視黃醇結合蛋白測定試劑盒（免疫比濁法）注冊審查指導原則（2021年第104號）

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視黃醇結合蛋白測定試劑盒（免疫比濁法）注冊審查指導原則

本指導原則旨在指導注冊申請人（下文簡稱“申請人”）對視黃醇結合蛋白測定試劑盒（免疫比濁法）注冊申報資料的準備及撰寫，同時也為技術審評部門審評注冊申報資料提供參考。

本指導原則是對視黃醇結合蛋白測定試劑盒（免疫比濁法）的一般要求，申請人應依據(jù)產(chǎn)品的具體特性確定其中內容是否適用，若不適用，需具體闡述理由及相應的科學依據(jù)，并依據(jù)產(chǎn)品的具體特性對注冊申報資料的內容進行充實和細化。

本指導原則是供申請人和技術審評人員使用的指導文件，不涉及注冊審批等行政事項，亦不作為法規(guī)強制執(zhí)行，如有能夠滿足法規(guī)要求的其他方法，也可以采用，但應提供詳細的研究資料和驗證資料。應在遵循相關法規(guī)的前提下使用本指導原則。

本指導原則是在現(xiàn)行法規(guī)、標準體系及當前認知水平下制定的，隨著法規(guī)、標準體系的不斷完善和科學技術的不斷發(fā)展，本指導原則相關內容也將適時進行調整。

一、適用范圍

依據(jù)《體外診斷試劑注冊管理辦法》和《食品藥品監(jiān)管總局關于印發(fā)體外診斷試劑分類子目錄的通知》，本指導原則適用于按第二類醫(yī)療器械管理的視黃醇結合蛋白測定試劑盒（免疫比濁法），用于檢測人體樣本中視黃醇結合蛋白的含量，臨床上主要用于肝臟或腎小管損傷性疾病的輔助診斷，產(chǎn)品類別為：Ⅱ-1用于蛋白質檢測的試劑，分類編碼為6840。

視黃醇結合蛋白測定試劑盒（免疫比濁法）是指利用免疫比濁法（如免疫透射比濁法、膠乳增強免疫比濁法等）對人血清、血漿或尿液的視黃醇結合蛋白（Retinol-Binding Protein,下文簡稱“RBP”）進行體外定量測定的試劑盒。

二、注冊審查要點

（一）監(jiān)管信息

申請人應描述試劑（盒）的產(chǎn)品名稱、包裝規(guī)格、主要組成成分、預期用途、儲存條件及有效期等信息。

1.產(chǎn)品名稱

試劑（盒）名稱由三部分組成：被測物名稱、用途、方法或原理。例如：視黃醇結合蛋白測定試劑盒（免疫比濁法）。

2.包裝規(guī)格

2.1應與產(chǎn)品技術要求包裝規(guī)格一致。

2.2應能清晰地描述出試劑盒的構成，不得出現(xiàn)試劑盒的組成成分與包裝規(guī)格中描述不一致的情況。

2.3應注明可測試的樣本數(shù)或裝量，如××測試/盒、××mL。

2.4如不同包裝規(guī)格有與之特定對應的機型，則應同時明確適用機型。

3.主要組成成分

說明試劑包含主要組分的名稱、數(shù)量、比例或濃度等信息。如果對于正確的操作或使用者理解其用途很重要，應詳細說明。

4.預期用途

說明試劑盒用于體外定量檢測人體樣本中視黃醇結合蛋白的含量，應明確具體的樣本類型如血清、血漿、尿液等，適用的樣本類型應結合實際的臨床研究情況進行確認。

5.儲存條件及有效期

5.1對試劑盒的效期穩(wěn)定性、開瓶穩(wěn)定性等信息做詳細介紹，包括環(huán)境溫濕度、避光條件等。如注冊單元含校準品或質控品且其形態(tài)為凍干粉，則應對復溶后的儲存條件、穩(wěn)定性做詳細介紹。如試劑需要配制，則應對配制后的試劑的儲存條件、穩(wěn)定性做詳細介紹。

5.2保存溫度不應有模糊表述，如“常溫”、“室溫”，應直接以℃為單位。小于3個月的穩(wěn)定期限應以日或小時為單位，大于或等于3個月的穩(wěn)定期限應以月為單位。

5.3如試劑盒各組分的穩(wěn)定性不一致，則應對各組分的儲存條件和有效期分別進行描述。

（二）綜述資料

1.綜述資料

綜述資料主要包括產(chǎn)品預期用途、產(chǎn)品描述、有關生物安全性的說明、研究結果的總結評價以及同類產(chǎn)品上市情況介紹、主要原材料研究資料（如需提供）、主要生產(chǎn)工藝及反應體系的研究資料（如需提供）等內容，應符合《體外診斷試劑注冊管理辦法》和《關于公布體外診斷試劑注冊申報資料要求和批準證明文件格式的公告》的相關要求。相關描述應至少包含如下內容：

