真菌（1-3）-β-D葡聚糖測(cè)定試劑注冊(cè)審查指導(dǎo)原則（2022年第35號(hào)）

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真菌（1-3）-β-D葡聚糖測(cè)定試劑注冊(cè)審查指導(dǎo)原則

本指導(dǎo)原則旨在指導(dǎo)注冊(cè)申請(qǐng)人對(duì)真菌（1-3）-β-D葡聚糖測(cè)定（Fungus（1-3）-β-D-glucan）試劑注冊(cè)申報(bào)資料的準(zhǔn)備及撰寫，同時(shí)也為技術(shù)審評(píng)部門審評(píng)注冊(cè)申報(bào)資料提供參考。

本指導(dǎo)原則是對(duì)真菌（1-3）-β-D葡聚糖測(cè)定的一般要求，申請(qǐng)人應(yīng)依據(jù)產(chǎn)品的具體特性確定其中的具體內(nèi)容是否適用，若不適用，需具體闡述理由及相應(yīng)的科學(xué)依據(jù)，并依據(jù)產(chǎn)品的具體特征對(duì)注冊(cè)申報(bào)資料的內(nèi)容進(jìn)行充實(shí)和細(xì)化。

本指導(dǎo)原則是供申請(qǐng)人和審查人員適用的指導(dǎo)文件，不涉及注冊(cè)審批等行政事項(xiàng)，亦不作為法規(guī)強(qiáng)制執(zhí)行，如果有能夠滿足相關(guān)法規(guī)要求的其他方法，也可以采用，但應(yīng)提供詳細(xì)的研究資料和驗(yàn)證資料。應(yīng)在遵循相關(guān)法規(guī)、國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的前提下使用本指導(dǎo)原則。

本指導(dǎo)原則是在現(xiàn)行法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)體系及當(dāng)前認(rèn)知水平下制定的，隨著法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)體系的不斷完善和科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，本指導(dǎo)原則相關(guān)內(nèi)容也將適時(shí)進(jìn)行調(diào)整。

一、適用范圍

本指導(dǎo)原則適用于以分光光度法體外定量測(cè)定人血清、血漿樣本中真菌（1-3）-β-D葡聚糖濃度的試劑盒。

本指導(dǎo)原則不適用于：

1.擬用于單獨(dú)銷售的真菌（1-3）-β-D葡聚糖校準(zhǔn)品和真菌（1-3）-β-D葡聚糖質(zhì)控品;

2.化學(xué)發(fā)光等免疫法的真菌（1-3）-β-D葡聚糖測(cè)定試劑。

3.定性檢測(cè)試劑可參照本指導(dǎo)原則中的適用部分。

二、注冊(cè)審查要點(diǎn)

（一）監(jiān)管信息

應(yīng)按《體外診斷試劑注冊(cè)申報(bào)資料要求及說(shuō)明》的要求提交申請(qǐng)表、術(shù)語(yǔ)縮寫詞列表、產(chǎn)品列表、關(guān)聯(lián)文件、申報(bào)前與監(jiān)管機(jī)構(gòu)的聯(lián)系情況和溝通記錄、符合性聲明以及其它相關(guān)信息。

1.產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品名稱一般由三部分組成。第一部分：被測(cè)物名稱;第二部分：用途，如測(cè)定試劑盒;第三部分：方法或者原理，如顯色法等，本部分應(yīng)當(dāng)在括號(hào)中列出。

2.分類依據(jù)

根據(jù)《體外診斷試劑分類子目錄》，真菌（1-3）-β-D葡聚糖測(cè)定試劑管理類別為二類，分類編碼為6840。

3.注冊(cè)單元?jiǎng)澐?/p>

真菌（1-3）-β-D葡聚糖測(cè)定試劑如包含不同的包裝規(guī)格，不同規(guī)格間僅試劑組分裝量或檢測(cè)數(shù)有差異，原則上劃分為同一注冊(cè)單元;如包含不同的包裝規(guī)格，不同規(guī)格間除試劑裝量或檢測(cè)數(shù)的差異外，適用于不同的儀器機(jī)型，原則上劃分為同一注冊(cè)單元。校準(zhǔn)品、質(zhì)控品可以與配合使用的真菌（1-3）-β-D葡聚糖測(cè)定試劑合并申請(qǐng)注冊(cè)，也可以單獨(dú)申請(qǐng)注冊(cè)。

（二）綜述資料

應(yīng)按《體外診斷試劑注冊(cè)申報(bào)資料要求及說(shuō)明》的要求提交概述、產(chǎn)品描述、預(yù)期用途、申報(bào)產(chǎn)品上市歷史等資料。其中，需注意以下內(nèi)容：

