藥物濫用檢測試劑技術(shù)審查指導原則（2014年第2號）

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藥物濫用檢測試劑技術(shù)審查指導原則

藥物濫用(Drug Abuse)指非醫(yī)療用途濫用麻醉藥品和精神藥品的一種行為，目的是為體驗該物質(zhì)產(chǎn)生的特殊精神效應(yīng)，其結(jié)果是對所濫用藥物產(chǎn)生藥物依賴，并導致健康、社會和法律后果。

濫用藥物分為麻醉藥品和精神藥品，麻醉藥品主要包含三大類：鴉片類、大麻類和可卡因類；精神藥品主要包括中樞興奮劑、鎮(zhèn)靜催眠藥和抗焦慮藥、致幻劑。

目前，國內(nèi)常用的藥物濫用檢測試劑為應(yīng)用免疫膠體金技術(shù)（ICT）的定性檢測試劑，主要被測物為甲基苯丙胺（冰毒）、嗎啡、四氫大麻酚酸、可卡因、氯胺酮等，用于藥物濫用的初篩。其他免疫檢測方法如酶免疫分析（EIA）包括酶聯(lián)放大的免疫測試技術(shù)（EMIT）和酶聯(lián)免疫吸附測試技術(shù)（ELISA）、熒光偏振免疫分析（FPIA）等國內(nèi)應(yīng)用較少。

本指導原則針對應(yīng)用免疫層析膠體金法的藥物濫用定性檢測試劑，對該類試劑注冊申報資料的準備及撰寫進行要求，同時也為技術(shù)審評部門對注冊申報資料的技術(shù)審評提供參考。

本指導原則是對該類試劑注冊申報資料的一般要求，申請人應(yīng)依據(jù)產(chǎn)品的具體特性確定其中內(nèi)容是否適用，若不適用，需具體闡述理由及相應(yīng)的科學依據(jù)，并依據(jù)產(chǎn)品的具體特性對注冊申報資料的內(nèi)容進行充實和細化。如申請人認為有必要增加本指導原則不包含的研究內(nèi)容，可自行補充。

本指導原則是對申請人和審查人員的指導性文件，但不包括注冊審批所涉及的行政事項，亦不作為法規(guī)強制執(zhí)行，如果有能夠滿足相關(guān)法規(guī)要求的其他方法，也可以采用，但需要提供詳細的研究資料和驗證資料。相關(guān)人員應(yīng)在遵循相關(guān)法規(guī)的前提下使用本指導原則。

本指導原則是在現(xiàn)行法規(guī)和標準體系以及當前認知水平下制定的，隨著法規(guī)和標準的不斷完善，以及科學技術(shù)的不斷發(fā)展，本指導原則相關(guān)內(nèi)容也將適時進行調(diào)整。

一、范圍

本指導原則主要針對應(yīng)用免疫層析膠體金方法的藥物濫用定性檢測試劑注冊申報資料的準備及撰寫，其他基于層析法的定性檢測試劑或免疫技術(shù)的半定量藥物濫用檢測試劑可參照本指導原則，但應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品的具體特性確定其中內(nèi)容是否適用，如不適用，應(yīng)另行選擇適用自身方法學特性的研究步驟及方法。本指導原則適用于進行首次注冊申報和相關(guān)許可事項變更的產(chǎn)品。

二、注冊申報要求

（一）綜述資料

綜述資料主要包括產(chǎn)品預期用途、產(chǎn)品描述、有關(guān)生物安全性的說明、研究結(jié)果的總結(jié)評價以及同類產(chǎn)品上市情況介紹等內(nèi)容，其中同類產(chǎn)品上市情況介紹部分應(yīng)著重從抗體選擇及檢出限、特異性等方面寫明擬申報產(chǎn)品與目前市場上已獲批準的同類產(chǎn)品之間的異同。應(yīng)符合《體外診斷試劑注冊管理辦法（試行）》（國食藥監(jiān)械〔2007〕229號）（以下簡稱《辦法》）和《體外診斷試劑注冊申報資料基本要求》（國食藥監(jiān)械〔2007〕609號）的相關(guān)要求。

（二）產(chǎn)品說明書

說明書承載了產(chǎn)品預期用途、實驗操作方法、檢驗結(jié)果的解釋以及相關(guān)注意事項等重要信息，是指導使用人員正確操作、針對檢驗結(jié)果給出合理醫(yī)學解釋的重要依據(jù)，也是體外診斷試劑注冊申報的重要文件之一。藥物濫用檢測試劑通常用于藥物濫用的初篩檢測，鑒于其預期用途的特殊性，說明書中對預期用途的準確描述、對樣本要求與采集、檢驗結(jié)果的解釋、檢驗方法的局限性、注意事項等內(nèi)容的解釋尤為重要，有助于使用者正確使用試劑，正確解讀結(jié)果。

產(chǎn)品說明書的所有內(nèi)容均應(yīng)與申請人提交的注冊申報資料中的相關(guān)研究結(jié)果保持一致，如某些內(nèi)容引用自參考文獻，則應(yīng)以規(guī)范格式對此內(nèi)容進行標注，并單獨列明參考文獻的相關(guān)信息。結(jié)合相關(guān)法規(guī)要求及藥物濫用檢測試劑的特性，下面對說明書的重點內(nèi)容作詳細說明。

1.【產(chǎn)品名稱】

產(chǎn)品的通用名稱按照《辦法》中通用名稱的命名原則應(yīng)為：被檢物名稱+檢測試劑盒（膠體金法）。如：嗎啡檢測試劑盒（膠體金法）；如為多項檢測試劑盒，可命名為：被檢物名稱（分別列出）+聯(lián)合檢測試劑盒（膠體金法）。如：嗎啡、氯胺酮聯(lián)合檢測試劑盒(膠體金法);如試劑用于唾液樣本，可命名為：被檢物名稱+唾液檢測試劑盒（膠體金法）。如：嗎啡唾液檢測試劑盒（膠體金法）。被檢物名稱請參照《麻醉藥品、精神藥品品種目錄》（國食藥監(jiān)安〔2007〕633號）中藥品通用名。