1.1產(chǎn)品預期用途：描述產(chǎn)品的預期用途、與預期用途相關的臨床適應癥背景情況，明確樣本類型，如臨床適應癥的發(fā)生率、易感人群，相關的臨床或實驗室診斷方法等。用于檢測人體樣本中視黃醇結合蛋白的含量，臨床上主要用于肝臟或腎小管損傷性疾病的輔助診斷。

1.2產(chǎn)品描述：包括產(chǎn)品所采用的技術原理，主要原材料的來源及制備方法、質量標準，主要生產(chǎn)工藝過程及關鍵控制點，校準品、質控品的制備方法以及校準品溯源和質控品定值情況（如有）。

1.3有關生物安全性方面的說明：如試劑主要原材料中含有人源性材料須對有關傳染?。℉IV、HBV、HCV等）病原體檢測情況予以說明，并提供相關的證明文件。如含有其他動物源及微生物來源的材料，應當提供相應的說明文件，證明其在產(chǎn)品運輸、使用過程中對使用者和環(huán)境是安全的，并對上述原材料所采用的滅活等試驗方法予以說明。

1.4有關產(chǎn)品主要研究結果的總結和評價。

1.5其他：包括同類產(chǎn)品在國內外批準上市的情況、相關產(chǎn)品所采用的技術方法及臨床應用情況、申請注冊產(chǎn)品與國內外同類產(chǎn)品的異同等。

2.主要原材料研究資料（如需提供）

2.1主要包括主要原材料的選擇、制備、質量標準及實驗驗證研究資料，如抗體、膠乳顆粒等；質控品（如包含）、校準品（如包含）的原料選擇、制備、定值過程及試驗資料；校準品的溯源性文件，包括具體溯源鏈、試驗方法、數(shù)據(jù)及統(tǒng)計分析等詳細資料。

應詳述試劑盒所用抗體的名稱及生物學來源，若為申請人自制，應提交刺激免疫原名稱及來源（天然或重組）等信息，提交抗體制備、篩選、純化以及鑒定等詳細試驗資料。注冊人應明確該抗體質量標準的要求（如外觀、純度、蛋白濃度、效價等）及確定依據(jù)；若抗體為申請人外購，則應詳述抗體的名稱及生物學來源，外購方名稱，提交外購方出具的抗體性能指標及檢驗證書，詳述注冊人對該抗體技術指標的要求。

2.2其他輔助原材料的選擇及驗證資料，如反應緩沖液等，申請人應詳述每一主要原輔料性能指標的要求以及確定該原輔料作為主要原輔料的依據(jù)。若為外購，應詳述每一主要原輔料的外購方名稱并提交外購方出具的每一主要原輔料性能指標及檢驗證書。

2.3企業(yè)內部參考品、校準品、質控品的原料選擇、制備、定值過程、質量標準及實驗驗證研究資料；具體要求可參考國家標準GB/T 21415《體外診斷醫(yī)療器械 生物樣品中量的測量 校準品和控制物質賦值的計量學溯源性》及行業(yè)標準YY/T 1662《生化分析儀用質控物》、YY/T 1549《生化分析儀用校準物》、YY/T 1709《體外診斷試劑用校準物測量不確定度評定》。

3.主要生產(chǎn)工藝及反應體系的研究資料（如需提供）

3.1主要生產(chǎn)工藝介紹，可以用流程圖方式表示，并標明關鍵控制點，簡要說明主要生產(chǎn)工藝的確定依據(jù)，如各組分制備的工藝、試劑的配方及工藝關鍵參數(shù)的確定等。申請人應采用經(jīng)過驗證，能夠保證產(chǎn)品質量的生產(chǎn)工藝。

3.2反應原理介紹；

3.3檢測方法的介紹：含樣本采集、校準方法和質控方法、測試步驟、結果計算等；

3.4反應體系研究：含樣本采集及處理、樣本要求（抗凝劑的選擇（如涉及）、樣本穩(wěn)定性包括樣本儲存條件、儲存時間等）、樣本和試劑的用量、反應條件（波長、溫度、時間等）、校準方法、質控方法等的研究資料；

3.5不同適用機型的反應條件如果有差異應分別詳述。

3.6不同樣本類型的反應條件如有差異應分別詳述。

（三）非臨床資料

1.分析性能評估資料

申請人應當提交在生產(chǎn)質量管理體系下生產(chǎn)的不少于三批次的申報試劑進行的所有性能評價的研究資料，包括具體的研究項目、實驗設計、研究方法、可接受標準、試驗數(shù)據(jù)、統(tǒng)計方法、統(tǒng)計分析、研究結論等詳細資料。性能評估時應將試劑和所選用的校準品、質控品、配套儀器作為一個整體進行評價，評估整個系統(tǒng)的性能是否符合要求。有關分析性能驗證的背景信息也應在申報資料中有所體現(xiàn)，包括實驗時間、地點、適用儀器名稱和型號、試劑名稱、規(guī)格和批號、所選用的校準品和質控品（名稱、規(guī)格、批號等信息）、臨床樣本類型、來源、濃度及其確定方法、處理方法等，體現(xiàn)結果數(shù)據(jù)和數(shù)據(jù)的統(tǒng)計分析過程及結論。對血清和血漿樣本類型，可進行同源比對，對于尿液樣本類型，應單獨進行分析性能評估。

