過敏原特異性IgE抗體檢測試劑技術(shù)審查指導(dǎo)原則（2015年第93號(hào)）

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過敏原特異性IgE抗體檢測試劑技術(shù)審查指導(dǎo)原則

本指導(dǎo)原則旨在指導(dǎo)注冊申請人對(duì)過敏原特異性IgE抗體（Allergen-specific IgE）檢測試劑注冊申報(bào)資料的準(zhǔn)備及撰寫，同時(shí)也為技術(shù)審評(píng)部門審評(píng)注冊申報(bào)資料提供參考。

本指導(dǎo)原則是對(duì)過敏原特異性IgE抗體（Allergen-specific IgE）檢測試劑的一般要求，申請人應(yīng)依據(jù)產(chǎn)品的具體特性確定其中內(nèi)容是否適用，若不適用，需具體闡述理由及相應(yīng)的科學(xué)依據(jù)，并依據(jù)產(chǎn)品的具體特性對(duì)注冊申報(bào)資料的內(nèi)容進(jìn)行充實(shí)和細(xì)化。如申請人認(rèn)為有必要增加本指導(dǎo)原則不包含的研究內(nèi)容，可自行補(bǔ)充。

本指導(dǎo)原則是供申請人和審查人員的指導(dǎo)文件，不涉及注冊審批等行政事項(xiàng)，亦不作為法規(guī)強(qiáng)制執(zhí)行，如有能夠滿足法規(guī)要求的其他方法，也可以采用，但應(yīng)提供詳細(xì)的研究資料和驗(yàn)證資料。應(yīng)在遵循相關(guān)法規(guī)的前提下使用本指導(dǎo)原則。

本指導(dǎo)原則是在現(xiàn)行法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)體系及當(dāng)前認(rèn)知水平下制定的，隨著法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)的不斷完善和科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，本指導(dǎo)原則相關(guān)內(nèi)容也將適時(shí)進(jìn)行調(diào)整。

一、范圍

I型過敏反應(yīng)性疾病相當(dāng)普遍，人群總發(fā)病率高達(dá)10%～30%，是當(dāng)前世界性的重大衛(wèi)生學(xué)問題，被世界衛(wèi)生組織（WHO）列為二十一世紀(jì)重點(diǎn)防治的三大疾病之一。

過敏性疾病是患者吸入、食入或者注入含有致敏成分的物質(zhì)（稱為過敏原或變應(yīng)原，Allergen）后觸發(fā)機(jī)體的B細(xì)胞產(chǎn)生特異性免疫球蛋白E（Immunoglobulin E, IgE），IgE以其Fc 段與肥大細(xì)胞或嗜堿性粒細(xì)胞的表面相應(yīng)的FcεRI結(jié)合，使機(jī)體處于對(duì)該過敏原的致敏狀態(tài)。當(dāng)相同過敏原再次或多次進(jìn)入致敏機(jī)體時(shí)，可與肥大細(xì)胞或嗜堿性粒細(xì)胞表面的IgE發(fā)生特異性結(jié)合，當(dāng)過敏原與致敏細(xì)胞表面的兩個(gè)或兩個(gè)以上相鄰的IgE結(jié)合時(shí)，發(fā)生FcεRI 交聯(lián)，使肥大細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞活化，導(dǎo)致細(xì)胞脫顆粒并釋放儲(chǔ)存在細(xì)胞漿顆粒里的炎性介質(zhì)——組胺，并通過花生四烯酸途徑合成新介質(zhì)——白三烯、免疫反應(yīng)性前列腺素和IL4、IL5等細(xì)胞因子及趨化因子，從而引發(fā)過敏反應(yīng)（或稱變態(tài)反應(yīng)，Allergy）的疾病及相關(guān)癥狀，如過敏性哮喘、枯草熱、蕁麻疹、過敏性鼻炎、濕疹、結(jié)膜炎及胃腸道I型過敏性疾病及嚴(yán)重過敏反應(yīng)等。

上述過敏性疾病的發(fā)生，IgE抗體起關(guān)鍵作用。I型過敏反應(yīng)性疾病的特征是患者體內(nèi)循環(huán)血液中的過敏原特異性IgE抗體濃度較正常狀況下高，且特異性IgE抗體濃度越高，診斷過敏性疾病的概率越高。

本指導(dǎo)原則適用于過敏原特異性IgE抗體檢測試劑，包括總IgE和特異性IgE，同時(shí)適用于不同的檢測方法（原理）。

本指導(dǎo)原則適用于申請產(chǎn)品注冊和相關(guān)許可事項(xiàng)變更的產(chǎn)品。

二、基本要求

（一）綜述資料

綜述資料主要包括產(chǎn)品預(yù)期用途、產(chǎn)品描述、有關(guān)生物安全性的說明、有關(guān)產(chǎn)品主要研究結(jié)果的總結(jié)和評(píng)價(jià)以及同類產(chǎn)品在國內(nèi)外批準(zhǔn)上市的情況介紹等內(nèi)容，其中同類產(chǎn)品上市情況介紹部分應(yīng)著重從主要原材料、檢出限、陽性判斷值或者參考區(qū)間等方面寫明擬申報(bào)產(chǎn)品與目前市場上已獲批準(zhǔn)的同類產(chǎn)品之間的主要區(qū)別，同時(shí)應(yīng)對(duì)申報(bào)的每一個(gè)過敏原具體項(xiàng)目進(jìn)行詳盡的闡述，分別闡述每個(gè)過敏原的具體特點(diǎn)及相關(guān)信息。

