以免疫層析法為檢驗原理的定性體外診斷試劑進行精密度研究時有哪些考量因素？

免疫層析法作為定性體外診斷試劑的主流技術之一（如膠體金法），通過抗原-抗體特異性結合實現快速檢測。精密度研究是評價試劑結果一致性的核心環(huán)節(jié)，直接關系到臨床使用的可靠性。根據國家藥監(jiān)局審評中心的指導，這類試劑的精密度研究需系統性設計實驗，覆蓋可能影響結果的關鍵變量，并采用科學的數據分析方法。下面具體展開研究中的關鍵步驟。

樣本濃度的選擇與設計

精密度研究必須包含不同濃度的樣本，尤其是接近臨界值的濃度水平。例如：

- 陰性樣本（不含目標物）

- 弱陽性樣本（略高于檢出限）

- 中/強陽性樣本（典型病理濃度）

這種設計能驗證試劑在不同濃度下的穩(wěn)定性。實際操作中，建議使用臨床真實樣本或經標定的質控品，避免人工模擬樣本帶來的偏差。若樣本穩(wěn)定性不足，需分裝凍存并驗證凍融影響。

試劑批次與檢測輪次的安排

至少納入3個不同生產批次的試劑，每批次進行多輪重復檢測（通?！?0次）。重點觀察：

- 同一批次內結果的重復性

- 不同批次間結果的一致性

批次差異可能來自原料、包被工藝或生產環(huán)境變化，多輪次測試可暴露潛在波動。

時間與操作者因素的納入

實驗需跨越不同日期（建議≥5天），由多名操作者（≥2人）參與檢測。例如：

- 操作者A在周一、周三檢測

- 操作者B在周二、周四檢測

此舉可評估人員操作差異、環(huán)境溫濕度變化、設備校準狀態(tài)等日常變量對結果的影響。

地點差異的驗證要求

若試劑擬在多機構使用，需在≥2個實驗室進行比對研究。各實驗室應：

- 采用統一實驗方案

- 使用相同型號設備

- 獨立報告數據

通過分析實驗室間差異（如顯色強度偏差），確認試劑的跨場地適用性。

數據記錄與分析方法

除常規(guī)陰陽性結果外，必須記錄與標準色卡的比對標值（如L1、L2、L3等級）：

1. 顯色強度量化：將檢測線顏色與色卡對照，記錄具體等級而非主觀描述；

2. 一致性分析：計算不同條件下L值的變異系數（CV%），超過15%需排查原因；

3. 臨界樣本重點分析：對弱陽性樣本，統計假陰性/假陽性率，確保臨床決策安全。

總結

對于以膠體金法等免疫層析法為檢驗原理的定性體外診斷試劑，在進行精密度研究時，應考慮不同樣本濃度、試劑批次、檢測輪次、時間、操作者、地點等影響因素進行實驗設計。在檢測結果中，不僅需要提交陰陽性結果，還應提交與標準色卡比對的數據（例如L1、L2、L3……），并對顯色強度進行一致性分析。