性能評估應至少包括試劑空白吸光度、分析靈敏度、準確度、線性、精密度、分析特異性及其他影響檢測的因素等。

1.1試劑空白吸光度

用制造商指定的空白樣本重復測定，次數(shù)不少于2次，記錄試劑盒參數(shù)規(guī)定讀數(shù)點主波長下的吸光度值（A），結果均值應符合產(chǎn)品技術要求性能指標的要求。

注：空白樣本可以是純化水、生理鹽水、零校準液等。

1.2分析靈敏度

可參照CLSI EP17-A對空白限（LoB）、檢出限（LoD）、定量限（LoQ）進行研究。

空白限的建立可使用檢測零濃度校準品或樣本稀釋液的方法進行。例如重復測定20次，根據(jù)測量結果的平均值（M）和標準差（SD），計算M+2SD及其對應的濃度值。

檢出限的確立可采用系列稀釋參考品的方法進行。建議使用有證參考物質進行梯度稀釋并進行至少60次檢測，95%以上的檢測結果高于空白限作為檢出限。另外，應使用最低檢出限或接近最低檢出限水平的樣本進行檢出限的驗證。

定量限應考慮總誤差（偏倚和精密度）的要求。偏倚可通過檢測已知濃度的低水平樣本進行估計，例如檢測低水平的有證參考物質。如涉及將樣本稀釋至低濃度水平，應確保稀釋液不引起基質效應，且在低濃度區(qū)間呈線性。精密度的估計可根據(jù)檢測試劑及其應用確定其影響因素，一般應至少包括重復性和日間精密度。

LoB，LoD，LoQ的研究需選擇多個樣本（空白樣本、低濃度水平樣本、已知濃度的低水平樣本），在多天內進行研究。

1.3準確度

對測量準確度的評價依次包括：與參考物質的相對偏差、方法學比對等方法，申請人可根據(jù)實際情況選擇以下方法的一項或兩項進行研究。優(yōu)先采用與參考物質的比對研究。

1.3.1相對偏差

測試可用于評價常規(guī)方法的有證參考物質3次，測試結果記為（Xi），按YY/T 1584中的相對偏差計算公式分別計算相對偏差（Bi），如果3次結果都不超過±15%，即判為合格。如果大于等于2次的結果不符合，即判為不合格。如果有1次結果不符合，則應重新連續(xù)測試20次，并分別按照公式（1）計算相對偏差（Bi），如果大于或等于19次測試的結果都不超過±15%，即判為合格。

1.3.2比對試驗

用不少于40個在測定濃度范圍內不同濃度的人源樣品，采用參考測量程序或國內/國際普遍認為質量較好的已上市同類試劑作為比較測量程序，每份樣品按待測試劑盒操作方法及比對方法分別檢測。用線性回歸方法計算兩組結果的相關系數(shù)（r）及各濃度點（包括醫(yī)學決定水平處）的相對偏差或絕對偏差，結果應符合以下要求：

1.3.2.1 RBP試劑盒采用的樣本濃度至少覆蓋（10.0，120.0）mg/L區(qū)間；相關系數(shù)r≥0.975；（10.0，30.0]mg/L的區(qū)間內，絕對偏差應在±3.0mg/L范圍內；（30.0，120.0）mg/L的區(qū)間內，相對偏差應在±10.0%范圍內。

1.3.2.2 URBP試劑盒采用的樣本濃度至少覆蓋（0.2，10.0）mg/L區(qū)間；相關系數(shù)r≥0.975；（0.2，1.0]mg/L的區(qū)間內，絕對偏差應在±0.15mg/L范圍內；（1.0，10.0）mg/L的區(qū)間內，相對偏差應在±15.0%范圍內。

注：若樣本不穩(wěn)定，一份樣本宜在兩個系統(tǒng)同時進行測定。待測系統(tǒng)及參考系統(tǒng)需可比，且滿足各自質量標準或產(chǎn)品技術要求后，方可進行比對試驗。

1.4線性

建立試劑線性范圍所用的樣本基質應盡可能與臨床實際檢測的樣本相似，理想的樣本為分析物濃度接近預期測定上限的混合樣本，且應充分考慮多倍稀釋對樣本基質的影響。建立一種定量測定方法的線性范圍時，需在預期測定范圍內選擇7——11個濃度水平，每個濃度水平重復測定2——4次。例如將預期測定范圍加寬至130%，在此范圍內選擇更多的濃度水平，然后依據(jù)實驗結果逐漸減少數(shù)據(jù)點直至表現(xiàn)出線性關系，可發(fā)現(xiàn)最寬的線性范圍。