綜述資料的撰寫應(yīng)當(dāng)符合《體外診斷試劑注冊管理辦法》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局令第5號(hào)）（以下簡稱《辦法》）和《關(guān)于公布體外診斷試劑注冊申報(bào)資料要求和批準(zhǔn)證明文件格式的公告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局公告2014年第44號(hào)）（以下簡稱44號(hào)公告）的相關(guān)要求。

（二）主要原材料的研究資料

若主要原材料為申請人自己生產(chǎn)，其生產(chǎn)工藝必須穩(wěn)定；如主要原材料源于外購，應(yīng)提供的資料包括：供貨方提供的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、出廠檢定報(bào)告以及申請人對(duì)到貨后主要原材料的質(zhì)量檢驗(yàn)資料。

除上述內(nèi)容外，建議申請人按照以下要求提交研究資料：

1.企業(yè)內(nèi)部參考品的制備、定值過程。詳細(xì)闡述參考品中過敏原特異性IgE抗體的鑒定方法和濃度確認(rèn)方法，鑒定方法應(yīng)科學(xué)合理并采用國際公認(rèn)的方法、金標(biāo)準(zhǔn)方法或臨床診斷等方法綜合進(jìn)行確認(rèn)。濃度確認(rèn)應(yīng)采用國家或國際標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行溯源。應(yīng)分別對(duì)每一個(gè)過敏原項(xiàng)目進(jìn)行研究。

2.質(zhì)控品的制備、定值過程應(yīng)參照企業(yè)內(nèi)部參考品的制備方法進(jìn)行。

3.過敏原主要原材料的研究資料。

（1）無論是天然提取抗原，還是基因工程重組抗原，均應(yīng)對(duì)原料進(jìn)行詳細(xì)分析研究，至少包括主要過敏原（致敏）蛋白的特異性、分子量、純度、致敏蛋白含量、反應(yīng)性：生物活性，效價(jià)（抑制試驗(yàn)）等內(nèi)容。

（2）對(duì)于以上要求的指標(biāo)應(yīng)給出具體的研究方案、研究方法、實(shí)驗(yàn)過程、試驗(yàn)數(shù)據(jù)、相關(guān)圖譜等內(nèi)容。

（3）如為自制抗原，還需提供詳細(xì)的抗原鑒定、提取、制備、生產(chǎn)等的研究資料。

（4）如為外購原材料，還需提供過敏原等主要原材料的出廠報(bào)告及進(jìn)貨檢驗(yàn)報(bào)告。

（5）對(duì)于其他主要原材料，如二抗、工具酶、包被板等原材料，應(yīng)提供主要原材料的選擇、制備及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)等內(nèi)容的詳細(xì)研究資料及試驗(yàn)數(shù)據(jù)。

（三）主要生產(chǎn)工藝及反應(yīng)體系的研究資料

1.主要生產(chǎn)工藝介紹，可用流程圖方式表示，并簡要說明主要生產(chǎn)工藝的確定依據(jù)。

2.產(chǎn)品基本反應(yīng)原理介紹。

3.主要生產(chǎn)工藝過程的研究資料、每一步生產(chǎn)工藝的確認(rèn)資料及試驗(yàn)數(shù)據(jù)。

4.主要反應(yīng)體系的研究資料、每一步反應(yīng)體系的確認(rèn)資料及試驗(yàn)數(shù)據(jù)。

（四）分析性能評(píng)估資料

申請人應(yīng)提交在產(chǎn)品研制或成品驗(yàn)證階段對(duì)試劑盒所有的分析性能進(jìn)行研究的資料，對(duì)于每項(xiàng)分析性能的研究都應(yīng)包括具體研究目的、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)、研究方法、可接受標(biāo)準(zhǔn)、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)、統(tǒng)計(jì)方法等詳細(xì)資料。有關(guān)分析性能研究的背景信息也應(yīng)在注冊申報(bào)資料中有所體現(xiàn)，包括研究地點(diǎn)（實(shí)驗(yàn)室）、適用儀器、試劑規(guī)格、批號(hào)、臨床樣本來源等。分析性能研究的實(shí)驗(yàn)方法，可以參考國內(nèi)或國際有關(guān)體外診斷產(chǎn)品性能評(píng)估的指導(dǎo)原則。

對(duì)于總IgE抗體的檢測，不建議進(jìn)行定性檢測，應(yīng)采用定量及半定量檢測，所有分析性能也應(yīng)根據(jù)定量或半定量檢測試劑的要求進(jìn)行評(píng)估。對(duì)于過敏原IgE抗體檢測試劑，建議著重對(duì)以下分析性能進(jìn)行研究。