1.預(yù)期用途

真菌（1-3）-β-D葡聚糖測(cè)定試劑用于體外定量測(cè)定人血清、血漿樣本中真菌（1-3）-β-D葡聚糖濃度，臨床上主要用于深部真菌感染的輔助診斷。

2.預(yù)期使用環(huán)境

應(yīng)明確該產(chǎn)品預(yù)期使用的地點(diǎn)，應(yīng)說(shuō)明對(duì)溫度、濕度等要求。

3.臨床適應(yīng)證

葡聚糖廣泛存在于真菌細(xì)胞壁，真菌（1-3）-β-D葡聚糖占真菌細(xì)胞壁成分的50%以上，是真菌細(xì)胞壁上的特有成分。真菌進(jìn)入人體血液或深部組織后，經(jīng)吞噬細(xì)胞的吞噬、消化等處理，真菌（1-3）-β-D葡聚糖可從細(xì)胞壁釋放，使血液及其他體液中含量增高;而在淺部真菌感染時(shí)，真菌（1-3）-β-D葡聚糖未被釋放，故其在體液中的含量不增高，因此真菌（1-3）-β-D葡聚糖可以作為侵襲性真菌感染的早期診斷指標(biāo)。可用于念珠菌血癥（白色念珠菌、克柔念珠菌及熱帶念珠菌等）、肺孢子菌、鐮刀菌、組織胞漿菌、毛孢子菌等真菌感染的輔助診斷、療效監(jiān)測(cè)及預(yù)后判斷。

（三）非臨床資料

1.產(chǎn)品風(fēng)險(xiǎn)管理資料

該類產(chǎn)品在進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)分析時(shí)至少應(yīng)考慮下述主要危害，注冊(cè)申請(qǐng)人還應(yīng)結(jié)合產(chǎn)品自身特點(diǎn)確定其他危害。

研發(fā)過(guò)程中的錯(cuò)誤包括：未作適用機(jī)型驗(yàn)證，未針對(duì)特定的樣本類型驗(yàn)證;性能特征失效包括：精密度失效，準(zhǔn)確度失效，非特異性，穩(wěn)定性失效，測(cè)量范圍失效，校準(zhǔn)失效;可能的生產(chǎn)錯(cuò)誤包括：配方錯(cuò)誤，采購(gòu)的原料未能達(dá)到設(shè)計(jì)要求的性能，原材料儲(chǔ)存條件不正確，使用了過(guò)期的原材料，反應(yīng)體系不正確，試劑與包裝材料不相容，生產(chǎn)者未按照生產(chǎn)流程操作，檢驗(yàn)者未按照原料、半成品、成品檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作，裝配過(guò)程組分、標(biāo)簽、說(shuō)明書等漏裝或誤裝;可能的使用錯(cuò)誤包括：成品儲(chǔ)存或運(yùn)輸不當(dāng)，客戶未參照產(chǎn)品說(shuō)明書設(shè)置參數(shù)或使用。與安全性有關(guān)的特征包括：有毒化學(xué)試劑的化學(xué)污染、樣本的潛在生物污染、不可回收包裝或塑料的環(huán)境污染。

2.產(chǎn)品技術(shù)要求及檢驗(yàn)報(bào)告

2.1產(chǎn)品技術(shù)要求

顯色法產(chǎn)品技術(shù)要求應(yīng)不低于YY/T 1729《真菌（1-3）-β-D葡聚糖測(cè)定試劑盒》的要求，濁度法產(chǎn)品技術(shù)要求可參照?qǐng)?zhí)行。性能指標(biāo)應(yīng)至少包括外觀、裝量、準(zhǔn)確度、線性、空白限、檢出限、重復(fù)性、批內(nèi)瓶間差（如適用）、批間差、分析特異性。

如注冊(cè)單元中包含校準(zhǔn)品或質(zhì)控品，其性能指標(biāo)和檢驗(yàn)方法應(yīng)在技術(shù)要求中予以描述，應(yīng)當(dāng)包括準(zhǔn)確度、均勻性、開(kāi)瓶/復(fù)溶穩(wěn)定性。如有新版強(qiáng)制性國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)發(fā)布實(shí)施，應(yīng)參照?qǐng)?zhí)行。

2.2檢驗(yàn)報(bào)告

應(yīng)按相關(guān)法規(guī)要求提交檢驗(yàn)報(bào)告，如有國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品，應(yīng)采用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品。

3.分析性能評(píng)估資料

申請(qǐng)人應(yīng)當(dāng)提交3批產(chǎn)品的分析性能評(píng)估資料，主要原材料和生產(chǎn)工藝經(jīng)過(guò)選擇和確認(rèn)后，在有效質(zhì)量管理體系下生產(chǎn)的質(zhì)量穩(wěn)定的體外診斷試劑產(chǎn)品，方可進(jìn)行性能評(píng)估，用于注冊(cè)申報(bào)。

對(duì)于每項(xiàng)分析性能的評(píng)估都應(yīng)包括具體的研究項(xiàng)目、試驗(yàn)設(shè)計(jì)、研究方法、可接受標(biāo)準(zhǔn)、試驗(yàn)數(shù)據(jù)、統(tǒng)計(jì)方法、研究結(jié)論等詳細(xì)資料。性能評(píng)估時(shí)應(yīng)將試劑和所選用的校準(zhǔn)品、質(zhì)控品作為一個(gè)整體進(jìn)行評(píng)價(jià)，評(píng)估整個(gè)系統(tǒng)的性能是否符合要求。有關(guān)分析性能驗(yàn)證的背景信息也應(yīng)在申報(bào)資料中有所體現(xiàn)，包括試驗(yàn)時(shí)間、地點(diǎn)、檢驗(yàn)人員、適用儀器、試劑規(guī)格和批號(hào)、所選用的校準(zhǔn)品和質(zhì)控品（品牌、規(guī)格、批號(hào)等）、臨床樣本來(lái)源等。