用接近線性范圍上限的高濃度樣本和接近線性范圍下限的低濃度樣本，混合成至少5個稀釋濃度（Xi）。用申報試劑分別測試以上樣本，每個稀釋濃度測試3次，分別求出每個稀釋濃度檢測結果的均值（Yi）。以稀釋濃度（Xi）為自變量，以測定結果均值（Yi）為因變量求出線性回歸方程。計算線性回歸的相關系數(shù)（r），結果應符合以下要求：

1.4.1 RBP試劑盒

申請人應該提供RBP試劑盒，線性至少覆蓋（10.0，120.0）mg/L區(qū)間：

線性相關系數(shù)r應不小于0.990；

（10.0，30.0]mg/L的區(qū)間內，絕對偏差應在±3.0mg/L范圍內；（30.0，120.0）mg/L的區(qū)間內，相對偏差應在±10.0%范圍內。

1.4.2 URBP試劑盒

申請人應該提供URBP試劑盒，線性至少覆蓋（0.2，10.0）mg/L區(qū)間：

線性相關系數(shù)r應不小于0.990；

（0.2，1.0]mg/L的區(qū)間內，絕對偏差應在±0.15mg/L范圍內；（1.0，10.0）mg/L的區(qū)間內，相對偏差應在±15.0%范圍內。

1.5精密度

精密度的評價包括重復性、中間精密度和再現(xiàn)性內容，評價時充分考慮影響精密度的條件：如操作者、測量儀器、測量程序、試劑批次（lot）、校準（校準品批次，校準周期）、運行（run）、時間、地點、環(huán)境條件（實驗室溫度、濕度、空氣質量、管理等）等。精密度研究中應至少進行重復性、日間精密度和批間差的研究。精密度研究用樣本一般為臨床實際檢測樣本或其混合物，必要時可進行稀釋、添加或采用基質合理的質控品。樣本濃度一般包括測量區(qū)間高、中、低在內的3～5個水平，應有醫(yī)學決定水平或參考區(qū)間上、下限濃度附近的樣本。精密度研究可能涉及多天、多地點檢測，應確保樣本的穩(wěn)定性和一致性，可將樣本等分保存。

1.5.1重復性

在重復性條件下，用試劑盒測試不同濃度的樣本，重復測試10次，計算10次測試結果的平均值（X）和標準差（S），根據(jù)YY/T 1584中的重復性計算公式得出變異系數(shù)（CV），結果均應符合變異系數(shù)（CV）不大于10%的要求。

1.5.2批間差

用3個不同批號的試劑盒分別測試不同濃度的樣本，每個批號重復測試3次，分別計算每批3次測試的均值Xi（i=1,2,3）根據(jù)YY/T 1584中的批間差計算公式計算相對極差（R），不同濃度樣本測試結果均應符合批間相對極差（R）不大于15%的要求。

1.5.3日間精密度

在室內質控在控情況下，依據(jù)CLSIEP5-A2文件對RBP試劑盒的日間精密度進行評價。要求由同一（組）操作員在同一環(huán)境條件中，使用同一儀器，同一方法和同一批號試劑，對同一測試樣本（通常采用校準品）每天重復測試2次，取均值記為（Xi），記錄20天的測試結果，根據(jù)式（1）、（2）計算日間精密度變異系數(shù)（CV），結果應符合日間精密度變異系數(shù)（CV）不大于10%的要求。

式中：

B——日間變異估計值；

Xi——第i天的測試結果均值；

Xi——i天內測試結果的總均值；

CV——日間變異系數(shù)。

1.6分析特異性

1.6.1交叉反應

對易產(chǎn)生交叉反應的其他抗原、抗體等進行驗證，如前白蛋白、視黃醇等，交叉反應驗證物質的濃度應涵蓋人體生理及病理狀態(tài)下及臨床治療過程中可能出現(xiàn)的最高濃度值，可采用純品物質分別添加到健康人樣本、參考區(qū)間附近樣本中的方式進行驗證。

1.6.2干擾物質

應針對不同樣本類型，分別評價可能存在的干擾情況，干擾物質濃度的分布需覆蓋人體生理及病理狀態(tài)下可能出現(xiàn)的物質濃度，如無法獲得含有高濃度干擾物質的樣本，可采用純品物質分別添加到健康人樣本、醫(yī)學決定水平或參考區(qū)間上、下限附近樣本的方式進行驗證，說明樣本的制備方法及干擾實驗的評價標準，確定可接受的干擾物質濃度。建議采用至少兩個分析物水平的樣本進行評價，可為臨近醫(yī)學決定水平或參考區(qū)間上下限以及病理水平。

申請人應描述清楚抗原是否是天然抗原或重組抗原，若為天然抗原，應對前白蛋白及視黃醇是否干擾檢測進行驗證，不建議采用采用重組抗原進行干擾性研究。

1.6.2.1血清或血漿中的干擾物質

應評價血清或血漿樣本中常見干擾物質對檢測結果的影響，如甘油三酯、膽紅素（游離、結合）、血紅蛋白、類風濕因子、抗核抗體、人抗鼠抗體（Human Antimouse Antibody，HAMA）、其他疾病相關蛋白及患者體內的異常生化代謝物等干擾因子的研究（結果應量化表示，禁用輕度、嚴重的模糊表述）。