1.提供參考品（國家參考品、企業(yè)參考品）的驗(yàn)證資料。

2.最低檢出限

最低檢出限的確定及驗(yàn)證應(yīng)采用適當(dāng)?shù)膮⒖计愤M(jìn)行，最低檢出限參考品應(yīng)進(jìn)行精確的濃度確認(rèn)。對(duì)于定性檢測產(chǎn)品，可采用每一濃度樣本至少20次的檢測情況對(duì)最低檢出限進(jìn)行研究，選取90%～95%檢出率的濃度水平作為最低檢出限；對(duì)于定量檢測產(chǎn)品，可采用每一濃度樣本至少10次的檢測情況對(duì)最低檢出限進(jìn)行研究，選取CV值≤20%的濃度水平作為最低檢出限。

過敏原特異性IgE抗體的檢測限建議不高于0.35IU/ml，總IgE抗體的檢測限建議不高于3～5 IU/ml，可采用稀釋或系列參考品的方式進(jìn)行研究，但應(yīng)保證不同濃度的樣本同時(shí)包括上述兩個(gè)濃度及其鄰近的濃度，明確寫明最低檢出限鄰近濃度的檢測情況，如過敏原特異性IgE抗體濃度在0.30IU/ml水平的檢測情況、總IgE抗體在陽性判斷值附近濃度的檢測情況。

對(duì)于包被過敏原為混合過敏原（非組合）的產(chǎn)品，應(yīng)對(duì)可檢測項(xiàng)目中的每一個(gè)過敏原項(xiàng)目進(jìn)行最低檢出限的評(píng)價(jià)及驗(yàn)證。

3.線性范圍

對(duì)于定量或半定量檢測的試劑，均應(yīng)當(dāng)進(jìn)行線性范圍的研究。線性范圍確定的研究應(yīng)使用高值臨床樣本（由可溯源至國家參考品/國際參考品的方法定量）進(jìn)行梯度稀釋，稀釋液應(yīng)使用經(jīng)確認(rèn)為相應(yīng)過敏原項(xiàng)目檢測結(jié)果為陰性的混合人血清或血漿，建議應(yīng)包含不少于9個(gè)濃度（應(yīng)包含接近最低檢測限的臨界值濃度，同時(shí)滿足國家或國際分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)的要求），通過評(píng)價(jià)一定范圍內(nèi)的線性關(guān)系及各水平的準(zhǔn)確度確定該產(chǎn)品的線性范圍。

4.準(zhǔn)確度

對(duì)準(zhǔn)確度的評(píng)價(jià)，可采用與國家/國際參考品的偏差、回收試驗(yàn)或者方法學(xué)比對(duì)等方法進(jìn)行，申請人可根據(jù)實(shí)際情況選擇合理方法進(jìn)行研究。詳細(xì)描述評(píng)價(jià)方法中樣本的制備過程、評(píng)價(jià)方案、試驗(yàn)過程、試驗(yàn)數(shù)據(jù)、統(tǒng)計(jì)方法、研究結(jié)論等內(nèi)容。

除上述資料之外，對(duì)于過敏原特異性IgE抗體檢測試劑，建議提供至少50例與臨床診斷結(jié)果比對(duì)的研究資料，對(duì)于極為罕見的過敏原特異性IgE抗體檢測項(xiàng)目，可提供至少30例與臨床診斷結(jié)果比對(duì)的研究資料。

5.精密度

精密度的評(píng)價(jià)方法并無統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)可依，可根據(jù)不同產(chǎn)品特征或申請人的研究習(xí)慣進(jìn)行，前提是必須保證研究的科學(xué)合理性，具體實(shí)驗(yàn)方法可以參考相關(guān)的美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)批準(zhǔn)指南（CLSI-EP）或國內(nèi)有關(guān)體外診斷產(chǎn)品性能評(píng)估的文件進(jìn)行。申請人應(yīng)對(duì)每項(xiàng)精密度指標(biāo)的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)做出合理要求，如標(biāo)準(zhǔn)差或變異系數(shù)的范圍等。針對(duì)本類產(chǎn)品的精密度評(píng)價(jià)主要包括以下要求：

（1）至少應(yīng)在產(chǎn)品檢測陰性、最低檢出限濃度、醫(yī)學(xué)決定水平（Cut-off值）濃度進(jìn)行精密度的評(píng)價(jià)。

①陰性樣本（質(zhì)控品）：應(yīng)盡量采用高值陰性樣本（質(zhì)控品）進(jìn)行（n≥20），如最低檢出限濃度為0.35IU/ml，可選擇0.30IU/ml濃度作為評(píng)價(jià)樣本濃度。

②最低檢出限濃度樣本（質(zhì)控品）：待測物濃度應(yīng)接近產(chǎn)品的最低檢出限（n≥20）。

③醫(yī)學(xué)決定水平（Cut-off值）濃度樣本（質(zhì)控品）：根據(jù)產(chǎn)品設(shè)計(jì)的Cut-off值確定樣本（質(zhì)控品）的濃度（n≥20）。