如試劑用于不同適用機(jī)型，需要在不同機(jī)型上分別進(jìn)行性能評(píng)估。但并不意味著，每個(gè)適用機(jī)型均采用相同的性能評(píng)估試驗(yàn)方案，對(duì)于某些性能，可采用主機(jī)型進(jìn)行充分的性能研究，其他機(jī)型采用驗(yàn)證的試驗(yàn)方案進(jìn)行，具體要求見(jiàn)分析性能評(píng)估的項(xiàng)目具體要求。但對(duì)于主機(jī)型的判斷，應(yīng)有充分依據(jù)。

3.1樣本穩(wěn)定性

申請(qǐng)人應(yīng)充分考慮實(shí)際使用過(guò)程中樣本采集、處理、運(yùn)輸及保存等各個(gè)階段的條件，對(duì)不同類型樣本的穩(wěn)定性分別進(jìn)行評(píng)價(jià)并提交研究資料。內(nèi)容包括建議的保存條件、添加劑（如抗凝劑）和運(yùn)輸條件（如涉及）等。

樣本穩(wěn)定性應(yīng)考慮在不同儲(chǔ)存條件（室溫保存、冷藏和冷凍）下對(duì)不同類型樣本進(jìn)行有效期驗(yàn)證，建議申請(qǐng)人選擇合理溫度范圍/溫度點(diǎn)，每間隔一定的時(shí)間段對(duì)儲(chǔ)存樣本進(jìn)行穩(wěn)定性驗(yàn)證，從而確認(rèn)樣本在不同溫度下儲(chǔ)存的有效期。冷凍儲(chǔ)存的樣本需考慮凍融次數(shù)對(duì)穩(wěn)定性的影響并進(jìn)行驗(yàn)證。

3.2適用的樣本類型

申請(qǐng)人應(yīng)對(duì)適用的樣本類型及添加劑進(jìn)行適用性確認(rèn)。如果申報(bào)試劑適用樣本類型同時(shí)包括血清、血漿樣本，應(yīng)采用各種適用抗凝劑抗凝的血漿樣本分別與血清樣本進(jìn)行對(duì)比試驗(yàn)研究。方法為對(duì)比線性范圍內(nèi)的同一病人的血清和血漿樣本（應(yīng)包含參考值以及低值濃度樣本）的檢測(cè)結(jié)果，樣本量選擇應(yīng)體現(xiàn)一定的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，以驗(yàn)證申報(bào)試劑對(duì)于血清和血漿樣本檢測(cè)結(jié)果的一致性。如果選擇具有代表性的樣本類型代替其他可比的樣本類型進(jìn)行分析性能評(píng)估，應(yīng)說(shuō)明原因并提供證據(jù)支持。

應(yīng)以列表形式說(shuō)明各項(xiàng)分析性能評(píng)估中使用的樣本類型及其來(lái)源。

3.3校準(zhǔn)品的量值溯源和質(zhì)控品的賦值

申請(qǐng)人應(yīng)明確申報(bào)產(chǎn)品適用的校準(zhǔn)品和質(zhì)控品。

如申報(bào)產(chǎn)品包括質(zhì)控品和校準(zhǔn)品時(shí)，校準(zhǔn)品應(yīng)當(dāng)提交完整的溯源性文件，包括溯源試驗(yàn)資料和溯源SOP文件等。應(yīng)參照GB/T 21415《體外診斷醫(yī)療器械 生物樣品中量的測(cè)量 校準(zhǔn)品和控制物質(zhì)賦值的計(jì)量學(xué)溯源性》的要求，提供企業(yè)（工作）校準(zhǔn)品及試劑盒配套校準(zhǔn)品定值及不確定度計(jì)算相關(guān)資料，提供質(zhì)控品賦值及其質(zhì)控范圍確定的相關(guān)資料。同時(shí)，應(yīng)對(duì)校準(zhǔn)品、質(zhì)控品的瓶?jī)?nèi)均勻性、瓶間均勻性，以及其賦值結(jié)果的準(zhǔn)確度進(jìn)行評(píng)價(jià)。如校準(zhǔn)品或質(zhì)控品的基質(zhì)不同于臨床常用樣本類型，還應(yīng)提交校準(zhǔn)物質(zhì)互換性的相關(guān)研究資料。

3.4準(zhǔn)確度

對(duì)測(cè)量準(zhǔn)確度的評(píng)價(jià)依次包括：與參考物質(zhì)的相對(duì)偏差、回收試驗(yàn)等方法，申請(qǐng)人可根據(jù)實(shí)際情況選擇合理方法進(jìn)行研究。