1.6.2.2尿液中的干擾物質

尿液樣本中常見干擾物質對檢測結果的影響，如白蛋白、尿素、亞硝酸鹽、pH值的研究（結果應量化表示，禁用輕度、嚴重的模糊表述）。

1.6.3藥物影響（如適用）

常見相關治療藥物對檢測結果的影響。

1.6.4抗凝劑的影響

如果試劑盒適用樣本類型包括血漿樣本，應研究抗凝劑對檢測結果的影響。如乙二胺四乙酸鹽、肝素、枸櫞酸鹽等，結果應量化表示。應采用各種適用抗凝劑抗凝的血漿樣本分別與血清樣本進行對比實驗研究。方法為對比線性范圍內的同一個體的血清和血漿樣本，應包含參考區(qū)間上下限附近樣本進行檢測以驗證申報試劑對于血清和血漿樣本檢測結果的一致性。樣本量選擇應體現(xiàn)一定的統(tǒng)計學意義，說明樣本的制備方法及干擾實驗的評價標準，確定可接受的干擾物質極限濃度。

1.7校準品溯源、質控品定值以及性能驗證（如有）

應提供校準品詳細的賦值溯源資料，包括賦值試驗資料和溯源性文件等；質控品應提供詳細的定值資料。

校準品、質控品的量值溯源資料的要求，可參照GB/T 21415《體外診斷醫(yī)療器械生物樣品中量的測量校準品和控制物質賦值的計量學溯源性》進行詳述。應提供企業(yè)（工作）校準品及試劑盒配套校準品賦值及不確定度計算程序與記錄，提供質控品定值及其靶值范圍確定的資料。

校準品的研究資料應按照YY/T 1549《生化分析儀用校準物》的要求進行性能驗證。

質控品的研究資料應按照YY/T 1662《生化分析儀用質控物》的要求進行性能驗證。

如試劑盒中不包括校準品，應說明所適配校準品的制造商和批號，同時提供相應的溯源信息。

1.8鉤狀（Hook）效應（如有）

說明不會產(chǎn)生Hook效應的濃度上限及相關研究，建議在產(chǎn)品說明書上明示對鉤狀效應的研究結果。

研究過程應注意基質效應影響，必要時應提供基質效應研究有關的資料。

1.9最大可稀釋倍數(shù)（如有）

如需稀釋，應注明對稀釋液的要求、最佳或最大稀釋比例，并提供相關的驗證資料。

1.10其他需注意問題

對于適用多個機型的產(chǎn)品，注冊申請時應提供產(chǎn)品說明書【適用機型】項中所列的所有型號儀器的性能評估資料。

若注冊申請中包含不同的包裝規(guī)格，需對不同包裝規(guī)格之間的差異進行分析或驗證。如不同的包裝規(guī)格產(chǎn)品間存在性能差異，需要提交采用每個包裝規(guī)格產(chǎn)品進行的上述項目評估的試驗資料及總結。如不同包裝規(guī)格之間不存在性能差異，需要提交包裝規(guī)格之間不存在性能差異的詳細說明，具體說明不同包裝規(guī)格之間的差別及可能產(chǎn)生的影響。

2.參考區(qū)間確定資料

應當詳細說明參考區(qū)間確定的方法或依據(jù)，提交建立或驗證參考區(qū)間所采用樣本來源及詳細的試驗資料。應明確參考人群的篩選標準，研究各組（如性別、年齡等）例數(shù)應符合統(tǒng)計學要求。如不同性別或不同年齡段的參考區(qū)間不同，應進行分組研究，保證建立單個參考區(qū)間的樣本數(shù)量符合統(tǒng)計學要求，不同類型的樣本如血清和尿液的參考區(qū)間應分別制定。

若引用針對中國人群參考區(qū)間研究的相關文獻，應明確說明出處，并采用一定數(shù)量的臨床樣本對該參考區(qū)間進行驗證。驗證樣本應考慮不同年齡、性別因素，盡可能考慮樣本來源的多樣性、代表性。參考區(qū)間研究結果應在說明書【參考區(qū)間】項中進行相應說明。

3.穩(wěn)定性研究資料

穩(wěn)定性研究資料主要涉及以下幾部分內容，申報試劑的穩(wěn)定性研究、適用樣本的穩(wěn)定性研究。

試劑穩(wěn)定性：主要包括實時穩(wěn)定性、運輸穩(wěn)定性、復溶穩(wěn)定性（如適用）、開瓶穩(wěn)定性（包括機載穩(wěn)定性）、凍融次數(shù)限制（如適用）等。對于實時穩(wěn)定性研究，應提供至少3批次產(chǎn)品在實際儲存條件下保存至成品有效期后的研究資料，并應當充分考慮產(chǎn)品在儲存、運輸和使用過程中的不利條件，進行相應的穩(wěn)定性研究。研究資料包括研究方法的確定依據(jù)、研究目的、實施方案、評價標準、研究數(shù)據(jù)和研究結論等。