2.【包裝規(guī)格】

對產(chǎn)品包裝規(guī)格的描述應(yīng)包括試劑的類型（條形、板型、檢測杯等）以及每包裝的數(shù)量（多少人份）。如：“板型：40人份/盒；條型：50人份/盒。”

3.【預期用途】應(yīng)至少包括以下幾部分內(nèi)容：

3.1對預期用途的具體描述應(yīng)包括以下內(nèi)容：該產(chǎn)品用于定性檢測，說明適用的樣本類型，明確被測物通用名，說明被測物的最低檢出限，并強調(diào)用于“被測物”的初篩檢測。如：該產(chǎn)品用于定性檢測人體尿液中最低檢出濃度為50 ng/mL的四氫大麻酚酸,用于四氫大麻酚酸的初篩檢測。

3.2簡介待測藥物的特征，包括分子式、分子結(jié)構(gòu)、其結(jié)構(gòu)類似物、主要代謝途徑、藥代動力學特征（半衰期）、主要代謝產(chǎn)物及其結(jié)構(gòu)類似物。簡介該藥物的藥理作用，濫用后導致的軀體及精神表現(xiàn)。

3.3被測物檢測的確認方法。

預期用途中應(yīng)描述該試劑僅用于藥物濫用的初篩檢測，需要進一步確認及評價的樣本應(yīng)采用靈敏度及特異性更高的檢測方法進行。如：氣相色譜法-質(zhì)譜法(GC-MS)、高效液相色譜法（HPLC）等。

4.【主要組成成份】

4.1應(yīng)描述試劑條/卡結(jié)構(gòu)組成、檢測線、質(zhì)控線包被及金標記的抗原抗體的生物學來源信息，如抗原結(jié)合物、單克隆抗體或多克隆抗體、抗體的動物源性等信息。

4.2應(yīng)說明實驗需要但本試劑盒未提供的主要材料。

5.【儲存條件及有效期】

儲存條件及有效期包括試劑盒的效期穩(wěn)定性、開封穩(wěn)定性、運輸穩(wěn)定性等有關(guān)試劑保存的重要信息；如有必要,應(yīng)注明試劑表面變化或變質(zhì)時情況的描述及相關(guān)警示。

應(yīng)注意描述膠體金試劑對環(huán)境溫度及濕度的要求，儲存條件等。

6.【樣本要求】

應(yīng)明確樣本類型、采集方法及樣本采集的注意事項；描述樣本應(yīng)使用的收集容器，保持樣本穩(wěn)定性的儲存、運輸條件及儲存時間；描述避免使用的樣本類型；描述樣本處理方法：如尿液混濁是否需要離心、過濾等；說明樣本采集、儲存不當可能造成的影響、樣本中可能含有其他物質(zhì)（應(yīng)明確）造成的影響。

如用于唾液樣本的檢測，應(yīng)詳細規(guī)定唾液樣本的采集方法，包括采樣部位、停留時間等。該方法應(yīng)具有良好的重復性，并能保證采集量的基本恒定。唾液樣本應(yīng)注意提示樣本收集前應(yīng)避免飲水、進食、吸煙、咀嚼口香糖等可能干擾檢測樣本的行為。

7.【檢驗方法】

建議描述并以圖示形式顯示正確的檢驗操作方法、程序及注意事項，可用圖示顯示不正確的操作方法等。特別注意應(yīng)強調(diào)操作溫度及濕度條件、讀取結(jié)果的時間。

8.【參考值（參考范圍）】

應(yīng)說明被測物在待測樣本類型中可檢出的最低檢出濃度。應(yīng)依據(jù)試劑所能夠檢測的目標化合物情況對參考值進行科學描述，如嗎啡檢測試劑除對嗎啡顯示陽性結(jié)果外，還對包括代謝物為嗎啡的原型藥物以及單乙酰嗎啡等主要代謝物呈陽性反應(yīng)。因此，對參考值的描述應(yīng)概括為能夠檢出尿液樣本中高于300ng/mL濃度的嗎啡和/或相當量的嗎啡結(jié)構(gòu)類似物。

9.【檢驗結(jié)果的解釋】

建議明確該檢測試劑在設(shè)計用途范圍內(nèi)能夠檢出的藥物（藥物原型及其代謝產(chǎn)物、同類藥物/結(jié)構(gòu)類似物等）。介紹可能造成藥物檢測陰性的原因，可說明藥物轉(zhuǎn)陰取決于多種因素，包括藥物使用頻率、服藥量、代謝率和身體脂肪含量等。結(jié)合藥物的藥代動力學及藥理作用，介紹待測藥物在體內(nèi)可能存在的時間以及可能持續(xù)作用的時間，描述樣本采集時間點對檢測結(jié)果的影響，有助于結(jié)果的解釋和判斷。

建議描述并以圖示形式顯示所有可能出現(xiàn)的檢測結(jié)果（如陽性、陰性、無效等）及檢測結(jié)果的解釋，包括觀察到特定結(jié)果之后應(yīng)當采取的處理方法。如質(zhì)控線未出現(xiàn)（無效結(jié)果）代表的意義、原因分析、應(yīng)采取的下一步方法、復測與否、復測后結(jié)果仍無效所應(yīng)采取的措施、是否需要使用特異性更高的確認方法等。服用藥物之后，可能需要一段時間藥物才會在樣本中出現(xiàn)，且藥物在樣本中存在的時間有限，如果樣本采集過早或過晚，都可能獲得陰性結(jié)果。建議說明“如檢測結(jié)果是陰性，不一定代表未服用藥物，可能是數(shù)天內(nèi)沒有服用受試藥物，或可能服用了藥物，但未檢出。”應(yīng)建議何種情況下需要進行重新檢測或采用其他方法確認，如懷疑藥物濫用時，應(yīng)當選擇另一時間再次檢測，或針對其他不同種類藥物進行檢測。