3.4.1相對(duì)偏差法

試劑盒測(cè)試可用于評(píng)價(jià)常規(guī)測(cè)量方法的有證參考物質(zhì)。采用至少兩個(gè)水平的參考物質(zhì)，代表試劑測(cè)量范圍的高、低濃度，進(jìn)行重復(fù)檢測(cè)至少3次。

注：首選國(guó)家參考物質(zhì)，如無(wú)國(guó)家參考物質(zhì)可選用國(guó)際參考物質(zhì)。

3.4.2回收試驗(yàn)

將已知標(biāo)準(zhǔn)溶液/高濃度參考物質(zhì)或被測(cè)物純品加入臨床樣本中，配制成回收樣品，進(jìn)行檢測(cè)。檢測(cè)至少三個(gè)水平的回收樣品，代表試劑測(cè)量范圍的高、中、低濃度，其中一份回收樣品的濃度在參考區(qū)間界值附近。每個(gè)濃度重復(fù)檢測(cè)至少3次?；厥赵囼?yàn)注意事項(xiàng)：

3.4.2.1所加標(biāo)準(zhǔn)溶液與陰性樣本基質(zhì)之間的體積比例應(yīng)不會(huì)產(chǎn)生基質(zhì)的變化，一般在陰性樣本基質(zhì)的5%以內(nèi)并且保證在加樣過(guò)程中的取樣準(zhǔn)確度;

3.4.2.2保證總濃度在方法分析測(cè)量范圍內(nèi)，盡量使加入標(biāo)準(zhǔn)溶液后樣本中的被測(cè)物濃度達(dá)到參考區(qū)間界值;

3.4.2.3為減少基質(zhì)效應(yīng)，盡量采用與臨床待測(cè)樣本接近的基質(zhì)。

3.5精密度

針對(duì)本類產(chǎn)品的精密度評(píng)價(jià)應(yīng)至少進(jìn)行重復(fù)性和批間差的研究。建議選擇至少2個(gè)濃度水平的樣本進(jìn)行精密度的研究，代表試劑測(cè)量范圍的高、低不同濃度，并根據(jù)產(chǎn)品特性設(shè)定適當(dāng)?shù)木芏纫蟆?/p>

3.6空白限、檢出限

申請(qǐng)人可參考國(guó)際或國(guó)內(nèi)有關(guān)體外診斷產(chǎn)品性能評(píng)估的文件確定真菌（1-3）-β-D葡聚糖試劑盒的空白限、檢出限等相關(guān)信息。

3.6.1空白限：用試劑盒測(cè)試空白樣本（包括緩沖液等），重復(fù)測(cè)試20次，根據(jù)測(cè)量結(jié)果的平均值（`x）和標(biāo)準(zhǔn)差（SD），計(jì)算`x+2SD及其對(duì)應(yīng)的濃度值，結(jié)果應(yīng)符合規(guī)定要求。

3.6.2檢出限：檢出限的建立一般由多個(gè)低濃度（含有分析物）樣本的檢測(cè)結(jié)果，結(jié)合空白限進(jìn)行計(jì)算獲得，應(yīng)根據(jù)具體產(chǎn)品的原理、檢測(cè)結(jié)果差異和分布，選擇合適的模型和分析方法進(jìn)行計(jì)算?？蓞⒖枷嚓P(guān)要求進(jìn)行評(píng)估。

驗(yàn)證時(shí)可配制5份濃度近似檢出限的低值樣本進(jìn)行檢測(cè)，每份樣本檢測(cè)5次，對(duì)檢測(cè)結(jié)果按照大小進(jìn)行排序，當(dāng)?shù)陀谏暾?qǐng)人提供的空白限數(shù)值的檢測(cè)結(jié)果數(shù)量小于或等于3個(gè)，若適用時(shí)，無(wú)高于申請(qǐng)人提供的參考區(qū)間下限的檢測(cè)結(jié)果的數(shù)值時(shí)，即可認(rèn)為申請(qǐng)人預(yù)先設(shè)定檢出限符合要求，如不符合，申請(qǐng)人需調(diào)整預(yù)設(shè)的檢出限濃度，直至符合該條件。

3.6.3注意事項(xiàng)：空白樣本應(yīng)不含被測(cè)物，根據(jù)測(cè)定項(xiàng)目選用相應(yīng)基質(zhì)的樣本，但應(yīng)注意將基質(zhì)效應(yīng)減至最小。

3.7分析特異性

推薦參考《干擾實(shí)驗(yàn)指南》或相關(guān)國(guó)際、國(guó)內(nèi)有關(guān)體外診斷產(chǎn)品性能評(píng)估的文件進(jìn)行特異性評(píng)估。

3.7.1干擾反應(yīng)

采用至少兩個(gè)被測(cè)物水平的樣本，對(duì)樣本中可疑干擾物質(zhì)采用相對(duì)較高的濃度進(jìn)行干擾篩查，干擾物濃度的分布需覆蓋人體生理及病理狀態(tài)下可能出現(xiàn)的物質(zhì)濃度，如內(nèi)源性干擾物膽紅素、血紅蛋白、甘油三酯等，方法為對(duì)模擬添加樣本分別進(jìn)行驗(yàn)證，說(shuō)明樣本的制備方法及干擾實(shí)驗(yàn)的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，確定可接受的干擾物質(zhì)濃度（結(jié)果應(yīng)量化表示，避免使用輕度、嚴(yán)重等模糊表述）。