（2）合理的精密度評(píng)價(jià)周期，例如：為期至少20天的連續(xù)檢測，每天至少由2人完成不少于2次的完整檢測，從而對(duì)批內(nèi)/批間、日內(nèi)/日間以及不同操作者之間的精密度進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)。如有條件，申請人應(yīng)選擇不同的實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行重復(fù)實(shí)驗(yàn)以對(duì)室間精密度進(jìn)行評(píng)價(jià)。

6.特異性

（1）交叉反應(yīng)

在進(jìn)行交叉反應(yīng)的研究過程中，對(duì)于過敏原的選擇建議考慮以下內(nèi)容：生物學(xué)分類的相近性、基因組或結(jié)構(gòu)的保守性和同源性、過敏原蛋白AA序列以及立體結(jié)構(gòu)的類同性、IgE抗體結(jié)合表位在構(gòu)象/拓?fù)鋵W(xué)的兼容性。 

①應(yīng)采用與被檢過敏原蛋白在組成或結(jié)構(gòu)上部分相同或者具有相近性的過敏原特異性IgE抗體陽性樣本進(jìn)行交叉反應(yīng)研究。

②建議采用高濃度的過敏原特異性IgE抗體陽性樣本進(jìn)行交叉反應(yīng)研究，應(yīng)明確抗體濃度。

③申請人應(yīng)對(duì)進(jìn)行交叉反應(yīng)研究的過敏原特異性IgE抗體陽性樣本的確認(rèn)方法進(jìn)行詳細(xì)闡述，并提供詳細(xì)的確認(rèn)資料和數(shù)據(jù)，如：是否經(jīng)過其他方法檢測、經(jīng)過金標(biāo)準(zhǔn)的確認(rèn)或經(jīng)過臨床診斷的確認(rèn)等。

④亦可采用抗原電泳分析致敏蛋白的方法進(jìn)行研究。

至少應(yīng)對(duì)公認(rèn)的可能具有交叉反應(yīng)的過敏原項(xiàng)目進(jìn)行驗(yàn)證，建議對(duì)于每種過敏原至少選取2～3個(gè)可能產(chǎn)生交叉反應(yīng)的過敏原進(jìn)行研究。

（2）干擾物質(zhì)

①對(duì)樣本中常見的內(nèi)源性干擾物質(zhì)進(jìn)行研究，如血紅蛋白、甘油三酯或膽固醇、膽紅素、類風(fēng)濕因子（RF）、抗核抗體（ANA）、抗線粒體抗體（AMA）等，確定可接受的干擾物質(zhì)極限濃度。

建議采用被測物陰性及最低檢出限濃度對(duì)每種干擾物質(zhì)的干擾影響進(jìn)行評(píng)價(jià)。

②對(duì)高濃度的非特異性人IgA、IgG、IgM、IgD抗體陽性樣本進(jìn)行評(píng)價(jià)，建議采用被測物陰性及最低檢出限濃度進(jìn)行研究。

③對(duì)含有高濃度總IgE抗體的特異性IgE抗體陰性或弱陽性樣本進(jìn)行評(píng)價(jià)。

干擾物質(zhì)研究的樣本可采用臨床或模擬添加樣本進(jìn)行驗(yàn)證，樣本量選擇應(yīng)體現(xiàn)一定的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

7.鉤狀（HOOK）效應(yīng)

須采用高濃度過敏原特異性IgE抗體陽性血清進(jìn)行梯度稀釋后由低濃度至高濃度開始檢測，每個(gè)梯度的稀釋液重復(fù)3～5份，對(duì)鉤狀效應(yīng)進(jìn)行合理的驗(yàn)證。應(yīng)給出不會(huì)產(chǎn)生鉤狀效應(yīng)的抗體最高濃度，并在產(chǎn)品說明書上明示對(duì)鉤狀效應(yīng)的研究結(jié)果。

8.溯源性

應(yīng)提交詳細(xì)的溯源性研究資料，該類產(chǎn)品有國際標(biāo)準(zhǔn)品，產(chǎn)品檢測結(jié)果的量值必須溯源至國際標(biāo)準(zhǔn)品。對(duì)于企業(yè)內(nèi)部參考品、標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品均應(yīng)提供詳細(xì)的溯源資料，包括溯源方案、溯源方法、溯源過程、溯源步驟，溯源過程中每一步的不確定度的計(jì)算等內(nèi)容。

（五）陽性判斷值或參考區(qū)間確定資料

對(duì)于過敏原特異性IgE抗體檢測試劑，不同過敏原檢測項(xiàng)目的陽性判斷值可能不一致，因此應(yīng)根據(jù)不同項(xiàng)目分別給出適于中國人群的陽性判斷值，提供詳細(xì)的研究資料。如將陽性判斷值確定為0.35IU/ml或者按照國際或國家分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)的不同級(jí)別對(duì)陽性判斷值進(jìn)行設(shè)定，則應(yīng)當(dāng)說明確定或者設(shè)定的具體依據(jù)，并提供詳細(xì)的驗(yàn)證資料。

對(duì)于總IgE抗體檢測試劑，應(yīng)給出參考區(qū)間，應(yīng)按照不同的年齡段分別進(jìn)行參考區(qū)間的研究，并提供詳細(xì)的研究資料。