10.【檢驗方法的局限性】

10.1強調(diào)該試劑只用于初篩使用，檢測結(jié)果不能作為確認藥物濫用的依據(jù)。對結(jié)果的確認必須使用靈敏度和特異性更高的參考分析方法。

10.2描述該方法可能導致假陽性及假陰性結(jié)果的原因。

造成假陰性結(jié)果的原因包括：樣本中藥物濃度低于檢測試劑最低檢出限，低濃度樣本無法檢出；操作不正確或可能影響檢測的其他因素，如運輸及儲存不當使試劑失效等。

造成假陽性結(jié)果的原因包括：服用某些常用藥物或食用某些食物所致（請舉例）。

10.3其他影響產(chǎn)品性能的因素。

11.【產(chǎn)品性能指標】

產(chǎn)品性能指標的描述應(yīng)與分析性能評估資料一致，申請人除了提供分析性能數(shù)據(jù)的摘要之外，還應(yīng)對性能評價相應(yīng)的試驗方法（試驗設(shè)計、地點、人員、操作方法等）進行簡要敘述。具體內(nèi)容包括：

11.1對相應(yīng)國家參考品的符合情況。

11.2對最低檢出限、最低檢出限濃度附近樣本的驗證情況。

11.3特異性研究結(jié)果：

交叉反應(yīng)：應(yīng)列出所有可能產(chǎn)生交叉反應(yīng)的藥物/化合物及其最低檢出濃度，所有經(jīng)驗證無交叉反應(yīng)性的藥物/化合物及其驗證的最高濃度。

干擾物質(zhì)：介紹體內(nèi)吸收的常用藥物或物質(zhì)，內(nèi)源性物質(zhì)或生理條件變化對檢測的干擾驗證情況。

11.4方法學比對試驗方法及結(jié)果。

12.【注意事項】

12.1有關(guān)試劑準備的注意事項：如保存、運輸條件，檢測環(huán)境要求等。

12.2有關(guān)樣本準備、儲存的注意事項：有關(guān)樣本可能受到污染導致的錯誤結(jié)果，如尿液中含有漂白劑、明礬以及樣本量是否會影響測試結(jié)果等。

12.3保證檢測結(jié)果正確判讀的注意事項：如讀取結(jié)果的時間、光線條件以及在判讀時間內(nèi)顏色深淺對判讀結(jié)果的影響。

12.4生物安全性警告：接觸到的臨床樣本、實驗廢棄物、一次性使用物品等材料應(yīng)當作為潛在傳染物進行處理，并且采用符合法規(guī)的預防措施。

12.5其他可能影響檢測靈敏度和特異性的注意事項。

（三）產(chǎn)品標準

擬定產(chǎn)品標準應(yīng)符合《辦法》和《體外診斷試劑注冊申報資料基本要求》（國食藥監(jiān)械〔2007〕609號）的相關(guān)規(guī)定。應(yīng)至少包括對產(chǎn)品陽性符合率、陰性符合率、重復性（應(yīng)在最低檢出濃度進行）、最低檢出限、特異性等項目的要求。

境內(nèi)生產(chǎn)企業(yè)產(chǎn)品標準附錄中應(yīng)將主要原材料、生產(chǎn)工藝及半成品要求納入。主要原材料要求應(yīng)包括描述檢測線、質(zhì)控線包被及金標記的抗原抗體的生產(chǎn)來源信息；單克隆抗體或多克隆抗體的免疫原及動物來源、抗體克隆號或貨號等信息。如為自制應(yīng)描述制備純化具體方法、質(zhì)量要求；如為外購應(yīng)描述外購方名稱及產(chǎn)品具體型號、質(zhì)量要求。工藝要求應(yīng)主要包括描述金標物制備、檢測線和質(zhì)控線制備等各步驟過程方法、環(huán)境溫濕度要求、質(zhì)控標準、包被濃度要求等。可參照《體外診斷試劑生產(chǎn)及質(zhì)量控制技術(shù)指導原則——金標類診斷試劑生產(chǎn)及質(zhì)量控制技術(shù)指導原則》進行細化補充。

如果擬申報試劑已有相應(yīng)的國家/行業(yè)標準發(fā)布，則企業(yè)標準的要求不得低于上述標準要求。

（四）注冊檢測

對于首次注冊產(chǎn)品，申請人擬定產(chǎn)品標準后，應(yīng)當在國家食品藥品監(jiān)督管理總局認可的、具有相應(yīng)承檢范圍的醫(yī)療器械檢測機構(gòu)進行連續(xù)3個生產(chǎn)批次樣品的注冊檢測。對于已經(jīng)有國家參考品的檢測項目，在注冊檢測時應(yīng)采用相應(yīng)的國家參考品進行,對于目前尚無國家參考品的項目，生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)建立自己的質(zhì)控體系并提供相應(yīng)的內(nèi)部參考品。

（五）主要原材料研究資料

膠體金方法的藥物濫用檢測試劑一般采用競爭法原理，應(yīng)提供主要原材料如檢測線上包被的抗原結(jié)合物、金標單克隆抗體、質(zhì)控線上的第二抗體以及企業(yè)參考品等的選擇與來源、制備過程、質(zhì)量分析和質(zhì)控標準等的相關(guān)研究資料。如主要原材料為企業(yè)自己生產(chǎn)，其生產(chǎn)工藝須穩(wěn)定；如主要原材料源于外購，應(yīng)提供的資料包括：供貨方提供的質(zhì)量標準、出廠檢定報告，以及申請人的質(zhì)量標準及該原材料的檢驗資料。應(yīng)提供申請人選擇該供貨方產(chǎn)品作為主要原材料的依據(jù)，如不同供貨方的選擇比對試驗資料等。