藥物干擾的研究可根據(jù)需要由申請(qǐng)人選擇是否進(jìn)行或選擇何種藥物及其濃度進(jìn)行。

3.7.2交叉反應(yīng)

易產(chǎn)生交叉反應(yīng)的其他物質(zhì)的驗(yàn)證情況，制備臨床可見(jiàn)高濃度水平的內(nèi)毒素、革蘭陰性菌脂多糖（LPS）、脂磷壁酸（LTA）、革蘭陽(yáng)性菌脂多糖作為干擾物質(zhì)，加入干擾物質(zhì)前后的檢測(cè)濃度差值的絕對(duì)值應(yīng)不超過(guò)空白限。同時(shí)考慮酵母甘露聚糖、半乳甘露聚糖等物質(zhì)的交叉反應(yīng)，進(jìn)行必要的分析驗(yàn)證。

3.8線性

建立試劑線性范圍所用的樣本基質(zhì)應(yīng)與臨床樣本相似，但不可采用含有對(duì)測(cè)定方法具有明確干擾作用物質(zhì)的樣本。理想的樣本為分析物濃度接近預(yù)期測(cè)定上限的混合人血清或血漿，且應(yīng)充分考慮多倍稀釋對(duì)樣本基質(zhì)的影響。建立一種定量測(cè)定方法的線性范圍時(shí)，需在預(yù)期測(cè)定范圍內(nèi)選擇7～11個(gè)濃度水平（建議采用梯度稀釋）。例如，將預(yù)期測(cè)定范圍加寬至130%，在此范圍內(nèi)選擇更多的濃度水平，然后依據(jù)試驗(yàn)結(jié)果逐漸減少數(shù)據(jù)點(diǎn)直至表現(xiàn)出線性關(guān)系，可發(fā)現(xiàn)最寬的線性范圍。

驗(yàn)證線性范圍時(shí)可選擇5～7個(gè)濃度水平的混合人血清或血漿。所選用的濃度水平應(yīng)可覆蓋整個(gè)預(yù)期測(cè)定范圍并包括與臨床有關(guān)的重要評(píng)價(jià)濃度，如最小測(cè)定濃度或線性范圍的最低限、不同的參考區(qū)間界值、最大測(cè)定濃度或線性范圍的高限等。采用申報(bào)試劑對(duì)每個(gè)濃度至少重復(fù)測(cè)試3次，計(jì)算平均值，將結(jié)果平均值和理論濃度或稀釋比例用最小二乘法進(jìn)行線性擬合，計(jì)算線性相關(guān)系數(shù)r，線性范圍應(yīng)覆蓋[50, 500] pg/mL，在申請(qǐng)人宣稱的線性范圍內(nèi)，相關(guān)系數(shù)r應(yīng)≥0.980。

3.9生物安全性（如適用）

試劑盒如含人源性成分，至少使用經(jīng)過(guò)國(guó)家批準(zhǔn)合格的人類免疫缺陷病毒抗體診斷試劑盒、丙型肝炎病毒抗體診斷試劑盒、乙型肝炎病毒表面抗原診斷試劑盒、梅毒螺旋抗體診斷試劑盒，對(duì)該成分進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果應(yīng)均為陰性。

4.穩(wěn)定性研究資料

穩(wěn)定性研究可參考YY/T 1579《體外診斷醫(yī)療器械體外診斷試劑穩(wěn)定性評(píng)價(jià)》的相關(guān)要求進(jìn)行研究。主要包括實(shí)時(shí)穩(wěn)定性、開(kāi)瓶（復(fù)溶）穩(wěn)定性、溶解后凍存穩(wěn)定性（若涉及）、運(yùn)輸穩(wěn)定性等研究，申請(qǐng)人可根據(jù)實(shí)際需要選擇合理的穩(wěn)定性研究方案。穩(wěn)定性研究資料應(yīng)包括研究方法的確定依據(jù)、具體的試驗(yàn)方案、過(guò)程、詳細(xì)的研究數(shù)據(jù)以及結(jié)論。對(duì)于實(shí)時(shí)穩(wěn)定性研究，應(yīng)提供至少三批樣品在實(shí)際儲(chǔ)存條件下保存至成品有效期后的穩(wěn)定性研究資料。如產(chǎn)品包含校準(zhǔn)品和質(zhì)控品，應(yīng)提供相應(yīng)穩(wěn)定性試驗(yàn)研究資料。

5.參考區(qū)間確定資料

應(yīng)提交建立/驗(yàn)證參考區(qū)間所采用樣本來(lái)源、詳細(xì)的試驗(yàn)資料、統(tǒng)計(jì)方法等。明確參考人群的納入、排除標(biāo)準(zhǔn)，離群值的處理，考慮不同年齡、性別、生活習(xí)慣、地域等因素，盡可能考慮樣本來(lái)源的多樣性、代表性，樣本例數(shù)應(yīng)符合統(tǒng)計(jì)學(xué)要求。