樣本的穩(wěn)定性：室溫保存、冷藏或冷凍條件下的有效期驗證，復溶要求驗證，適用冷凍保存的樣本應對凍融次數(shù)進行研究評價。

如產(chǎn)品包含校準品和質控品，可參考YY/T 1549《生化分析儀用校準物》、YY/T 1662《生化分析儀用質控物》標準要求，提供相應穩(wěn)定性研究資料。

試劑（含校準品和質控品）穩(wěn)定性、樣本穩(wěn)定性的研究結果均應在說明書【儲存條件及有效期】和【樣本要求】兩項中進行詳細說明。

4.產(chǎn)品風險分析資料

申請人應考慮產(chǎn)品壽命周期的各個環(huán)節(jié)，從預期用途、可能的使用錯誤、與安全性有關的特征、已知及可預見的危害等方面的判定以及對患者風險的估計進行風險分析，應符合YY/T 0316《醫(yī)療器械風險管理對醫(yī)療器械的應用》的要求。

風險分析應包含但不僅限于以下方面的內容：預期用途錯誤包括：設計開始時未設定預期分析物、未作適用機型驗證、未針對特定的樣本類型驗證。性能特征失效包括：精密度失效、準確度失效、非特異性、穩(wěn)定性失效、測量范圍失效、定量失效、量值溯源失效、校準失效。不正確的結果包括：配方錯誤、采購的原料未能達到設計要求的性能、原材料儲存條件不正確、使用了過期的原材料、反應體系不正確、試劑與包裝材料不相容?？赡艿氖褂缅e誤包括：生產(chǎn)者未按照生產(chǎn)流程操作，檢驗者未按照原料、半成品、成品檢驗標準操作，裝配過程組份、標簽、說明書等漏裝或誤裝，成品儲存或運輸不當，客戶未參照產(chǎn)品說明書設置參數(shù)或使用。與安全性有關的特征包括：有毒化學試劑的化學污染、樣本的潛在生物污染、不可回收包裝或塑料的環(huán)境污染。

5.產(chǎn)品技術要求

申請人應當在原材料質量和生產(chǎn)工藝穩(wěn)定的前提下，根據(jù)申請人產(chǎn)品研制、前期臨床評價等結果，依據(jù)國家標準、行業(yè)標準及有關文獻，按照《關于發(fā)布醫(yī)療器械產(chǎn)品技術要求編寫指導原則的通告》的有關要求，編寫產(chǎn)品技術要求，內容主要包含產(chǎn)品性能指標和檢驗方法。

產(chǎn)品適用的相關標準：

GB/T 21415體外診斷醫(yī)療器械生物樣品中量的測量校準品和控制物質賦值的計量學溯源性

GB/T 26124臨床化學體外診斷試劑（盒）

YY/T 1584視黃醇結合蛋白測定試劑盒（免疫比濁法）

作為定量檢測試劑，應主要包括以下性能指標：外觀、裝量、空白吸光度、分析靈敏度、準確度、線性范圍、精密度。各項性能指標可參考YY/T 1584《視黃醇結合蛋白測定試劑盒（免疫比濁法）》的要求，如有相應的國家/行業(yè)標準發(fā)布或更新，則產(chǎn)品技術要求不得低于其相關標準要求。

此外，可根據(jù)實際情況增加下列檢驗項目：

校準品和質控品（如有）

校準品參考YY/T 1549《生化分析儀用校準物》、質控品參考YY/T 1662《生化分析儀用質控物》相關技術要求。

（四）臨床評價資料

根據(jù)《免于進行臨床試驗的體外診斷試劑目錄》，“用于檢測人體樣本中視黃醇結合蛋白的含量，臨床上主要用于肝臟或腎小球損傷性疾病的輔助診斷”的視黃醇結合蛋白測定試劑盒（免疫比濁法），可免于進行臨床試驗，申請人應按照《免于臨床試驗的體外診斷試劑臨床評價技術指導原則》提交臨床評價資料。

如無法按要求進行臨床評價，應進行臨床試驗；如預期用途超出豁免目錄中的描述，也應進行臨床試驗。臨床試驗的開展、方案的制定以及報告的撰寫等均應符合相關法規(guī)及《體外診斷試劑臨床試驗技術指導原則》的要求。

臨床試驗應選擇具有特定癥狀/體征人群作為研究對象。注冊申請人在建立病例納入標準時，應考慮到不同人群的差異，盡量覆蓋各類適用人群。在進行結果統(tǒng)計分析時，建議對各類人群分別進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析?？傮w樣本數(shù)不少于200例，異常值樣本比例應不低于試驗總量的30%，樣本中待測物濃度應覆蓋試驗用體外診斷試劑線性范圍，且盡可能均勻分布。