1. 企業(yè)內(nèi)部參考品的制備、定值過程

使用已知純度的標準物質(zhì)精密稱量配制儲備液、逐級稀釋的方式進行企業(yè)內(nèi)部參考品的制備，通過計算確定參考品的定值。制備企業(yè)內(nèi)部參考品的基質(zhì)應(yīng)采用與臨床樣本相似的基質(zhì)并說明基質(zhì)的具體配制過程。應(yīng)當注意所采用的標準物質(zhì)的成分，如為鹽酸鹽、硫酸鹽等，應(yīng)當在配制參考品過程中計算參考品所含堿基的絕對濃度，以相應(yīng)化合物單純堿基的濃度作為參考濃度。

如用于唾液樣本，請明確人工唾液的制備方法。

企業(yè)內(nèi)部陰性參考品設(shè)置除了應(yīng)包括正常陰性樣本外，還應(yīng)包括其他易引起干擾的結(jié)構(gòu)類似物、常見濫用藥物等的含藥樣本。

2. 主要生物原料

主要生物原料包括用于膠體金標記、包被硝酸纖維素膜及用于制備檢測線、質(zhì)控線的抗原或抗體等，如抗原結(jié)合物、金標單克隆抗體、第二抗體（多克隆抗體）等，如質(zhì)控線不使用上述第二抗體，而采用單獨的IgG與相應(yīng)金標多克隆抗體的組合，也應(yīng)納入到主要生物原料的研究資料中。使用前應(yīng)對生物原料進行質(zhì)量檢驗。

3. 生物輔料

生物輔料主要包括牛血清白蛋白等。

4. 其他物料

其他物料包括硝酸纖維素膜、聚酯纖維素膜、濾紙、塑料襯片等。

以上關(guān)于主要生物原料、生物輔料及其他物料研究資料要求可參照《體外診斷試劑生產(chǎn)及質(zhì)量控制技術(shù)指導原則——金標類診斷試劑生產(chǎn)及質(zhì)量控制技術(shù)指導原則》相關(guān)內(nèi)容。

（六）主要生產(chǎn)工藝及反應(yīng)體系的研究資料

參照《體外診斷試劑生產(chǎn)及質(zhì)量控制技術(shù)指導原則——金標類診斷試劑生產(chǎn)及質(zhì)量控制技術(shù)指導原則》中第三條試劑盒的制備相關(guān)內(nèi)容，詳述試劑制備過程中膠體金標記物的制備、檢測線和質(zhì)控線的制備以及試紙條的組裝、切割等過程。應(yīng)詳細描述包被抗原結(jié)合物、金標單克隆抗體工作濃度調(diào)整、確定過程，以及確定工作濃度后對最低檢出限等性能的初步驗證。

（七）分析性能評估資料

申請人應(yīng)提交生產(chǎn)者在產(chǎn)品研制或成品驗證階段對試劑盒進行的所有性能驗證的研究資料，對于每項分析性能的評價都應(yīng)包括具體研究目的、實驗設(shè)計、研究方法、可接受標準、實驗數(shù)據(jù)、統(tǒng)計方法、試驗結(jié)論等詳細資料。有關(guān)分析性能驗證的背景信息也應(yīng)在申報資料中有所體現(xiàn)，包括實驗地點（實驗室）、試劑規(guī)格、批號、臨床樣本來源等。分析性能評價的實驗方法可以參考相關(guān)的美國臨床實驗室標準化協(xié)會批準指南（CLSI-EP）文件或國內(nèi)有關(guān)體外診斷產(chǎn)品性能評估的指導原則進行。對于藥物濫用檢測試劑，建議重點對以下分析性能進行研究：

1. 最低檢出限的確定與驗證

目前，部分藥物濫用的定性檢測試劑可參考美國物質(zhì)濫用和精神健康服務(wù)管理局確定的最低檢出限，如可卡因、阿片、苯環(huán)利定等，對于無相關(guān)推薦最低檢出限的檢測試劑，企業(yè)可根據(jù)相關(guān)藥物具體代謝情況自行確定合理的最低檢出限。

膠體金方法試劑的結(jié)果判讀，尤其是接近最低檢出限濃度樣本的結(jié)果判讀，受操作人員的視力和判讀能力以及試劑的生產(chǎn)批次的影響。因此，建議在研究中由多名操作人員（至少三人）使用多個批次的產(chǎn)品（至少三批）進行試驗。針對研究參加人員將樣本進行隨機化分配，并對樣本編號進行掩蔽，以避免出現(xiàn)結(jié)果判讀上的偏離。

建議至少在最低檢出限減去25%的濃度、最低檢出限和最低檢出限加上25%的濃度上對具有統(tǒng)計學意義數(shù)量的樣本進行分析?？赏ㄟ^向已知不含藥樣本中加入目標藥物的方法進行樣本制備，也可使用通過氣相色譜-質(zhì)譜法（GC-MS）或其他適用的等效分析方法確定濃度的樣本。如有需要則可適當擴大濃度范圍，如加入低于和高于最低檢出限50%、75%或100%的濃度水平繼續(xù)進行相應(yīng)試驗。

2. 特異性研究

2.1交叉反應(yīng)

建議針對同類藥物中的所有藥物/化合物和藥物代謝物，或可能發(fā)生交叉反應(yīng)的結(jié)構(gòu)類似物進行交叉反應(yīng)驗證。

可使用向不含藥樣本中添加藥物化合物的方法制備特異性研究用樣本，濃度水平應(yīng)與人體內(nèi)最高預期水平相當。如果某化合物檢測結(jié)果為陽性，則逐級對該化合物樣本進行稀釋，直至獲得陰性結(jié)果。