建議申請(qǐng)人根據(jù)臨床實(shí)際情況，參考《臨床實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)項(xiàng)目參考區(qū)間的制定》或其他國(guó)際國(guó)內(nèi)權(quán)威文件來(lái)確定申報(bào)試劑的參考區(qū)間。

6.其他資料

6.1主要原材料的研究資料（如需提供）

6.1.1主要原材料的選擇、制備、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及試驗(yàn)驗(yàn)證研究資料

檢測(cè)試劑所用原料的制備、篩選、純化以及鑒定等詳細(xì)試驗(yàn)資料。如原料為申請(qǐng)人自制，則應(yīng)詳述原料的名稱及生物學(xué)來(lái)源，申請(qǐng)人對(duì)該原料技術(shù)指標(biāo)的要求（如外觀、純度、濃度等），且其生產(chǎn)工藝必須相對(duì)穩(wěn)定，并對(duì)其工藝有相關(guān)的驗(yàn)證。如為申請(qǐng)人外購(gòu)，則應(yīng)詳述其名稱及生物學(xué)來(lái)源，供應(yīng)商名稱，提交供應(yīng)商出具的性能指標(biāo)及檢驗(yàn)報(bào)告，詳述申請(qǐng)人對(duì)該原料技術(shù)指標(biāo)的要求以及申請(qǐng)人確定該原料作為主要原材料的依據(jù)。供應(yīng)商應(yīng)相對(duì)固定。

6.1.2質(zhì)控品、校準(zhǔn)品的原料選擇、制備、定值過(guò)程及試驗(yàn)資料。

6.2主要生產(chǎn)工藝和反應(yīng)體系的研究資料（如需提供）

6.2.1主要生產(chǎn)工藝的介紹，可以流程圖方式表示，并簡(jiǎn)要說(shuō)明主要生產(chǎn)工藝的確定方法，如各組分制備的工藝、試劑的配方及工藝關(guān)鍵參數(shù)的確定等。企業(yè)應(yīng)采用經(jīng)過(guò)驗(yàn)證，能夠保證產(chǎn)品質(zhì)量的生產(chǎn)工藝。

6.2.2反應(yīng)體系主要包括：樣本采集及處理、樣本要求，確定反應(yīng)校準(zhǔn)品、樣本和試劑的用量，反應(yīng)條件（緩沖體系、濃度、時(shí)間、溫度、波長(zhǎng)等條件）的確認(rèn)資料及試驗(yàn)數(shù)據(jù)，校準(zhǔn)方法、質(zhì)控方法等。

6.2.3不同適用機(jī)型的反應(yīng)條件如果有差異應(yīng)分別闡述。

（四）臨床評(píng)價(jià)資料

該產(chǎn)品列入《免于臨床評(píng)價(jià)醫(yī)療器械目錄》，申請(qǐng)人無(wú)需提交臨床評(píng)價(jià)資料。

（五）產(chǎn)品說(shuō)明書和標(biāo)簽樣稿

產(chǎn)品說(shuō)明書的所有內(nèi)容均應(yīng)與申請(qǐng)人提交的注冊(cè)申報(bào)資料中的相關(guān)研究結(jié)果保持一致，如某些內(nèi)容引用自參考文獻(xiàn)，則應(yīng)以規(guī)范格式對(duì)此內(nèi)容進(jìn)行標(biāo)注，并單獨(dú)列明參考文獻(xiàn)的相關(guān)信息。

以下僅對(duì)真菌（1-3）-β-D葡聚糖測(cè)定試劑說(shuō)明書的重點(diǎn)內(nèi)容進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明。

1.【產(chǎn)品名稱】

通用名稱，試劑名稱由三部分組成：被測(cè)物名稱、用途、方法或原理。例如：真菌（1-3）-β-D葡聚糖測(cè)定試劑盒（顯色法）。

2.【包裝規(guī)格】

注明可測(cè)試的樣本數(shù)或裝量，如××測(cè)試/盒、××人份/盒、××mL，除國(guó)際通用計(jì)量單位外，其余內(nèi)容均應(yīng)采用中文進(jìn)行表述。

2.1包裝規(guī)格應(yīng)明確單、雙試劑類型。

2.2應(yīng)與產(chǎn)品技術(shù)要求中所列的包裝規(guī)格一致。

2.3如不同包裝規(guī)格有對(duì)應(yīng)不同的機(jī)型，應(yīng)分別明確適用機(jī)型。

3.【預(yù)期用途】

應(yīng)至少包括以下幾部分內(nèi)容：

3.1說(shuō)明試劑盒用于體外定量測(cè)定人血清或血漿中真菌（1-3）-β-D葡聚糖的濃度，臨床上主要用于深部真菌感染的輔助診斷。同時(shí)應(yīng)明確與目的檢測(cè)物相關(guān)的臨床適應(yīng)證背景情況，說(shuō)明相關(guān)的臨床或?qū)嶒?yàn)室診斷方法等。