（六）穩(wěn)定性研究資料

穩(wěn)定性研究資料主要涉及兩部分內(nèi)容，申報(bào)試劑的穩(wěn)定性和適用樣本的穩(wěn)定性研究。前者主要包括實(shí)時(shí)穩(wěn)定性（有效期）、運(yùn)輸穩(wěn)定性、開瓶穩(wěn)定性等研究，申請人可根據(jù)實(shí)際需要選擇合理的穩(wěn)定性研究方案。穩(wěn)定性研究資料應(yīng)包括研究方法的確定依據(jù)、具體的實(shí)施方案、詳細(xì)的研究數(shù)據(jù)以及結(jié)論。對(duì)于實(shí)時(shí)穩(wěn)定性研究，應(yīng)提供至少三批樣品在實(shí)際儲(chǔ)存條件下保存至成品有效期后的研究資料。

應(yīng)對(duì)樣本穩(wěn)定性進(jìn)行研究，主要包括室溫保存、冷藏和冷凍條件下的有效期驗(yàn)證，可以在合理的溫度范圍內(nèi)選擇溫度點(diǎn)（溫度范圍），每間隔一定的時(shí)間段即對(duì)儲(chǔ)存樣本進(jìn)行全性能的分析驗(yàn)證，從而確認(rèn)不同類型樣本的效期穩(wěn)定性。適于冷凍保存的樣本還應(yīng)對(duì)凍融次數(shù)進(jìn)行評(píng)價(jià)。

試劑穩(wěn)定性和樣本穩(wěn)定性兩部分內(nèi)容的研究結(jié)果均應(yīng)在說明書【儲(chǔ)存條件及有效期】和【樣本要求】兩項(xiàng)中進(jìn)行詳細(xì)說明。

（七）臨床評(píng)價(jià)資料

臨床試驗(yàn)總體要求及資料內(nèi)容應(yīng)符合《體外診斷試劑臨床試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則》、《辦法》和44號(hào)公告的規(guī)定，以下僅根據(jù)過敏原檢測試劑的特點(diǎn)對(duì)其臨床試驗(yàn)中應(yīng)重點(diǎn)關(guān)注的內(nèi)容進(jìn)行闡述。

1.研究方法

對(duì)于該類試劑已有同類產(chǎn)品上市的，按照法規(guī)要求應(yīng)選擇境內(nèi)已批準(zhǔn)上市、臨床普遍認(rèn)為質(zhì)量較好的同類產(chǎn)品作為對(duì)比試劑，采用試驗(yàn)用體外診斷試劑（以下稱考核試劑）與之進(jìn)行對(duì)比試驗(yàn)研究，證明考核試劑與已上市產(chǎn)品等效。

如無已上市同類產(chǎn)品的，應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品設(shè)計(jì)的具體用途進(jìn)行臨床試驗(yàn)。綜合臨床檢測結(jié)果、病例臨床資料、其他檢測檢查結(jié)果（病史、皮膚試驗(yàn)、激發(fā)試驗(yàn)）、患者治療情況等多方面因素進(jìn)行綜合判斷以評(píng)價(jià)產(chǎn)品檢測結(jié)果是否準(zhǔn)確。

2.病例選擇

應(yīng)充分考慮地域性差異，由于過敏原檢測項(xiàng)目很多，包含各種食物、吸入性、注入性等過敏原，而且過敏癥狀的發(fā)生存在季節(jié)性，所以應(yīng)充分考慮各種過敏原的地域性差異、發(fā)病時(shí)間的不同、流行病學(xué)的差異選擇有代表性的單位進(jìn)行臨床試驗(yàn)，應(yīng)盡量選擇不同省分的臨床單位。

3.樣本選擇

對(duì)于組合過敏原檢測項(xiàng)目（套組，非混合），每一個(gè)檢測項(xiàng)目應(yīng)分別進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，且應(yīng)滿足至少1000例的要求，對(duì)于每一個(gè)檢測項(xiàng)目病例選擇中應(yīng)包括一定數(shù)量的交叉反應(yīng)樣本，以評(píng)價(jià)產(chǎn)品檢測的特異性。

對(duì)于每一過敏原檢測（報(bào)告）項(xiàng)目均應(yīng)提供大于30～50例檢測結(jié)果與臨床診斷結(jié)果比對(duì)的臨床資料，應(yīng)隨機(jī)選擇病例，先選擇高度懷疑的臨床病例，再通過樣本檢測進(jìn)行比對(duì)，比對(duì)病例應(yīng)保證一定的陽性率，并提供詳細(xì)的病例情況（包括病史、臨床診斷方法、各種檢測結(jié)果等），建議在變態(tài)反應(yīng)科、呼吸科、消化科等臨床專業(yè)科室進(jìn)行臨床試驗(yàn)。

對(duì)于適用于對(duì)多個(gè)樣本類型進(jìn)行檢測的產(chǎn)品，如不同樣本類型之間具有可比性，應(yīng)至少完成一個(gè)樣本類型不少于1000例的臨床研究，同時(shí)再進(jìn)行不少于 200例同一患者不同樣本類型之間的比較研究。如樣本類型中包括指尖全血或靜脈全血等全血樣本，應(yīng)至少進(jìn)行300例同一患者全血樣本與血清或者血漿樣本的比對(duì)臨床資料。