能夠獲得標準品的主要代謝產(chǎn)物及結(jié)構(gòu)類似物應(yīng)考察其靈敏度，如某些已知主要代謝產(chǎn)物標準品不可得，可對適量臨床樣本采用氣相色譜-質(zhì)譜（GC-MS）方法通過質(zhì)譜圖推斷其結(jié)構(gòu)，證明其在樣本中的存在。

2.2干擾物質(zhì)

潛在的干擾物質(zhì)主要包括：體內(nèi)吸收及代謝的常用藥物或物質(zhì)，內(nèi)源性物質(zhì)或生理條件變化，評價這些物質(zhì)及生理條件是否會對檢測結(jié)果造成影響。（常用藥物干擾應(yīng)包括常用處方及非處方藥物，如心血管治療藥物、降糖藥物、抗病毒藥物、抗生素和解熱鎮(zhèn)痛藥物等）

應(yīng)使用醫(yī)學相關(guān)水平的干擾物濃度進行驗證。另外，亦建議申請人在每種干擾物質(zhì)的潛在最大濃度(“最差條件”)進行評價。對于常見藥物干擾試驗，建議參照相應(yīng)藥物藥代動力學研究確定的治療藥物濃度及多次給藥后峰濃度水平添加相應(yīng)藥物制備干擾樣本進行干擾驗證。內(nèi)源性物質(zhì)（如尿中內(nèi)源性干擾物）的干擾應(yīng)選擇相應(yīng)高值干擾物進行試驗。

建議在最低檢出限附近水平對每種干擾物質(zhì)的陽性和陰性干擾影響進行評價。分別向兩組樣本中加入相關(guān)濃度的各種藥物/化合物及內(nèi)源性物質(zhì)：一組為已知會得到陽性結(jié)果的最低濃度目標藥物(評估陰性干擾影響)；另一組為已知會得到陰性結(jié)果的最高濃度目標藥物(評估陽性干擾影響)。如果觀察發(fā)現(xiàn)預期結(jié)果出現(xiàn)變化，建議對干擾物進行逐級稀釋，直至不發(fā)生干擾影響。

評價生理條件變化對檢測的影響，可對上述兩組濃度的樣本進行調(diào)整，以反映體內(nèi)可能存在的各種生理條件變化。如可將尿液檢測樣本的pH值范圍修改為3～9，觀察不同pH條件下檢測結(jié)果與預期結(jié)果是否存在變化。鑒于本類試劑結(jié)果判讀依賴顯色肉眼觀察，建議對光致變色物質(zhì)的影響進行評價，包括血紅蛋白、肌紅蛋白及其他人工或天然形成的食用色素、藥物等；唾液檢測應(yīng)分別對可能對產(chǎn)品性能產(chǎn)生影響的內(nèi)源性物質(zhì)（粘蛋白、溶菌酶、分泌型IgA等）、外源性物質(zhì)（唾液分泌刺激劑、抗生素、解熱鎮(zhèn)痛藥、維生素、飲料、牙膏、漱口水等）的影響進行考察。

3. 方法學比對

方法學比對分為與已上市同類試劑的比對和與參考方法的比對。

與已上市同類試劑的比對：

選擇已上市的同類試劑與被考核試劑進行方法學比對，所選同類試劑應(yīng)與被考核試劑具有相同的最低檢出限，且檢測范圍上限應(yīng)不低于被考核試劑，通過比對說明被考核試劑與已上市試劑是否等效。樣本數(shù)量應(yīng)具有統(tǒng)計學意義，包含陰性和陽性樣本，且能夠覆蓋檢測范圍，并包含部分干擾樣本。

與參考方法的比對：

鑒于與已上市同類試劑的比對所能提供的性能信息較為有限，且抗體對待檢藥物/化合物的反應(yīng)性不同，以及考慮到交叉反應(yīng)等因素，建議將被考核試劑與參考方法進行比對。參考方法包括氣相色譜-質(zhì)譜法（GC-MS）、高效液相色譜法（HPLC）等，應(yīng)根據(jù)待測化合物特性選擇適宜的參考方法。

與參考方法的比對應(yīng)使用有統(tǒng)計學意義數(shù)量的樣本，應(yīng)以陽性樣本為主，并包括部分陰性樣本，低濃度樣本應(yīng)涵蓋最低檢出限、最低檢出限上下約50%濃度，對于臨床較難獲得的低值樣本，可采用陰性基質(zhì)對高值樣本進行稀釋的方式獲得，但應(yīng)對稀釋樣本進行說明。

應(yīng)當考慮到已知具有明顯交叉反應(yīng)性的所有藥物或代謝物，如嗎啡檢測試劑，除了對嗎啡樣本進行對比實驗外，還應(yīng)考慮對主要代謝產(chǎn)物為嗎啡的原型藥物（可待因、海洛因、阿片等）、相關(guān)的代謝產(chǎn)物如O6-單乙酰嗎啡以及福爾可定、二氫可待因等具有明顯交叉反應(yīng)的化合物進行參考方法的比對。應(yīng)重點對這些化合物最低檢出限附近濃度進行考察。

應(yīng)對參考方法的方法建立及方法學考察結(jié)果進行詳細描述。如氣相色譜-質(zhì)譜法（GC-MS）應(yīng)詳細介紹樣本的衍生化方法、色譜條件、質(zhì)譜條件、檢測離子并提供典型色譜圖與質(zhì)譜圖，并說明對確定的檢測條件進行方法學考察的具體結(jié)果，如方法專屬性、靈敏度、線性、精密度、回收率等。

由于某些藥物在樣本中存在分解或反應(yīng)過程，因此為保證對比實驗結(jié)果的準確，應(yīng)盡量同步進行參考方法和被考核試劑的檢測，避免兩種檢測方法之間樣本的長時間放置。