試驗中，盡可能使用新鮮樣本，如需貯存，應明確貯存條件及能否凍融；血漿應明確抗凝劑的要求。

評價用的樣本類型應與注冊申請保持一致。對于不具有可比性的不同樣本類型，如血液樣本和尿液樣本，應分別進行符合統(tǒng)計學意義數(shù)量的評估。對于具有可比性的不同樣本類型，如血清和血漿樣本，可在分析性能評估中對樣本適用性進行研究，或在臨床評價中對每種樣本類型分別進行符合統(tǒng)計學意義數(shù)量的評估。

（五）產(chǎn)品說明書

產(chǎn)品說明書承載了產(chǎn)品預期用途、檢驗原理、檢驗方法、檢測結果解釋以及注意事項等重要信息，是指導實驗室工作人員正確操作、臨床醫(yī)生針對檢驗結果給出合理醫(yī)學解釋的重要依據(jù)。因此，產(chǎn)品說明書是體外診斷試劑注冊申報最重要的文件之一。產(chǎn)品說明書的格式應符合《醫(yī)療器械說明書和標簽管理規(guī)定》、《體外診斷試劑說明書編寫指導原則》的要求。產(chǎn)品說明書的所有內容均應與申請人提交的注冊申報資料中的相關研究結果保持一致，如某些內容引用自參考文獻，則應以規(guī)范格式對此內容進行標注，并單獨列明參考文獻的相關信息。

結合《關于發(fā)布體外診斷試劑說明書編寫指導原則的通告》的要求，下面對視黃醇結合蛋白測定試劑盒（免疫比濁法）說明書的重點內容進行詳細說明，以指導注冊申報人員更合理地完成說明書編制。

1.【產(chǎn)品名稱】

1.1試劑（盒）通用名稱保持與注冊申請表一致。

1.2英文名稱應當正確、完整、直譯，不宜只寫縮寫。（如有）

2.【包裝規(guī)格】

應保持與注冊申請表一致。

3.【預期用途】

應至少包括以下幾部分內容：

3.1第一段內容保持與注冊申請表一致

3.2第二段內容說明臨床意義是反映被檢者肝臟或腎小管損傷性疾病的輔助診斷。

4.【檢驗原理】

應結合產(chǎn)品主要成分簡要說明檢驗的原理、方法，必要時可采取圖示方法表示，檢驗原理的描述應結合產(chǎn)品主要組成成分、被測物和產(chǎn)物的關系進行描述：

如：將視黃醇結合蛋白（RBP）抗體偶聯(lián)在膠乳微球上，當遇到 RBP抗原時，抗原抗體結合，也使偶聯(lián)了 RBP的抗體膠乳顆粒發(fā)生凝集使透射光減少，這種減少的程度與膠乳顆粒凝集的程度成正反應，且與視黃醇結合蛋白含量成正反應，通過校準曲線，可計算出樣品中RBP的含量。

5.【主要組成成分】

主要組成成分的描述應保持與注冊申請表一致。

應說明工作液的主要組成成分。對于多組分試劑盒，應明確說明不同批號試劑盒中各組分是否可以互換。如注冊單元含校準品或質控品也應進行相應說明，校準品應注明其定值及溯源性，質控品應明確靶值范圍。如校準品定值或質控品靶值范圍為批特異，應注明批特異，并附單獨的靶值單或在相應組分瓶標簽明示靶值。如試劑盒不帶校準品或質控品，應推薦適用的已上市校準品、質控品（且應與注冊提交的相關研究資料保持一致）。

對于產(chǎn)品中不包含，但對該試驗必需的組分，說明書中應列出此類試劑的名稱、提供混合或稀釋等方法及其他相關信息。

6.【儲存條件及有效期】

6.1試劑（盒）的儲存條件及有效期應保持與注冊申請表一致。

6.2注明生產(chǎn)日期、使用期限或失效日期（可見標簽）。

7.【適用機型】

注明所適用的儀器類型，應細化到型號。如需要可提供與儀器有關的信息以指導用戶操作。

8.【樣本要求】

重點明確以下內容：樣本類型、處理、保存期限及保存條件、運輸條件等。如有血漿樣本，應注明對抗凝劑的要求。冷藏/冷凍樣本檢測前是否須恢復室溫，可凍融次數(shù)。應對已知的干擾物進行說明，如：存在的干擾因素，明確甘油三酯、膽紅素（游離、結合）、血紅蛋白、藥物等干擾物對測定的影響，同時列出干擾物的具體濃度。