3.2真菌（1-3）-β-D葡聚糖濃度異常情況常見(jiàn)于哪些疾病，其升高或降低可能有哪些醫(yī)學(xué)解釋。

3.3作為支持性資料，申請(qǐng)人應(yīng)在注冊(cè)申報(bào)資料中提供有關(guān)臨床適應(yīng)證背景的文獻(xiàn)資料，并將文獻(xiàn)名稱列入說(shuō)明書的參考文獻(xiàn)中。

4.【檢驗(yàn)原理】

應(yīng)結(jié)合產(chǎn)品主要成分詳細(xì)說(shuō)明檢驗(yàn)的原理、方法，必要時(shí)可采取圖示方法表示。

5.【主要組成成分】

應(yīng)明確以下內(nèi)容：

試劑盒包含的試劑組分的名稱、數(shù)量、每個(gè)組成成分在反應(yīng)體系中的比例或濃度、其生物學(xué)來(lái)源、活性及其他特性。明確說(shuō)明不同批號(hào)試劑盒中各組分是否可以互換。

試劑內(nèi)如包含校準(zhǔn)品和/或質(zhì)控品，除明確組成成分及生物學(xué)來(lái)源外，還應(yīng)明確校準(zhǔn)品定值及溯源性，溯源性應(yīng)寫明溯源的最高級(jí)別，包括標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)或參考物的發(fā)布單位及編號(hào)，質(zhì)控品應(yīng)明確靶值范圍，如校準(zhǔn)品定值或質(zhì)控品靶值范圍為批特異，可注明批特異，并附單獨(dú)的定值單或靶值單。

對(duì)于非試劑組分，如試驗(yàn)用耗材（塑料滴管、封板膜、自封袋）、質(zhì)量控制證書、校準(zhǔn)卡等，應(yīng)注明相關(guān)信息。

6.【儲(chǔ)存條件及有效期】

6.1對(duì)試劑盒的效期穩(wěn)定性、開(kāi)瓶穩(wěn)定性等信息做詳細(xì)介紹，包括環(huán)境溫濕度、避光條件等影響穩(wěn)定性的條件。如注冊(cè)單元含校準(zhǔn)品或質(zhì)控品且其形態(tài)為干粉（包含試劑為凍干粉狀態(tài)），則應(yīng)對(duì)復(fù)溶后的儲(chǔ)存條件、穩(wěn)定性做詳細(xì)介紹。如試劑需要配制，則應(yīng)對(duì)配制后的試劑的儲(chǔ)存條件、穩(wěn)定性做詳細(xì)介紹。包括環(huán)境溫濕度、避光條件等。

6.2不同組分保存條件及有效期不同時(shí)，應(yīng)分別說(shuō)明。

6.3對(duì)于可以冷凍的試劑應(yīng)注明凍融次數(shù)限制。

6.4注明生產(chǎn)日期、使用期限或失效日期（可見(jiàn)標(biāo)簽）。

注：保存條件不應(yīng)有模糊表述，如“室溫”，應(yīng)明確貯存溫度，如2℃～8℃，有效期12個(gè)月。穩(wěn)定期限應(yīng)以月或日或小時(shí)為單位。

7.【適用儀器】

說(shuō)明可適用的儀器及型號(hào)，不能泛指某一系列儀器，并提供與儀器有關(guān)的信息以便用戶能夠正確選擇使用;若不同規(guī)格適用不同機(jī)型也應(yīng)說(shuō)明，且與分析性能評(píng)估資料一致。

8.【樣本要求】

重點(diǎn)明確以下內(nèi)容：

8.1樣本采集：說(shuō)明采集方法及樣本類型，如有血漿樣本，應(yīng)注明對(duì)抗凝劑的要求。

8.2樣本處理及保存：樣本處理方法、保存條件及期限、運(yùn)輸條件等。冷藏/冷凍樣本檢測(cè)前是否須恢復(fù)室溫，凍融次數(shù)。對(duì)儲(chǔ)存樣本的添加劑要求等，應(yīng)與樣本穩(wěn)定性的研究一致。

8.3抗干擾能力，應(yīng)與分析性能評(píng)估資料一致。

9.【檢驗(yàn)方法】

為保證試劑的正確性，應(yīng)在以下幾個(gè)方面對(duì)試驗(yàn)操作的每一步驟進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明，包括：

9.1試劑配制：詳細(xì)說(shuō)明各試劑組分的稀釋、混合及其他必要的處理程序、試劑的使用方法（手工/半自動(dòng)/全自動(dòng)）、注意事項(xiàng)等。

9.2試驗(yàn)條件：如pH值、溫度、每一步試驗(yàn)所需的時(shí)間、測(cè)定主/副波長(zhǎng)、試劑用量、樣本用量、測(cè)定方法、最終反應(yīng)產(chǎn)物的穩(wěn)定性等。待測(cè)樣品的預(yù)處理方法、試驗(yàn)過(guò)程中的注意事項(xiàng)。