4.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

對(duì)于定性檢測試劑至少應(yīng)計(jì)算陽性符合率、陰性符合率、總符合率，并以四格表的形式進(jìn)行列表，并對(duì)定性結(jié)果進(jìn)行Kappa檢驗(yàn)以驗(yàn)證檢測結(jié)果的一致性。

對(duì)于定量和半定量檢測試劑除計(jì)算陽性符合率、陰性符合率、總符合率外，還應(yīng)進(jìn)行相關(guān)性分析，給出相關(guān)系數(shù)，進(jìn)行回歸分析給出回歸方程和試驗(yàn)數(shù)據(jù)的散點(diǎn)圖，并對(duì)相關(guān)系數(shù)和回歸方程的斜率進(jìn)行顯著性分析。

對(duì)于半定量檢測產(chǎn)品還應(yīng)對(duì)檢測的分級(jí)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，明確分級(jí)存在差異的樣本數(shù)量和分級(jí)差異情況，同時(shí)提供樣本檢測結(jié)果的頻率分布圖。

5.結(jié)果差異樣本的驗(yàn)證

對(duì)于兩種試劑的檢測結(jié)果有不一致（檢測結(jié)果差異較大）的樣本，應(yīng)采用臨床上公認(rèn)較好的第三種同類試劑進(jìn)行復(fù)核，同時(shí)結(jié)合患者的臨床病情、臨床資料對(duì)差異原因及可能結(jié)果進(jìn)行分析。

對(duì)于半定量檢測產(chǎn)品，在檢測結(jié)果陰陽性判定一致的情況下，如分級(jí)差異等于或大于2個(gè)級(jí)別，應(yīng)采用第三種方法進(jìn)行復(fù)核。

6.交叉反應(yīng)樣本的比較

對(duì)于選擇的交叉反應(yīng)樣本應(yīng)單獨(dú)列出并單獨(dú)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，并對(duì)檢測結(jié)果進(jìn)行詳細(xì)描述，并對(duì)可能產(chǎn)生交叉反應(yīng)的原因進(jìn)行詳盡描述。

7.臨床試驗(yàn)結(jié)果應(yīng)提供原始臨床試驗(yàn)數(shù)據(jù)。

8.對(duì)于在同一膜條上同時(shí)包含總IgE抗體和特異性IgE抗體檢測項(xiàng)目的產(chǎn)品，應(yīng)分別提供每個(gè)檢測項(xiàng)目與定量檢測試劑檢測結(jié)果的比對(duì)研究資料，每個(gè)項(xiàng)目應(yīng)包括不同陽性強(qiáng)度的樣本。

（八）產(chǎn)品風(fēng)險(xiǎn)分析資料

基本要求應(yīng)符合44號(hào)公告的要求，同時(shí)考慮到過敏原特異性IgE抗體檢測可能存在一定的交叉反應(yīng)，而且過敏原特異性IgE抗體的濃度與患者的臨床癥狀并無絕對(duì)相關(guān)性，因此申請人應(yīng)根據(jù)這些不確定的因素分析產(chǎn)品應(yīng)用可能存在的風(fēng)險(xiǎn)。

（九）產(chǎn)品技術(shù)要求

產(chǎn)品技術(shù)要求應(yīng)符合《辦法》和44號(hào)公告的要求。申請人應(yīng)當(dāng)在原材料質(zhì)量和生產(chǎn)工藝穩(wěn)定的前提下，根據(jù)產(chǎn)品研制、分析性能評(píng)估等結(jié)果，依據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)及有關(guān)文獻(xiàn)，按照《醫(yī)療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫指導(dǎo)原則》的有關(guān)要求，編寫產(chǎn)品技術(shù)要求。如果擬申報(bào)產(chǎn)品已有適用的國家/行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)發(fā)布，則產(chǎn)品技術(shù)要求的內(nèi)容應(yīng)不低于適用標(biāo)準(zhǔn)。定性產(chǎn)品應(yīng)進(jìn)行參考品的檢測，定量產(chǎn)品除進(jìn)行參考品的檢測外還應(yīng)進(jìn)行線性的評(píng)價(jià)。每個(gè)項(xiàng)目均須進(jìn)行最低檢出限和陽性參考品符合率的檢測。性能指標(biāo)及檢驗(yàn)方法中應(yīng)明確寫明陽性參考品所包含的檢測項(xiàng)目。

（十）產(chǎn)品注冊檢驗(yàn)報(bào)告

根據(jù)《辦法》及44號(hào)公告的要求，申請注冊的第三類產(chǎn)品應(yīng)在具有相應(yīng)醫(yī)療器械檢驗(yàn)資質(zhì)的醫(yī)療器械檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)進(jìn)行連續(xù)3個(gè)生產(chǎn)批次樣品的注冊檢驗(yàn)。

