批試劑產(chǎn)品的檢出限建立和線性范圍建立研究。

（2）同時，在所有這些機(jī)型上，還需要使用其中1批試劑進(jìn)行檢出限驗(yàn)證和線性范圍驗(yàn)證研究（同樣，驗(yàn)證樣本獨(dú)立于建立樣本）。

（3）這個策略工作量更大，但數(shù)據(jù)更直接地證明了每個機(jī)型上的性能。

四、 確保不同機(jī)型分析性能的一致性

無論采用哪種研究策略，一個核心目標(biāo)是確保試劑在所有適用機(jī)型上展現(xiàn)出的分析性能（特別是檢出限和線性）應(yīng)該是基本一致的。

1.如果在研究過程中發(fā)現(xiàn)，某個適用機(jī)型（即使被列為代表性機(jī)型）在某個特定檢測項(xiàng)目上的某項(xiàng)分析性能（比如某個低濃度點(diǎn)的檢出能力，或高濃度端的線性表現(xiàn)）與其他機(jī)型存在顯著差異，那么僅僅進(jìn)行驗(yàn)證研究可能就不夠了。

2.針對這種性能差異，申請人必須針對該差異，采用存在差異的特定機(jī)型，進(jìn)行充分的分析性能建立及驗(yàn)證研究。這可能意味著需要針對該機(jī)型/該項(xiàng)目，重新進(jìn)行更細(xì)致的檢出限或線性研究，以確定其在該機(jī)型上的真實(shí)性能邊界，并在說明書中清晰說明。不能簡單假設(shè)代表性機(jī)型的結(jié)果可以覆蓋。

總結(jié)

體外診斷試劑檢出限與線性研究是確保產(chǎn)品質(zhì)量和臨床有效性的基石，明確分為檢出限建立、檢出限驗(yàn)證、線性建立、線性驗(yàn)證四個階段。研究過程中必須使用獨(dú)立樣本，且樣本需覆蓋所有聲稱型別或主要型別。申報時，需詳盡提交所有適用機(jī)型的注冊信息、結(jié)構(gòu)組成、儀器性能、反應(yīng)程序參數(shù)及反應(yīng)體系對比數(shù)據(jù)；代表性機(jī)型的選定需基于其與其他機(jī)型在工作原理、檢測方法、反應(yīng)控制及信號處理等核心方面的基本一致性。

在存在代表性機(jī)型的前提下，申請人可靈活選擇研究策略：或在代表性機(jī)型上完成3批建立研究及1批驗(yàn)證研究，同時在其他機(jī)型進(jìn)行3批驗(yàn)證研究；或?qū)λ羞m用機(jī)型均執(zhí)行3批建立研究及1批驗(yàn)證研究。無論如何選擇，核心目標(biāo)是確保所有適用機(jī)型的分析性能基本一致。若發(fā)現(xiàn)不同機(jī)型對特定項(xiàng)目的某項(xiàng)性能存在差異，必須針對該差異，采用相關(guān)機(jī)型進(jìn)行充分的分析性能建立及驗(yàn)證研究。

需要強(qiáng)調(diào)的是，以上要求主要適用于常規(guī)體外診斷試劑。對于創(chuàng)新產(chǎn)品、采用全新方法學(xué)、結(jié)構(gòu)或性能特殊的試劑，或在性能評估中出現(xiàn)的新問題，必須結(jié)合申報資料的具體情況進(jìn)行深入分析，采取針對性的研究方案。