如被考核試劑已有同類產(chǎn)品上市，可結(jié)合與同類試劑對比的實驗結(jié)果，選取其中陽性樣本和部分陰性樣本進行參考方法的比對，重點考察最低檢出限及最低檢出限附近樣本的性能。如使用參考方法對所有樣本（包括陰性樣本、最低檢出限及最低檢出限附近樣本、中高值樣本）進行比對試驗，可不進行同類試劑的比對試驗。如被考核試劑無同類產(chǎn)品上市，則應(yīng)擴大與參考方法比對的樣本數(shù)量及檢測范圍，對試劑進行全面評價。

（八）參考值（范圍）確定資料

對于正常未使用相應(yīng)藥物的人群樣本中無可檢出的特定藥物及其代謝產(chǎn)物，因此此類試劑不涉及參考范圍的內(nèi)容。試劑本身的最低檢出限即作為能否檢出目標物質(zhì)的陽性判斷值（CUT-OFF值），另外應(yīng)研究主要代謝產(chǎn)物及結(jié)構(gòu)類似物的最低檢出濃度水平。此部分內(nèi)容在分析性能評估資料中已作詳細說明，此處不再重復。

（九）穩(wěn)定性研究資料

穩(wěn)定性研究資料主要涉及兩部分內(nèi)容，試劑的穩(wěn)定性和樣本的穩(wěn)定性研究。前者主要包括實時穩(wěn)定性（有效期）、運輸穩(wěn)定性以及開封穩(wěn)定性等研究，申請人可根據(jù)實際需要選擇合理的穩(wěn)定性研究方案。穩(wěn)定性研究資料應(yīng)包括研究方法的確定依據(jù)、具體的實施方案、詳細的研究數(shù)據(jù)以及結(jié)論。對于實時穩(wěn)定性研究，應(yīng)提供至少三批樣本在實際儲存條件下保存至成品有效期后的研究資料。

某些藥物在樣本放置過程中有代謝或消減過程，因此應(yīng)進行樣本保存穩(wěn)定性的研究，說明被測藥物在樣本中的穩(wěn)定性。建議申請人提交相關(guān)實驗資料，說明樣本儲存條件及存放時間。

（十）臨床試驗

1. 研究方法

1.1境內(nèi)已有同類試劑批準上市產(chǎn)品的臨床研究

選擇中國境內(nèi)已批準上市、臨床普遍認為質(zhì)量較好的同類試劑作為對比試劑，與擬申報產(chǎn)品（以下稱考核試劑）進行對比試驗研究。對比試劑應(yīng)與考核試劑具有相同最低檢出限?？己嗽噭┡c對比試劑檢測不符的樣本應(yīng)進行復測，復測結(jié)果仍不符的樣本應(yīng)采用參考方法進行確認。通過比對試驗，證明考核試劑與已上市產(chǎn)品等效或優(yōu)于已上市產(chǎn)品。

同時選擇檢測范圍內(nèi)一定數(shù)量（30例）樣本與參考方法（如氣相色譜-質(zhì)譜法）進行比對試驗，特別是最低檢出限附近樣本。

1.2境內(nèi)無同類試劑批準上市產(chǎn)品的臨床研究

使用考核試劑與相應(yīng)參考方法（如氣相色譜-質(zhì)譜法、高效液相色譜法等）進行臨床比對，考察考核試劑臨床檢測結(jié)果的靈敏度和特異性。

2. 試驗方案

臨床試驗實施前，研究人員應(yīng)設(shè)計科學合理的臨床研究方案。各臨床研究機構(gòu)的方案設(shè)置應(yīng)基本一致，且保證在整個臨床試驗過程中遵循預定的方案實施，不可隨意改動。確定嚴格的病例納入/排除標準，任何已經(jīng)入選的病例再被排除出臨床研究都應(yīng)記錄在案并明確說明原因。整個試驗過程應(yīng)在臨床研究機構(gòu)的實驗室內(nèi)并由本實驗室的技術(shù)人員操作完成，申報單位的技術(shù)人員除進行必要的技術(shù)指導外，不得隨意干涉實驗進程，尤其是數(shù)據(jù)收集過程。

臨床研究人員應(yīng)注意某些藥物在臨床樣本中的含量會隨時間的推移而逐漸減少，在設(shè)計方案及試驗操作步驟上，應(yīng)盡可能地縮短在考核試劑與對比試劑/參考方法間的樣本放置時間，避免由此帶來的試驗結(jié)果偏差。

3. 臨床研究單位的選擇

臨床研究應(yīng)選擇三家以上（含三家）省級醫(yī)療衛(wèi)生單位進行。由于該產(chǎn)品具有特殊使用目的，可以在相應(yīng)的市級以上?？漆t(yī)院、戒毒中心、其他相關(guān)診療機構(gòu)開展臨床研究，相應(yīng)的參考方法檢測實驗室應(yīng)具備中國合格評定國家認可委員會即CNAS資質(zhì)。其中部分樣本與參考方法的比對可在其中一家臨床試驗單位進行，三家臨床單位中至少應(yīng)包含一家臨床機構(gòu)。實驗操作人員應(yīng)有足夠的時間熟悉檢測的各環(huán)節(jié)，熟悉評價方案。在整個實驗中，考核試劑和對比試劑都應(yīng)處于有效的質(zhì)量控制下，最大限度保證試驗結(jié)果的準確性及可重復性。

4. 樣本例數(shù)

該類試劑與麻醉藥品、精神藥品檢測相關(guān)，依據(jù)《體外診斷試劑臨床研究技術(shù)指導原則》（國食藥監(jiān)械〔2007〕240號）的要求，臨床樣本總例數(shù)應(yīng)不少于500例。建議其中陽性例數(shù)不少于總樣本的50%，個別在我國罕見的濫用藥物的相應(yīng)檢測試劑其臨床陽性樣本例數(shù)建議不少于總樣本的30%。聯(lián)檢試劑應(yīng)滿足每一個檢測項目總例數(shù)均不少于500例的要求。