目前，過敏原IgE抗體檢測試劑尚無適用的國家參考品，可采用企業(yè)參考品進(jìn)行注冊檢驗(yàn)，但企業(yè)參考品的具體信息應(yīng)明確，如IgE抗體濃度、過敏原檢測項(xiàng)目的確定方法等。如有適用的國家參考品/標(biāo)準(zhǔn)品發(fā)布，則申請人應(yīng)采用國家參考品/標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行注冊檢驗(yàn)，并在產(chǎn)品技術(shù)要求中寫明相應(yīng)內(nèi)容。

（十一）產(chǎn)品說明書

產(chǎn)品說明書承載了產(chǎn)品預(yù)期用途、檢驗(yàn)原理、檢驗(yàn)方法、檢驗(yàn)結(jié)果的解釋以及注意事項(xiàng)等重要信息，是指導(dǎo)實(shí)驗(yàn)室工作人員正確操作、臨床醫(yī)生針對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果給出合理醫(yī)學(xué)解釋的重要依據(jù)，因此，產(chǎn)品說明書是體外診斷試劑注冊申報(bào)最重要的文件之一。產(chǎn)品說明書格式應(yīng)符合《體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則》的要求，境外產(chǎn)品的中文說明書除格式要求外，其內(nèi)容應(yīng)盡量保持與原文說明書的一致性，翻譯力求準(zhǔn)確且符合中文表達(dá)習(xí)慣。產(chǎn)品說明書的所有內(nèi)容均應(yīng)與申請人提交的注冊申報(bào)資料中的相關(guān)研究結(jié)果保持一致，如某些內(nèi)容引用自參考文獻(xiàn)，則應(yīng)以規(guī)范格式對(duì)此內(nèi)容進(jìn)行標(biāo)注，并單獨(dú)列明參考文獻(xiàn)的相關(guān)信息。

結(jié)合《體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則》的要求，下面對(duì)過敏原特異性IgE抗體（Allergen-specific IgE）檢測試劑說明書的重點(diǎn)內(nèi)容進(jìn)行詳細(xì)說明，以指導(dǎo)注冊申請人更合理地編寫產(chǎn)品說明書。

1.【產(chǎn)品名稱】可以根據(jù)擬申報(bào)產(chǎn)品的具體特點(diǎn)增加描述性語言，（吸入組1或2）、（食物組1或2）、（綜合組1或2）等，如組合過敏原檢測項(xiàng)目命名為“過敏原特異性IgE抗體檢測試劑盒（吸入組1/化學(xué)發(fā)光法）”，以更好的區(qū)分不同的產(chǎn)品。

2.【預(yù)期用途】應(yīng)至少包括以下幾部分內(nèi)容：

（1）試劑盒用于××檢測人×××樣本中的過敏原特異性IgE抗體和/或總IgE抗體。其中，××應(yīng)按照產(chǎn)品類型寫明具體為定性、半定量還是定量檢測，×××應(yīng)寫明適用的樣本類型為血清、血漿還是全血，上述內(nèi)容均應(yīng)有相應(yīng)的分析性能評(píng)估資料和臨床試驗(yàn)資料支持。對(duì)于總IgE抗體檢測試劑，不建議聲稱定性檢測用途，對(duì)于過敏原特異性IgE抗體檢測試劑，還應(yīng)當(dāng)逐項(xiàng)列明能夠檢測的具體過敏原項(xiàng)目。

（2）應(yīng)當(dāng)說明該試劑不建議用于健康人群體檢，檢測結(jié)果陽性或者陰性僅代表相應(yīng)的IgE抗體檢測結(jié)果陽性或陰性，與患者是否患病的相關(guān)性不確定，不得作為患者病情評(píng)價(jià)的唯一指標(biāo)，必須結(jié)合患者臨床表現(xiàn)和其他實(shí)驗(yàn)室檢測對(duì)病情進(jìn)行綜合分析。

（3）待測人群特征介紹：應(yīng)分不同的年齡段、性別進(jìn)行簡單介紹，并對(duì)檢測結(jié)果及患者臨床癥狀之間的關(guān)系進(jìn)行描述。

（4）對(duì)過敏反應(yīng)的機(jī)理進(jìn)行簡單的介紹。

（5）臨床用途：說明與預(yù)期用途相關(guān)的臨床適應(yīng)癥背景情況，說明相關(guān)的臨床或?qū)嶒?yàn)室診斷方法，應(yīng)對(duì)每個(gè)過敏原分別進(jìn)行編寫。

3.【儲(chǔ)存條件及有效期】

說明試劑盒的效期穩(wěn)定性、開封穩(wěn)定性、運(yùn)輸穩(wěn)定性等，應(yīng)標(biāo)明具體的儲(chǔ)存條件及有效期。

4.【陽性判斷值或者參考區(qū)間】

（1）明確產(chǎn)品的溯源情況，無論定量或是定性產(chǎn)品，其檢測結(jié)果量值均須溯源至國際或國家標(biāo)準(zhǔn)品，應(yīng)以IU/ml作為單位或提供與國際單位的換算單位。