9.【檢驗方法】

詳細說明試驗操作的各個步驟，包括：

9.1試劑配制方法（如有）、注意事項。

9.2詳細描述樣本的檢測前處理方法。

9.3試驗條件：溫度、時間、儀器波長等以及試驗過程中的注意事項。

9.4應說明校準品的使用方法、注意事項、推薦的校準周期，以及何種情況須重新校準。

9.5應說明質控品的使用方法、注意事項、對質控結果的必要解釋以及推薦的質控周期等。

10.【參考區(qū)間】

應注明適用樣本類型的參考區(qū)間，并簡要說明其確定方法。建議注明“由于地理、人種、性別和年齡等差異，建議各實驗室建立自己的參考區(qū)間”。

11.【檢驗結果的解釋】

應根據(jù)其臨床意義對可能出現(xiàn)的結果進行合理的解釋。

說明試劑盒的檢測結果僅供臨床參考，對患者的臨床診治應結合其癥狀/體征、病史、其他實驗室檢查等情況綜合考慮。

說明在何種情況下應對樣本進行重復測試，以及在重復測試時需要采取的樣本處理方式。

12.【檢驗方法的局限性】

（1）干擾物質及HOOK效應對檢測結果的影響。

（2）操作時必須嚴格按照操作規(guī)程，對操作程序作任何修改都可能影響結果。

某些未知成分屏蔽了抗原決定簇使之無法與抗體結合；RBP蛋白隨著樣本儲存條件不滿足而導致逐漸降解無法被抗體識別；不合理的樣本采集、轉運及處理、樣本中被測物質濃度過低等均有可能導致假陰性結果。

（3）強調當檢測結果超出線性范圍時是否適用稀釋檢測的處理方式。如不適用，應說明。如適用，說明最大稀釋倍數(shù)。

13.【產(chǎn)品性能指標】

申請人應按產(chǎn)品技術要求性能指標，說明該產(chǎn)品主要性能指標，應至少包括以下部分，并根據(jù)樣本類型分別制定：

（1）試劑空白吸光度；

（2）空白限

（3）分析靈敏度；

（4）線性范圍（線性相關系數(shù)和線性偏差）；

（5）精密度（重復性、批間差）；

（6）準確度；

（7）校準品性能指標（如有）；

（8）質控品性能指標（如有）；

（9）特異性

（10）鉤狀效應

14.【注意事項】

應包括以下內容：

14.1本試劑盒僅供體外檢測使用，試劑中含有的化學成分應說明接觸人體后產(chǎn)生的不良影響后果及應急處理措施。

14.2采用不同方法學的試劑檢測所得結果不應直接相互比較，以免造成錯誤的醫(yī)學解釋；建議實驗室在發(fā)給臨床醫(yī)生的檢測報告注明所用試劑特征。

14.3有關人源組分（如有）的警告，如：試劑盒內的質控品、校準品或其他人源組分，雖已經(jīng)通過了HBs-Ag、HIV1/2-Ab、HCV-Ab等項目的檢測，但截至目前，沒有任何一項檢測可以確保絕對安全，故仍應將這些組分作為潛在傳染源對待。

14.4對所有樣本和反應廢棄物都應視為傳染源對待。

14.5其他需要說明的注意事項。

15.【標識的解釋】如有圖形或符號，請解釋其代表的意義。

16.【參考文獻】

注明引用參考文獻，其書寫應清楚、易查詢且格式規(guī)范統(tǒng)一。

17.【基本信息】

17.1境內體外診斷試劑

17.1.1注冊申請人與生產(chǎn)企業(yè)為同一企業(yè)的，按以下格式標注基本信息：注冊申請人/生產(chǎn)企業(yè)名稱、住所、聯(lián)系方式、售后服務單位名稱、聯(lián)系方式、生產(chǎn)地址、生產(chǎn)許可證編號。

17.1.2委托生產(chǎn)的按照以下格式標注基本信息：注冊申請人名稱、住所、聯(lián)系方式、售后服務單位名稱、聯(lián)系方式、受托企業(yè)的名稱、住所、生產(chǎn)地址、生產(chǎn)許可證編號。

17.2進口體外診斷試劑

按照以下格式標注基本信息：注冊申請人/生產(chǎn)企業(yè)名稱、住所、生產(chǎn)地址、聯(lián)系方式、售后服務單位名稱、聯(lián)系方式、代理人的名稱、住所、聯(lián)系方式。

18.【醫(yī)療器械注冊證編號/產(chǎn)品技術要求編號】

應當寫明醫(yī)療器械注冊證編號/產(chǎn)品技術要求編號。

19.【說明書核準日期及修改日期】

應注明該產(chǎn)品說明書的核準日期。如曾進行過說明書的變更申請，還應該同時注明說明書的修改日期。

三、參考文獻

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[2]梁學穎,徐琪壽.視黃醇結合蛋白的分子生物學[J].生理科學進展,2000,31（3）：277-279.

[3]蔣最明,顧敏,李仲余.血清視黃醇結合蛋白在腎病早期診斷中的應用[J].檢驗醫(yī)學與臨床,2011,8（19）：2344-2346.

[4]梁棟偉,陳斌鴻.血清視黃醇結合蛋白和前白蛋白在肝病診斷中的應用[J].國際醫(yī)藥衛(wèi)生導報,2007,（15）:127-128+126.

[5]賴子飛.尿視黃醇結合蛋白在腎臟病中的檢測及評價[J].海南醫(yī)藥，2011，22（23）：34-35.

四、編寫單位

湖南省藥品審評與不良反應監(jiān)測中心