5. 臨床病例選擇

進行臨床研究時，除有針對性選擇目標人群外，還應(yīng)選擇其他藥物濫用的交叉反應(yīng)病例、服用常見藥物的潛在干擾病例。所有臨床樣本來源應(yīng)可追溯。

6. 結(jié)果不符樣本的驗證

對于兩種試劑的檢測結(jié)果不符的樣本，應(yīng)進行必要的重復檢測并采用參考方法進行復核。

7. 統(tǒng)計方法

該類產(chǎn)品一般為定性檢測試劑，通常應(yīng)使用四格表進行統(tǒng)計，報告敏感性（使用參考方法時）、特異性（使用參考方法時）或陽性符合率、陰性符合率、總符合率等，結(jié)果應(yīng)報告95%置信區(qū)間并進行統(tǒng)計檢驗（kappa檢驗，卡方檢驗等）。對于聯(lián)檢試劑盒，各檢測項目的檢測結(jié)果應(yīng)分別統(tǒng)計和報告。

8. 臨床試驗報告

根據(jù)《體外診斷試劑臨床研究技術(shù)指導原則》（國食藥監(jiān)械〔2007〕240號）的要求，臨床試驗報告應(yīng)對試驗的整體設(shè)計及各個關(guān)鍵點給予清晰、完整的闡述，應(yīng)該對整個臨床試驗實施過程、結(jié)果分析、結(jié)論等進行條理分明的描述，并應(yīng)包括必要的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)和統(tǒng)計分析方法。建議在臨床試驗報告中對以下內(nèi)容進行詳述。

8.1臨床試驗總體設(shè)計及方案描述

8.1.1臨床試驗的整體管理情況、臨床研究單位選擇、臨床主要研究人員簡介等基本情況介紹。

8.1.2病例納入/排除標準、不同類型病例的預期選擇例數(shù)。

8.1.3樣本類型，樣本的收集、處理及保存等。

8.1.4統(tǒng)計方法、統(tǒng)計軟件、評價統(tǒng)計結(jié)果的標準。

8.2具體的臨床試驗情況

8.2.1說明考核試劑和對比試劑的名稱、批號、有效期等信息；考核試劑該批次自檢或經(jīng)其他機構(gòu)檢測合格情況；對比試劑的境內(nèi)外批準情況等信息。

8.2.2臨床總結(jié)報告應(yīng)對各研究單位的病例數(shù)、病例類型分布情況進行總合，建議以列表或圖示方式給出具體例數(shù)及百分比。

8.2.3描述質(zhì)量控制方法及質(zhì)控情況，試驗人員的培訓情況。

8.2.4描述具體試驗過程，樣本檢測、數(shù)據(jù)收集、結(jié)果不一致樣本的重復檢測、確認試驗等。

8.2.5詳細描述參考方法的建立，說明檢測條件及方法學考察結(jié)果。（儀器及色譜、質(zhì)譜條件、樣本衍生化方法、方法專屬性、靈敏度、線性、精密度、回收率等方法學考察結(jié)果、典型色譜圖及質(zhì)譜圖）

8.3統(tǒng)計學分析

8.3.1說明數(shù)據(jù)預處理、對無效結(jié)果的處理和排除情況、研究過程中是否涉及對方案的修改、差異數(shù)據(jù)的重復檢測與否以及是否納入最終數(shù)據(jù)統(tǒng)計。

8.3.2數(shù)據(jù)統(tǒng)計：

對考核試劑與對比試劑的試驗結(jié)果進行統(tǒng)計，對于不一致樣本，應(yīng)統(tǒng)計例數(shù)，并對經(jīng)確認后的結(jié)果單獨進行說明。與參考方法比對的結(jié)果應(yīng)單獨統(tǒng)計，并依據(jù)結(jié)果對檢測結(jié)果濃度范圍進行說明。

應(yīng)對納入臨床試驗的病例類型進行總結(jié)歸納，說明交叉反應(yīng)及干擾病例的情況。

8.3.3統(tǒng)計方法：可以采用四格表進行統(tǒng)計，報告敏感性（使用確認方法時）、特異性（使用確認方法時）或陽性符合率、陰性符合率、總符合率等，結(jié)果應(yīng)報告95%置信區(qū)間并進行統(tǒng)計檢驗（kappa檢驗、卡方等）。對于聯(lián)檢試劑盒，各檢測項目的檢測結(jié)果應(yīng)分別進行統(tǒng)計并報告。

8.4討論和結(jié)論

對總體結(jié)果進行總結(jié)性描述并簡要分析試驗結(jié)果，對于結(jié)果差異樣本應(yīng)分析原因并討論，對本次臨床研究有無特別說明，最后得出臨床試驗結(jié)論。

四、名詞解釋

分析特異性：是指測量某種方法專門確定特定藥物和/或藥物代謝物、且不與其他有關(guān)物質(zhì)發(fā)生交叉反應(yīng)的能力。

五、參考文獻 

1.《體外診斷試劑注冊管理辦法（試行）》（國食藥監(jiān)械〔2007〕229號），2007年4月19日。

2.《體外診斷試劑臨床研究技術(shù)指導原則》（國食藥監(jiān)械〔2007〕240號），2007年4月28日。

3.《體外診斷試劑說明書編寫指導原則》，（國食藥監(jiān)械〔2007〕240號），2007年4月28日。

4. Mandatory Guidelines for Federal Workplace Drug Testing Programs. DEPARTMENT OF HEALTH AND HUMAN SERVICES，F(xiàn)ederal Register / Vol. 73, No. 228 / Tuesday, November 25, 2008 / Notices。

5. Premarket Submission and Labeling Recommendations for Drugs of Abuse Screening Tests . Draft Guidance for Industry and FDA Staff 。

藥物濫用檢測試劑技術(shù)審查指導原則編制說明

一、背景信息

藥物濫用(Drug Abuse)指非醫(yī)療用途濫用麻醉藥品和精神藥品的一種行為，目的是為體驗該物質(zhì)產(chǎn)生的特殊精神效應(yīng)，其結(jié)果是對所濫用藥物產(chǎn)生藥物依賴，并導致健康、社會和法律后果。