（2）分別列出總IgE抗體（建議進(jìn)行定量檢測）和每個(gè)過敏原特異性IgE抗體的最低檢出限（不大于0.35IU/ml）和參考區(qū)間，如兩者一致可一同列出。

（3）對(duì)于半定量或定量檢測產(chǎn)品，可列出現(xiàn)行的國際或國家的定級(jí)標(biāo)準(zhǔn)與特異性IgE抗體濃度之間的關(guān)系。

（4）應(yīng)明確檢測信號(hào)值與特異性IgE抗體濃度之間的關(guān)系及標(biāo)準(zhǔn)曲線的制定方法（如適用）。

5.【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】

（1）應(yīng)明確檢測結(jié)果是否成立的判定標(biāo)準(zhǔn)，如陰、陽性對(duì)照品的檢測要求（如適用）。

（2）如不同過敏原的檢測結(jié)果存在差異，應(yīng)對(duì)每一個(gè)過敏原特異性IgE抗體及總IgE抗體的檢測結(jié)果分別進(jìn)行闡述，如產(chǎn)品最低檢出限、陽性判斷值或參考區(qū)間與檢測結(jié)果之間的關(guān)系和相關(guān)性，同時(shí)對(duì)檢測結(jié)果與臨床診斷結(jié)果、患者臨床癥狀之間可能存在的關(guān)系進(jìn)行詳細(xì)描述。

6.【檢驗(yàn)方法的局限性】

（1）本試劑盒的檢測結(jié)果僅供臨床參考，對(duì)患者的臨床診治應(yīng)結(jié)合其癥狀/體征、病史、其他實(shí)驗(yàn)室檢查及治療反應(yīng)等情況綜合考慮。

（2）不合理的樣本采集、轉(zhuǎn)運(yùn)、儲(chǔ)存及處理過程均有可能導(dǎo)致錯(cuò)誤的檢測結(jié)果。

（3）明確該試劑僅限于規(guī)定的樣本類型及適用機(jī)型。

（4）不能混用不同批次試劑盒中的組分。

7.【產(chǎn)品性能指標(biāo)】

（1）參考品（國際參考品、國家參考品、企業(yè)參考品）的檢測情況。

（2）最低檢出限：應(yīng)采用國際單位，如不同的檢測項(xiàng)目最低檢出限不同（特異性IgE抗體的檢出限定為不大于0.35IU/ml，總IgE抗體應(yīng)給出具體的檢測范圍，并明確最低檢出限建議不大于3-5 IU/ml），應(yīng)分別列出。

（3）精密度：精密度檢測參考品（樣本）的組分、濃度及評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)、評(píng)價(jià)結(jié)果。

（4）線性范圍：確定線性范圍的方法、濃度范圍、相關(guān)系數(shù)等信息。

（5）準(zhǔn)確性：詳細(xì)描述準(zhǔn)確性的研究方法（與國家/國際參考品的偏差，回收試驗(yàn)，方法學(xué)比對(duì)等）及結(jié)果，詳細(xì)描述研究用樣本的確定方法，提供至少30～50例與臨床診斷比對(duì)的研究資料。

（6）特異性：

①交叉反應(yīng)：以列表的方式詳細(xì)描述可能與每一過敏原產(chǎn)生交叉反應(yīng)的過敏原種類，建議對(duì)于每種過敏原至少提供2～3個(gè)可能產(chǎn)生交叉反應(yīng)的過敏原信息，并詳細(xì)介紹導(dǎo)致產(chǎn)生交叉反應(yīng)的過敏原蛋白情況。

②干擾物質(zhì)：樣本中常見干擾物質(zhì)對(duì)檢測結(jié)果的影響，如血紅蛋白、甘油三酯或膽固醇、膽紅素等，應(yīng)注明可接受的最高限值。

③與人IgA、IgG、IgM、IgD等的交叉反應(yīng)。

（7）鉤狀（HOOK）效應(yīng)：對(duì)高濃度的IgE抗體的鉤狀效應(yīng)驗(yàn)證情況。

三、注冊單元?jiǎng)澐?/h3>

過敏原特異性IgE抗體檢測試劑的注冊單元原則上應(yīng)按照試劑中包被過敏原的類型進(jìn)行劃分。對(duì)于可同時(shí)檢測多個(gè)過敏原特異性IgE抗體的產(chǎn)品，如各過敏原特異性IgE抗體的檢測反應(yīng)體系之間相對(duì)獨(dú)立，不相混合，在不改變試劑中包被過敏原類型的前提下，不同過敏原項(xiàng)目的排列組合產(chǎn)品可作為同一注冊單元，但過敏原項(xiàng)目的組合應(yīng)當(dāng)具有臨床價(jià)值，不建議沒有臨床意義的隨意組合。

對(duì)于同一注冊單元包含多個(gè)規(guī)格的產(chǎn)品，申請人應(yīng)當(dāng)提供檢測項(xiàng)目如包含不同項(xiàng)目組合的產(chǎn)品，申報(bào)注冊時(shí)只需提供檢測項(xiàng)目最多且能包含其他規(guī)格產(chǎn)品檢測項(xiàng)目產(chǎn)品的技術(shù)資料作為注冊申報(bào)資料。