9.3校準(zhǔn)程序（如需要）：校準(zhǔn)品的使用方法、步驟、注意事項(xiàng)，校準(zhǔn)有效期及需要重新校準(zhǔn)的情況。對(duì)于適用于手工/半自動(dòng)儀器的試劑（盒）產(chǎn)品，應(yīng)說(shuō)明校準(zhǔn)曲線的繪制方法。

9.4質(zhì)量控制程序：質(zhì)控品的使用方法、質(zhì)量控制方法，對(duì)質(zhì)控結(jié)果的必要解釋以及推薦的質(zhì)控周期等。

9.5試驗(yàn)結(jié)果的計(jì)算或讀取，應(yīng)包括對(duì)每個(gè)系數(shù)及每個(gè)計(jì)算步驟的解釋，如果可能舉例說(shuō)明。

10.【參考區(qū)間】

應(yīng)注明常用樣本類型的正常參考區(qū)間，并說(shuō)明參考值確定方法。建議注明“由于地理、人種、性別和年齡等差異，建議各實(shí)驗(yàn)室建立自己的參考區(qū)間”。

11.【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】

說(shuō)明可能對(duì)試驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生影響的因素;說(shuō)明在何種情況下需要進(jìn)行確認(rèn)試驗(yàn)。

若超過(guò)線性范圍上限的高濃度樣本可稀釋后測(cè)定，則應(yīng)說(shuō)明樣本的最大可稀釋倍數(shù)、稀釋溶液等信息。

12.【檢驗(yàn)方法的局限性】

至少應(yīng)包括以下內(nèi)容：

12.1某些真菌產(chǎn)生的除（1-3）-β-D葡聚糖外的其他β-葡聚糖的量可影響該分析物的血清、血漿濃度。

12.2某些健康個(gè)體可能具有較高的β-葡聚糖水平，在這種情況下，建議進(jìn)行額外的試驗(yàn)。

12.3患者試驗(yàn)的頻率將取決于真菌感染的相對(duì)風(fēng)險(xiǎn)。對(duì)于有風(fēng)險(xiǎn)的患者，推薦每周至少2至3次的采樣率。

12.4使用某些纖維素透析膜的血液透析患者、用某些分級(jí)血液制品（例如血清白蛋白和免疫球蛋白）治療的受試者以及暴露于某些含β-葡聚糖的外科用紗布和海綿的標(biāo)本（或受試者）中可能會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。

13.【產(chǎn)品性能指標(biāo)】

至少應(yīng)詳述以下性能指標(biāo)：

13.1空白限

13.2檢出限

13.3準(zhǔn)確度

13.4精密度（重復(fù)性和批間差）

13.5線性

14.【注意事項(xiàng)】

應(yīng)至少包括以下內(nèi)容：

14.1本試劑的檢測(cè)結(jié)果僅供臨床參考，不應(yīng)作為臨床診治的唯一依據(jù)，對(duì)患者的臨床診治應(yīng)結(jié)合其癥狀/體征、病史、其他實(shí)驗(yàn)室檢查及治療反應(yīng)等情況綜合考慮。

14.2使用不同生產(chǎn)商的試劑對(duì)同一份樣本進(jìn)行檢測(cè)可能會(huì)存在差異。

14.3如無(wú)確切的證據(jù)證明其安全性，對(duì)所有樣本和反應(yīng)廢棄物都應(yīng)視為傳染源對(duì)待，提示操作者采取必要的防護(hù)措施。

14.4試劑中含有的化學(xué)成分如接觸人體后會(huì)產(chǎn)生不良的影響，應(yīng)明確給予提示。

14.5請(qǐng)注意，β-葡聚糖以及來(lái)自人體、衣服、容器、水和浮塵的真菌污染可能會(huì)干擾真菌（1-3）-β-D葡聚糖測(cè)定。

14.6如該產(chǎn)品含有人源或動(dòng)物源性物質(zhì)，應(yīng)給出具有潛在感染性的警告。如含有人源性物質(zhì)，應(yīng)提示試劑盒內(nèi)的質(zhì)控品、校準(zhǔn)品或其他人源組分，雖已經(jīng)通過(guò)了HBs-Ag、HIV1/2-Ab、HCV-Ab和Anti-TP等項(xiàng)目的檢測(cè)，但截至目前，沒(méi)有任何一項(xiàng)檢測(cè)可以確保絕對(duì)安全，故仍應(yīng)將這些組分作為潛在傳染源對(duì)待。

14.7說(shuō)明對(duì)所有樣本和反應(yīng)廢棄物都應(yīng)視為傳染源對(duì)待，廢棄物應(yīng)當(dāng)按當(dāng)?shù)胤ㄒ?guī)處置等。

14.8說(shuō)明不同分析系統(tǒng)間的檢測(cè)結(jié)果可能存在的差異。

14.9其他有關(guān)真菌（1-3）-β-D葡聚糖檢測(cè)的注意事項(xiàng)。

（六）質(zhì)量管理體系文件

應(yīng)按《體外診斷試劑注冊(cè)申報(bào)資料要求及說(shuō)明》的要求提交質(zhì)量管理體系文件。

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