根據(jù)聯(lián)合國《1961年麻醉藥品單一公約》和《1971年精神藥品公約》的規(guī)定, 致依賴性或具有濫用潛力的藥物分為麻醉藥品和精神藥品，前者主要包含三大類：鴉片類、大麻類和可卡因類，后者主要包括中樞興奮劑、鎮(zhèn)靜催眠藥和抗焦慮藥、致幻劑。

在人類社會進人高度文明的今天, 藥物濫用的行為演化到了空前嚴重的程度。我國自20世紀80年代毒品問題死灰復燃以來, 吸毒人數(shù)呈逐年增加趨勢。

鑒于由于藥物依賴性是麻醉藥品、精神藥品的一種特殊行為毒性, 因此藥物濫用監(jiān)測有別于一般的藥物不良反應(yīng)監(jiān)測，藥物濫用檢測試劑的使用目的也有別于一般的用藥檢測試劑。

目前國內(nèi)常用的藥物濫用檢測試劑為應(yīng)用免疫膠體金技術(shù)（ICT）的定性檢測試劑，主要被測物為甲基苯丙胺（冰毒）、嗎啡、四氫大麻酚酸、可卡因、氯胺酮等，用于藥物濫用的初篩。其他免疫檢測方法如酶免疫分析（EIA）等半定量及定量檢測方法國內(nèi)應(yīng)用較少。

二、編制目的

目前，涉及藥物濫用定性檢測試劑研制及注冊申報的生產(chǎn)企業(yè)眾多，雖然不同廠家的產(chǎn)品采用的陽性判斷值基本一致，但產(chǎn)品研發(fā)過程中對產(chǎn)品的認識程度不一，導致產(chǎn)品說明書描述內(nèi)容及使用過程中結(jié)果的差異。雖然《體外診斷試劑注冊管理辦法（試行）》（以下簡稱《辦法》）、《體外診斷試劑說明書編寫指導原則》、《體外診斷試劑臨床研究指導原則》等體外診斷試劑規(guī)范性文件對該類試劑的注冊申報資料提出了原則性要求，但在技術(shù)審評環(huán)節(jié)中仍然遇到許多細節(jié)性技術(shù)問題有待統(tǒng)一。隨著技術(shù)審評工作的不斷積累，對該類產(chǎn)品的技術(shù)要求以及存在問題也逐漸明確，因此，有必要制定相關(guān)的技術(shù)指導原則對這些共性問題進行總結(jié)規(guī)范。

本指導原則旨在讓申請人明確審評部門對本類試劑重點關(guān)注的內(nèi)容、規(guī)范注冊申請人對注冊申報資料的準備及撰寫、解釋企業(yè)在注冊申報過程中對一些常見問題的疑惑、盡量減少技術(shù)審評環(huán)節(jié)的注冊資料補充，同時有利于規(guī)范技術(shù)審評要求，統(tǒng)一審評尺度。本文內(nèi)容不包括注冊審批的行政事項，亦不作為法規(guī)強制執(zhí)行。企業(yè)在實際操作過程中可以采用其他合理方式，但應(yīng)有充分的證據(jù)說明其所用方法可以有力保證試劑的安全有效性。

三、重點技術(shù)問題的說明

（一）規(guī)范了該類試劑的說明書表述。從預期用途、基于研究結(jié)果的參考值的描述、結(jié)構(gòu)類似物及相關(guān)代謝產(chǎn)物的陽性最低濃度的描述等方面，對說明書中重點內(nèi)容進行了規(guī)范要求。

（二）明確了研發(fā)過程及臨床試驗過程中與參考方法的比對的要求。鑒于膠體金方法自身定性的特點，研發(fā)及臨床過程中與同類試劑的比對及對配制標準樣本的驗證均無法充分體現(xiàn)試劑對臨床樣本的真實檢測性能，因此采用參考方法對臨床樣本進行驗證，能夠反應(yīng)此類試劑檢測臨床樣本的真實性能。

（三）明確了對檢測目標化合物的結(jié)構(gòu)類似物及相關(guān)代謝產(chǎn)物的研究要求。限于試劑本身所使用的抗體特性，因此試劑檢出的往往不限于目標化合物，還包括其結(jié)構(gòu)類似物。而此類試劑在臨床使用過程中所檢測得臨床樣本中也多含有相關(guān)結(jié)構(gòu)類似物或代謝產(chǎn)物，因此在研發(fā)階段對這部分性能進行確認并在說明書中進行描述至關(guān)重要。

（四）參考品設(shè)置。企業(yè)所用參考品均為購買的相應(yīng)標準品進行配制，但所使用的標準品有硫酸鹽、鹽酸鹽等多種形式，鑒于不同企業(yè)試劑參考值設(shè)置基本相同，為避免臨床使用過程中結(jié)果差異，強調(diào)企業(yè)參考品的設(shè)置濃度應(yīng)以單純堿基的含量進行計算，分子量中應(yīng)扣除鹽酸、硫酸等的分子量。

（五）臨床研究中對于已有同類產(chǎn)品上市的考核試劑，除選擇境內(nèi)已批準上市的同類產(chǎn)品進行平行比對外，還應(yīng)選擇不少于30例樣本進行參考方法的對比實驗研究，重點考核參考值附近樣本的檢測性能。如無同類試劑上市，應(yīng)選擇參考方法進行比對。臨床試驗的陽性樣本比例應(yīng)考慮本類試劑的適用范圍，建議陽性比例以不低于50%為宜，罕見的低流行的濫用藥物檢測試劑臨床試驗中陽性樣本例數(shù)亦不應(yīng)低于30%。

四、編寫單位

國家食品藥品監(jiān)督管理總局醫(yī)療器械技術(shù)審評中心。